本文關(guān)鍵詞：免疫蛋白酶體β5i在原發(fā)性高血壓血管重構(gòu)中的作用及機(jī)制的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討免疫蛋白酶體β5i在血管緊張素II(angiotensin II,AngII)誘導(dǎo)的高血壓血管重構(gòu)過程中的作用及機(jī)制。方法:1.收集原發(fā)性高血壓患者血樣及正常對(duì)照患者血樣各20例。20S蛋白酶體檢測(cè)StressXpress#174;試劑盒測(cè)定兩組血樣中20S蛋白酶體(β5i)活性的水平。2.6-8周齡的C57BL/6雄性小鼠,血管緊張素II(AngII,1000ng/kg/min)灌注7天后應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)及蛋白質(zhì)印跡(Western Blot),檢測(cè)AngII灌注組及對(duì)照組小鼠血管組織中免疫蛋白酶體三個(gè)亞基β1i,β2i,β5i的mRNA、蛋白水平及β1i,2i,5i的活性。用免疫熒光共定位法檢測(cè)血管平滑肌細(xì)胞中是否表達(dá)β5i及AngII灌注組和對(duì)照組小鼠血管組織中β5i的表達(dá)情況。3.6-8周齡的C57BL/6雄性小鼠,隨機(jī)分為4組:對(duì)照組,AngII組,AngII+β5i抑制劑(PR-957,12mg/kg/d)組及單獨(dú)抑制劑組。AngII(AngII,1000ng/kg/min),灌注l4天。應(yīng)用鼠尾套管進(jìn)行無創(chuàng)血壓監(jiān)測(cè);應(yīng)用HE染色、Elastin染色、masson染色和dhe染色,檢測(cè)各組小鼠血管組織的炎癥、彈力纖維、纖維化及氧化應(yīng)激水平;血管環(huán)檢測(cè)血管舒張功能;qpcr檢測(cè)β5i的功能。結(jié)果:1.原發(fā)性高血壓患者血樣中免疫蛋白酶體β5i的活性高于血壓正常組。2.免疫熒光染色示血管平滑肌細(xì)胞中表達(dá)免疫蛋白酶體β5i。3.angii組β1i,β2i,β5i的蛋白水平及活性均高于對(duì)照組。angii組β2i的mrna水平低于對(duì)照組,而β1i,β5i高于對(duì)照組。4.c57bl/6小鼠基礎(chǔ)血壓在90-100mmhg。angii+抑制劑組angii灌注后至灌泵結(jié)束血壓均在120mmhg,angii組維持在150mmhg,提示免疫蛋白酶體β5i抑制劑pr-957可以降低angii誘導(dǎo)的高血壓。5.he病理學(xué)染色顯示,angii+β5i抑制劑組血管壁厚度及血管腔徑低于angii組,提示β5i抑制劑pr-957可以減輕angii誘導(dǎo)的高血壓引起的血管壁增厚及管腔增大。qpcr示β5i抑制劑可以抑制angii誘導(dǎo)的il-6,tnf-α,mcp-1等炎癥因子的表達(dá)上調(diào)。6.elastin病理學(xué)染色顯示,與對(duì)照組相比,angii灌注組可致彈力纖維變性、斷裂、彈性降低,而β5i抑制劑可明顯抑制angii的上述效應(yīng)。masson染色顯示angii組,平滑肌細(xì)胞肥大增生明顯,血管周圍膠原沉積多于其他各組。提示免疫蛋白酶體β5i抑制劑pr-957可以改善angii誘導(dǎo)高血壓引起的血管彈力纖維變性、斷裂,減輕血管纖維化。7.dhe染色顯示angii組與對(duì)照組相比,ros水平顯著升高。angii+抑制劑組的ros水平明顯低于模型組,單純抑制劑組與對(duì)照組無差異。提示β5i抑制劑pr-957可以減輕angii誘導(dǎo)高血壓引起的氧化應(yīng)激。8.利用血管灌流裝置對(duì)血管舒張功能進(jìn)行檢測(cè),在內(nèi)皮依賴性舒張藥乙酰膽堿(ach)作用下,對(duì)照組及單獨(dú)抑制劑組舒張可達(dá)75%,而模型組舒張約為50%,angii+加抑制劑組舒張可達(dá)65%;在于非內(nèi)皮依賴性舒張藥硝普鈉(snp)作用下,模型組舒張未達(dá)90%,而其他組可達(dá)90%以上。提示β5i抑制劑pr-957可以改善angii誘導(dǎo)高血壓引起的血管舒張功能下降。結(jié)論:1.原發(fā)性高血壓患者血樣中免疫蛋白酶體β5i的活性增高。2.免疫蛋白酶體β5i在血管組織中表達(dá)。3.AngII介導(dǎo)高血壓血管組織中免疫蛋白酶體β5i的在mRNA、蛋白水平及活性的表達(dá)均增高。4.免疫蛋白酶體β5i通過參與高血壓炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、內(nèi)皮損傷等,導(dǎo)致血管重構(gòu)。
【關(guān)鍵詞】：血管緊張素II 高血壓 血管重構(gòu) 免疫蛋白酶體β5i PR-957
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R544.1
【目錄】：

• 摘要6-9
• Abstract9-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-24
• 一、實(shí)驗(yàn)材料14-16
• 1. 實(shí)驗(yàn)對(duì)象14
• 2. 實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 3. 實(shí)驗(yàn)儀器15-16
• 二、實(shí)驗(yàn)方法16-24
• 結(jié)果24-31
• 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述40-52
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章52-53
• 致謝53-54

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 吳聰;陳國(guó)友;;免疫蛋白酶體在IFN-γ誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激中維持蛋白質(zhì)的穩(wěn)定[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2011年02期

2 楊艷艷;劉利民;李志強(qiáng);;免疫蛋白酶體亞單位LMP的研究進(jìn)展[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年07期

3 ;[J];;年期

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 記者 李山;科學(xué)家揭示免疫蛋白酶體的晶體結(jié)構(gòu)[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 張?jiān)讫?免疫蛋白酶體β5i在原發(fā)性高血壓血管重構(gòu)中的作用及機(jī)制的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

2 劉穎;免疫蛋白酶體酶切位點(diǎn)預(yù)測(cè)[D];華中科技大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：免疫蛋白酶體β5i在原發(fā)性高血壓血管重構(gòu)中的作用及機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：289201