【摘要】：目的:探討補(bǔ)腎益肝活血方對(duì)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎的療效,以及通過(guò)病理學(xué)切片、ELISA、免疫組化評(píng)估補(bǔ)腎益肝活血方對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的影響。方法:首先把54只標(biāo)準(zhǔn)SD實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)抽出9只分為空白組,剩下的45只均予以右后膝關(guān)節(jié)注射木瓜蛋白酶稀釋液造模,造模完成后隨機(jī)抽取造模組5只、空白組1只大鼠并處死,檢測(cè)并評(píng)估造模成功后,再次將造成的KOA模型大鼠隨機(jī)分為5組,分別設(shè)置為中藥(補(bǔ)腎益肝活血方)高劑量組、中劑量組、低劑量組、模型組、西藥雙醋瑞因組(陽(yáng)性對(duì)照組),每組8只。按照預(yù)先設(shè)計(jì)好的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行藥物干預(yù),藥物干預(yù)期間觀察并記錄各組實(shí)驗(yàn)大鼠造模關(guān)節(jié)的局部改變及大鼠行為的變化情況。給藥4周后,腹主動(dòng)脈取血并采取脫頸法處死各組實(shí)驗(yàn)大鼠,取材后進(jìn)行軟骨組織切片HE染色觀察、相關(guān)細(xì)胞因子檢測(cè)、軟骨組織免疫組化檢測(cè)等:①參照文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)軟骨組織表面進(jìn)行肉眼觀察及評(píng)分:實(shí)驗(yàn)大鼠經(jīng)處死后,切開(kāi)模型側(cè)(右后)膝關(guān)節(jié)腔,請(qǐng)三名專業(yè)人員遵循雙盲原則根據(jù)軟骨的變化進(jìn)行評(píng)分;②取軟骨組織切片并HE染色,光鏡下觀察軟骨組織的病理改變,按照Mankin's評(píng)分分別對(duì)其評(píng)分;③腹主動(dòng)脈取血后,分離出血清,ELISA法測(cè)定各組實(shí)驗(yàn)大鼠血清中IL-lβ、TNF-α的含量;④取造模關(guān)節(jié)軟骨組織作成切片,采取免疫組化法檢測(cè)其中MMP-3、EFEMP-1的表達(dá)情況。結(jié)果:①行造模術(shù)前、后及藥物干預(yù)后所造模膝關(guān)節(jié)局部的表現(xiàn)及變化：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前所有實(shí)驗(yàn)大鼠膝關(guān)節(jié)外形及活動(dòng)均正常,造模完成后除空白組外其余各組大鼠均表現(xiàn)為一定程度的造模關(guān)節(jié)活動(dòng)受限、大鼠跛行、局部紅腫等KOA表現(xiàn),行藥物干預(yù)結(jié)束后空白組大鼠膝關(guān)節(jié)較前變化不明顯,給藥治療的各組大鼠造模膝關(guān)節(jié)均有一定程度的KOA表現(xiàn),但均較模型組大鼠程度減輕。②通過(guò)肉眼觀察,對(duì)大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨評(píng)分結(jié)果:正常組的肉眼評(píng)分要低于模型組及各藥物干預(yù)組,差異(P＜0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組、中劑量組、低劑量組以及陽(yáng)性對(duì)照組肉眼評(píng)分相比于模型組均較低,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組、中劑量組以及陽(yáng)性對(duì)照組肉眼評(píng)分均較補(bǔ)腎益肝活血方低劑量組低,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組較陽(yáng)性對(duì)照組差異不明顯(P0.05),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③光鏡切片后各組Mankin's評(píng)分結(jié)果:藥物治療各組以及模型組Mankin's評(píng)分均高于正常組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組、中劑量組以及陽(yáng)性對(duì)照組Mankin's評(píng)分均低于模型組,差異(P＜0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組、中劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組Mankin's評(píng)分低于補(bǔ)腎益肝活血方低劑量組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組Mankin's評(píng)分較陽(yáng)性對(duì)照組差異不大(P0.05),無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④血清IL-1β、TNF-α指標(biāo)各組之間的比較:模型組、各藥物治療組血清中IL-lβ、TNF-α含量均高于正常組,差異(P＜0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組大鼠血清中IL-lβ、TNF-αα含量均較各藥物治療組高,差異(P＜0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組、中劑量組大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量較補(bǔ)腎益肝活血方低劑量組低,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;陽(yáng)性對(duì)照組大鼠血清中IL-lβ、TNF-α含量低于補(bǔ)腎益肝活血方中、高劑量組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑤免疫組化檢測(cè)軟骨組織中MMP-3、EFEMP-1的結(jié)果顯示:在各組中,MMP-3、EFEMP-1均有不同程度陽(yáng)性表達(dá);模型組及各藥物干預(yù)組MMP-3、EFEMP-1陽(yáng)性表達(dá)均高于空白組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;MMP-3的陽(yáng)性表達(dá)在補(bǔ)腎益肝活血方低、中、高劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組要低于模型組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;EFEMP-1的陽(yáng)性表達(dá)在補(bǔ)腎益肝活血方低、中、高劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組要高于模型組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血中、高劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組MMP-3陽(yáng)性表達(dá)低于補(bǔ)腎益肝活血方低劑量組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血中、高劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組EFEMP-1陽(yáng)性表達(dá)高于補(bǔ)腎益肝活血方低劑量組,差異(P0.05),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組中MMP-3、EFEMP-1陽(yáng)性表達(dá)差異(P0.05),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:① 運(yùn)用關(guān)節(jié)腔注射木瓜蛋白酶方法能成功誘導(dǎo)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型,穩(wěn)定性好。②各藥物治療組及模型組中模型側(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨中MMP-3、EFEMP-1的陽(yáng)性表達(dá)量均較正常組有變化,證明MMP-3、EFEMP-1與KOA的發(fā)生和發(fā)展有緊密關(guān)系。③補(bǔ)腎益肝活血方延緩軟骨的退變,從而在一定程度上延緩了大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎的病情,故補(bǔ)腎益肝活血方對(duì)KOA有明確的治療效果。④補(bǔ)腎益肝活血方延緩軟骨退變、有效緩解KOA病情的機(jī)制之一可能為分別下調(diào)和上調(diào)關(guān)節(jié)軟骨中MMP-3、EFEMP-1的表達(dá)。⑤將補(bǔ)腎益肝活血方高劑量組與西藥組(陽(yáng)性對(duì)照組)中大鼠活動(dòng)狀態(tài)及軟骨病理學(xué)切片觀察結(jié)果相比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);在降低炎癥因子方面,陽(yáng)性對(duì)照組較補(bǔ)腎益肝活血方高、中劑量組顯效稍占優(yōu),故得出高劑量補(bǔ)腎益肝活血方能有效治療KOA,與雙醋瑞因效果相當(dāng)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊進(jìn);李燕林;鄧波;;護(hù)腎活血方治療原發(fā)性腎病綜合征臨床觀察[J];中華中醫(yī)藥學(xué)刊;2007年02期

2 余炅;;通絡(luò)活血方治療帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛的臨床研究[J];實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床;2009年06期

3 徐纓;史奎鈞;張亞琴;;滋陰活血方治療糖尿病視網(wǎng)膜病變31例[J];浙江中醫(yī)雜志;2013年03期

4 聶晶;活血方源流簡(jiǎn)論[J];江西中醫(yī)藥;2003年02期

5 王景成;王澤興;;壯骨活血方預(yù)防骨質(zhì)疏松性股骨頸骨折患者股骨頭壞死的療效觀察[J];中國(guó)藥房;2010年15期

6 張玉璞;徐麗;;滋陰活血方預(yù)處理對(duì)大鼠缺血再灌注心肌保護(hù)作用研究[J];環(huán)球中醫(yī)藥;2009年01期

7 單一君;;活血方治療70例銀屑病的臨床觀察及其機(jī)理研究[J];中西醫(yī)結(jié)合雜志;1988年10期

8 李英桂;活血方藥一得錄[J];實(shí)用醫(yī)技;2000年07期

9 翟理黃;益元活血方治療老年心力衰竭臨床研究[J];河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年06期

10 孫建飛;雷霆;肖剛;周軍;張泳;魏海梁;陳志國(guó);;通腑活血方對(duì)腹部手術(shù)后腸粘連預(yù)防作用的臨床研究[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2010年17期

相關(guān)會(huì)議論文 前7條

1 陳德甫;;苦寒活血方藥治療內(nèi)異癥的臨床觀察及對(duì)卵巢功能的影響[A];全國(guó)第六屆中西醫(yī)結(jié)合婦產(chǎn)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文及摘要集[C];2002年

2 趙文霞;閆樂(lè);;化痰祛濕活血方干預(yù)非酒精性脂肪性肝炎模型脂聯(lián)素與病理變化的研究[A];第二十五屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

3 暴美靜;劉如秀;李匯搏;王妮娜;汪艷麗;;益陽(yáng)活血方對(duì)損傷兔竇房結(jié)組織保護(hù)的形態(tài)學(xué)研究[A];2011年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心病分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨北京中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心血管病專業(yè)委員會(huì)年會(huì)論文集[C];2011年

4 黃熙;韓啟德;;血瘀證和活血方劑:研究方劑藥理的較好工具[A];第五次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合血瘀證及活血化瘀研究學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2001年

5 劉如秀;暴美靜;李匯搏;王妮娜;;益陽(yáng)活血方對(duì)損傷兔竇房結(jié)組織HCN4蛋白表達(dá)的影響[A];2011年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心病分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨北京中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心血管病專業(yè)委員會(huì)年會(huì)論文集[C];2011年

6 屠文震;陳冬冬;;參芪活血方治療硬皮病皮膚硬化療效觀察[A];2013全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2013年

7 李均;許韶山;;溫陽(yáng)活血方對(duì)體外大鼠腎成纖維細(xì)胞外基質(zhì)FN、LN表達(dá)的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)內(nèi)科分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 周晟芳;名老中醫(yī)劉志明滋腎活血方對(duì)大鼠缺血心肌蛋白質(zhì)組學(xué)及分子機(jī)理研究[D];中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院;2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 尚乘;扶正泄?jié)峄钛綄?duì)慢性腎衰竭患者生存質(zhì)量影響的臨床觀察[D];陜西中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 張瓊方;化痰祛濕活血方干預(yù)非酒精性脂肪性肝炎大鼠ADPN/AKT/NF-kb通路的研究[D];河南中醫(yī)學(xué)院;2015年

3 周玉婷;降濁活血方治療痰瘀互結(jié)型高脂血癥的臨床研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2016年

4 楊冰;益氣通陽(yáng)活血方治療糖尿病下肢血管病變的臨床觀察[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 林雪虹;參芪桂附活血方治療心腎陽(yáng)虛型病態(tài)竇房結(jié)綜合征的臨床研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 陸洋;補(bǔ)腎益肝活血方對(duì)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎的療效探討及對(duì)關(guān)節(jié)軟骨影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2017年

7 張霞;滋腎活血方治療伴2型糖尿病牙周炎（腎虛血瘀型）臨床研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2010年

8 梁輝;行水活血方治療小兒原發(fā)性腎病綜合征的實(shí)驗(yàn)研究和臨床效應(yīng)[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2000年

9 章麗;溫通活血方對(duì)糖尿病下肢血管病變踝肱指數(shù)的影響[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2013年

10 孫琦;活血方與活血加味方對(duì)小鼠月經(jīng)模型干預(yù)作用及與阿魏酸煎出量的相關(guān)性實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：2277015