乳腺癌在女性腫瘤中發(fā)病率較高,患者死亡的主要原因是腫瘤發(fā)生轉移。研究發(fā)現(xiàn),緊密連接蛋白claudins（CLDNs）的表達異常能影響緊密連接（tight junctions,TJs）的結構和功能,并通過某些信號通路參與細胞信號轉導,進而在腫瘤轉移過程中發(fā)揮作用。本課題組在前期工作中發(fā)現(xiàn),乳腺癌細胞MCF-7中CLDN6低表達,過表達CLDN6能抑制MCF-7細胞的遷移和侵襲。為了探討CLDN6的作用機制,我們利用基因芯片技術篩查和分析CLDN6的靶基因及相關的信號通路,結果表明,CLDN6過表達后MCF-7細胞的JAKs/STATs信號通路中JAK2、STAT3等表達上調。JAKs/STATs信號通路是細胞因子、趨化因子和生長因子受體下游最主要的信號通路,參與細胞生長、增殖、遷移及侵襲等生物過程。因此,我們推測CLDN6可能直接或間接地激活JAK2/STAT3信號通路,從而發(fā)揮抑制MCF-7細胞遷移和侵襲的作用。但其具體作用機制目前尚不清楚。目的:探討緊密連接蛋白CLDN6通過JAK2/STAT3信號通路抑制乳腺癌細胞MCF-7遷移和侵襲的作用,為乳腺癌的治療提供新的靶點。方法:以前期... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第1章 文獻綜述
    1.1 緊密連接的功能
    1.2 CLDNs的結構和功能
        1.2.1 CLDNs的結構
        1.2.2 CLDNs的功能
    1.3 CLDNs的表達調控
    1.4 CLDNs與腫瘤
        1.4.1 CLDNs與卵巢癌
        1.4.2 CLDNs與前列腺癌
        1.4.3 CLDNs與乳腺癌
    1.5 CLDNs與JAKs/STATs信號通路
    1.6 展望與挑戰(zhàn)
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 主要的試劑耗材
        2.1.3 主要的儀器設備
        2.1.4 主要試劑的配制
        2.1.5 引物和抗體
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 RT-PCR技術檢測CLDN6的表達
        2.2.3 Western-Blot技術檢測CLDN6的表達
        2.2.4 Western-Blot技術檢測p-JAK2、p-STAT3、JAK2和STAT3的表達
        2.2.5 iCelligence實時細胞功能分析儀檢測AG490對克隆組細胞的IC50值
        2.2.6 Western-Blot檢測AG490抑制JAK2激活的最佳作用條件
        2.2.7 細胞劃痕實驗檢測AG490對細胞遷移的影響
        2.2.8 Transwell小室實驗檢測AG490對細胞侵襲的影響
        2.2.9 Western-Blot技術檢測E-cadherin和Vimentin的表達
    2.3 統(tǒng)計方法
第3章 結果
    3.1 克隆組細胞CLDN6表達的鑒定
    3.2 CLDN6對MCF-7細胞EMT的影響
    3.3 CLDN6對MCF-7細胞中JAK2、STAT3表達和激活的影響
    3.4 AG490處理克隆組細胞的IC50值
    3.5 AG490抑制JAK2激活的最適濃度
    3.6 AG490抑制JAK2激活的最適時間
    3.7 AG490對細胞遷移的影響
    3.8 AG490對細胞侵襲的影響
    3.9 AG490對EMT的影響
第4章 討論
    4.1 序言
    4.2 CLDN6抑制MCF-7細胞的遷移、侵襲及EMT
    4.3 CLDN6抑制MCF-7細胞遷移和侵襲作用的機制
第5章 結論
參考文獻
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
碩士論文
[1]MCF-7細胞中CLDN6靶基因的篩選及CLDN6通過Tyk-2/Stats通路影響MCF-7細胞的惡性表型[D]. 張婷.吉林大學 2012



本文編號：2905546