目的:1.證明轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）參與間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）向腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）分化的過程,以及證明TGFβ1在促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞侵襲中起到的作用。2.證明TGFβ1通過JAK/STAT3信號(hào)通路來促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）向腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）分化。方法:利用結(jié)直腸癌HCT116和HT29細(xì)胞及骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）三種細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)。用ELISA測(cè)定、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、球體成形實(shí)驗(yàn)、transwell實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGFβ1）在結(jié)直腸癌細(xì)胞侵襲中的作用。流式細(xì)胞儀檢測(cè)間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）到腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）的分化。用qRT-PCR和Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Janus激酶/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子的活性和轉(zhuǎn)錄激活因子3（JAK/STAT3）相關(guān)激活蛋白的信號(hào)通路。結(jié)果:TGF-β1誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）分化為腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）,并且促進(jìn)HCT116和HT29細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲。同時(shí),TGF-β1還上調(diào)了STAT3的磷酸化和增強(qiáng)了p-STAT3的入核,這一結(jié)果表明了JAK/STAT3信號(hào)通路的激活。結(jié)論:TGF-... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

（A）用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)HCT116和HT29細(xì)胞48小時(shí)后，保存培

TGFβ1誘導(dǎo)MSCs向CAFs分化及促進(jìn)CRC細(xì)胞侵襲11的表達(dá)和入核，而AG490或P17則阻斷了這一效應(yīng)，這表明轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1在轉(zhuǎn)移中的作用是以STAT3依賴的方式進(jìn)行的。圖1：（A）用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)HCT116和HT29細(xì)胞48小時(shí)后，保存培養(yǎng)基，通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）測(cè)定TGF-β1、TNF-α、HGF和PDGF水平。*P<0.05，*P<0.01對(duì)Con-CM。注釋：所有圖片縮寫：CON，對(duì)照；MSCs，間充質(zhì)干細(xì)胞；CAFs，癌癥相關(guān)的成纖維細(xì)胞；CM，條件培養(yǎng)基：CRC，結(jié)直腸癌圖2：在無血清培養(yǎng)基（Con-CM）或HCT116或HT29條件培養(yǎng)基（HCT116-CM或HT29-CM）培養(yǎng)48小時(shí)的MSCs的條件。標(biāo)尺，500μm。

碩士學(xué)位論文12圖3：CCK-8法檢測(cè)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在指定時(shí)間內(nèi)的增殖。P<0.05，P<0.01對(duì)Con-CM。圖4：用Con-CM和HCT116-CM或HT29-CM孵育MSCs的球體形成試驗(yàn)。標(biāo)尺，500μm。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2920535