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曲美他嗪對急性胰腺炎大鼠HIF-1α-iNOS-NO信號通路及HIF-1α-VEGF信號通路的作用

發(fā)布時間:2018-10-13 16:17
【摘要】:目的:研究曲美他嗪對曲美他嗪對急性胰腺炎大鼠HIF-1α-i NOS-NO信號通路及HIF-1α-VEGF信號通路的作用。方法:清潔級健康雄性SD大鼠54只(體重240g-260g),適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為三組:對照組(A組,n=18只);AP模型組(B組,n=18只);曲美他嗪干預(yù)組(C組,n=18只)。對照組大鼠開腹后僅翻動腸管;采用膽胰管逆行注射4%;悄懰徕c溶液(1ml/kg,0.2 m L/min)建AP模型;于AP制模蘇醒后予曲美他嗪(5mg/kg,溶于生理鹽水)灌胃,建立曲美他嗪干預(yù)組。每組于制模后按6h、12h、24h分成3個亞組,于上述時間點(diǎn)處死大鼠取靜脈血、胰腺組織,每時點(diǎn)取大鼠6只。以酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測血清中IL-6的濃度;比色法測定血清中淀粉酶及NO濃度;免疫組化法檢測胰腺組織中VEGF和i NOS含量;Western blot法檢測胰腺組織中HIF-1α含量;取胰腺組織,10%甲醛固定,制成石蠟切片,用于HE染色,光鏡下觀察胰腺病理損傷情況。結(jié)果:1血清淀粉酶水平:對照組各時間點(diǎn)血清淀粉酶升高不明顯;模型組大鼠血清淀粉酶自制模后逐漸升高;曲美他嗪干預(yù)組大鼠血清淀粉酶在6h、12h、24h呈逐漸下降趨勢。與對照組相比較,模型組各時間點(diǎn)大鼠血清淀粉酶水平均顯著升高(P0.05)。與模型組比較,曲美他嗪干預(yù)組各時間點(diǎn)大鼠血清淀粉酶水平顯著降低(P0.05)。2血清IL-6水平:對照組大鼠血清IL-6各時間點(diǎn)無顯著差異。模型組各時間點(diǎn)血清IL-6水平較對照組均有明顯升高(P0.05);曲美他嗪治療組與模型組相比,各時間點(diǎn)血清IL-6水平有所降低(P0.05);模型組各時間點(diǎn)血清IL-6水平呈逐漸上升趨勢(P0.05);曲美他嗪治療組各時間點(diǎn)血清IL-6水平呈逐漸下降趨勢(P0.05)。3血清NO水平:對照組大鼠血清NO各時間點(diǎn)無顯著差異。模型組各時間點(diǎn)血清NO水平較對照組均有明顯升高(P0.05);曲美他嗪治療組與模型組相比,各時間點(diǎn)血清NO水平有所降低(P0.05);模型組各時間點(diǎn)血清NO水平呈逐漸上升趨勢(P0.05);曲美他嗪治療組各時間點(diǎn)血清NO水平呈逐漸下降趨勢(P0.05)。4 HIF-1α的表達(dá)水平:對照組大鼠胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平各時間點(diǎn)無顯著差異。模型組各時間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平較對照組均有明顯升高(P0.05);曲美他嗪治療組與模型組相比,各時間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平有所降低(P0.05);模型組各時間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平呈逐漸上升趨勢(P0.05);曲美他嗪治療組各時間點(diǎn)胰腺組織HIF-1α表達(dá)水平呈逐漸下降趨勢(P0.05)。5大鼠胰腺大體標(biāo)本觀察:對照組:肉眼觀胰腺無明顯水腫、壞死或出血表現(xiàn),腹腔無積液。光鏡下胰腺小葉界限明確,腺泡結(jié)構(gòu)完整,間質(zhì)未見水腫,有少量炎癥細(xì)胞浸潤,且各時間點(diǎn)無明顯差別。模型組:肉眼觀可見胰腺組織水腫,少量胰腺腺葉壞死,腹腔可見少量血性積液。胰腺壞死面積隨著制模時間延長逐漸擴(kuò)大,出血灶、鈣化斑及血性腹腔積液量隨時間延長增加。6h組光鏡下可見少量炎癥細(xì)胞浸潤,間質(zhì)少量出血,部分胰腺腺泡細(xì)胞壞死;12h組光鏡下可見炎癥細(xì)胞浸潤,間質(zhì)出血,腺泡細(xì)胞壞死較前加重;24h組光鏡下可見大量炎癥細(xì)胞浸潤,間質(zhì)出血增多,胰腺腺泡細(xì)胞壞死,胰腺小葉結(jié)構(gòu)破壞,大片胰腺實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死。曲美他嗪干預(yù)組:肉眼觀可見胰腺組織充血水腫,無明顯出血、壞死表現(xiàn),腹腔無積液。光鏡下胰腺間質(zhì)明顯水腫,少量炎癥細(xì)胞浸潤及極少量腺泡細(xì)胞壞死,且各時間點(diǎn)無明顯差別。6大鼠胰腺組織病理學(xué)評分結(jié)果:按照Schmidt’s方法進(jìn)行評分,對照組各時間點(diǎn)大鼠胰腺病理損傷評分變化不明顯;模型組各時間點(diǎn)胰腺組織病理學(xué)損傷評分高于對照組及曲美他嗪組各相應(yīng)時間點(diǎn),差異有顯著性(P0.05);曲美他嗪干預(yù)組各時間點(diǎn)大鼠胰腺組織病理學(xué)損傷評分高于對照組各時間點(diǎn),差異有顯著性(P0.05)。7免疫組化檢測顯示:對照組各時間點(diǎn)大鼠胰腺組織VEGF和i NOS均少量表達(dá),評分變化不明顯;模型組各時間點(diǎn)胰腺組織VEGF和i NOS免疫組化評分均高于對照組及曲美他嗪組各相應(yīng)時間點(diǎn),差異有顯著性(P0.05);曲美他嗪干預(yù)組各時間點(diǎn)大鼠胰腺組織VEGF和i NOS免疫組化評分低于對照組各時間點(diǎn),差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論:1急性胰腺炎時HIF-1α、i NOS、NO、VEGF表達(dá)增多在胰腺損傷中有著重要的作用。2本研究結(jié)果提示:曲美他嗪對大鼠急性胰腺炎有保護(hù)作用,其機(jī)制是:通過抑制HIF-1α-i NOS-NO信號通路及HIF-1α-VEGF信號通路從而控制急性胰腺炎炎癥反應(yīng)及微循環(huán)障礙。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R576

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2269225

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