本文關(guān)鍵詞：銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞干預(yù)作用及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《山東中醫(yī)藥大學(xué)》 2015年

銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞干預(yù)作用及機(jī)制研究

陳潤賡  

【摘要】：目的:目前肺間質(zhì)纖維化是一種難治性呼吸系統(tǒng)疾病,尚無理想的治療藥物,臨床上銀杏葉提取物在治療特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化方面有一定療效。通過觀察銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞增殖、凋亡,以及對細(xì)胞外基質(zhì)、炎癥因子的影響,探討其作用機(jī)理。方法:實(shí)驗(yàn)以人胚肺成纖維細(xì)胞為研究對象,設(shè)空白對照組、模型組、銀杏葉提取物低、中、高濃度組,對照組加入人胚肺成纖維細(xì)胞,模型組在培養(yǎng)人胚肺成纖維細(xì)胞時(shí)加入TGF-β1,實(shí)驗(yàn)組在模型組的基礎(chǔ)上加入不同濃度的銀杏葉提取物,其藥物濃度分別為5ul/m L、10ul/m L、20ul/m L。各組細(xì)胞均置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。1.銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞的增殖和凋亡的影響,用于MTT實(shí)驗(yàn)的各組人胚肺成纖維細(xì)胞經(jīng)相關(guān)處理后,在波長490 nm處測定吸光度(OD)值,用于流式檢測細(xì)胞凋亡的細(xì)胞,在藥物作用24h后,測量人胚肺成纖維細(xì)胞的凋亡率,以上數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,P0.05為差異有顯著性。2.銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞外基質(zhì)的影響,應(yīng)用ELISA實(shí)驗(yàn)檢測各組人胚肺成纖維細(xì)胞的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA的蛋白含量,應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測各組人胚肺成纖維細(xì)胞的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA的m RNA的含量,以上數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,P0.05為差異有顯著性。3.銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞抗氧化作用的影響,應(yīng)用ELISA實(shí)驗(yàn)和RT-PCR技術(shù)檢測各組人胚肺成纖維細(xì)胞的ECSOD蛋白及m RNA的含量。4.銀杏葉提取物對人胚肺成纖維細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的影響,測量PDGF蛋白及m RNA的含量,以上數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,P0.05為差異有顯著性。結(jié)果:1.銀杏葉提取物明顯抑制人胚肺成纖維細(xì)胞的增殖,并促進(jìn)其凋亡。MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組與模型組比較,細(xì)胞增殖OD值明顯降低(P0.05),且隨銀杏葉提取物濃度的增加,細(xì)胞增殖OD值顯著降低。流式檢測細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示銀杏葉提取物促進(jìn)人胚肺成纖維細(xì)胞的凋亡。2.銀杏葉提取物抑制人胚肺成纖維細(xì)胞外基質(zhì)的合成,與模型組比較,Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA蛋白及m RNA等物質(zhì)的含量明顯降低(P0.05)。3.銀杏葉提取物能提高細(xì)胞抗氧化能力。ELISA實(shí)驗(yàn)及RT-PCR檢測結(jié)果顯示:與模型組比較,實(shí)驗(yàn)組人胚肺成纖維細(xì)胞的ECSOD蛋白及m RNA的含量明顯增加(P0.05)。4.銀杏葉提取物降低人胚肺成纖維細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的分泌,ELISA實(shí)驗(yàn)及RT-PCR檢測結(jié)果顯示:與模型組比較,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的PDGF蛋白及m RNA的含量顯著降低(P0.05)。結(jié)論:銀杏葉提取物能有效地抑制TGF-β1誘導(dǎo)的人胚肺成纖維細(xì)胞的增殖,促進(jìn)人胚肺成纖維細(xì)胞的凋亡,提高人胚肺成纖維細(xì)胞的抗氧化能力,并減少細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的合成量。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：山東中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R285
【目錄】：

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