本文選題：Dectin-1-DC + IL-33　； 參考：《吉林大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:惡性腫瘤是威脅人類(lèi)生命和健康的主要疾病之一,亟待開(kāi)發(fā)有別于傳統(tǒng)治療的腫瘤治療新策略。樹(shù)突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DCs)疫苗免疫治療是一種很有前景的腫瘤治療方法。DCs是最有效的抗原提呈細(xì)胞(antigen-presenting cells,APCs),在誘導(dǎo)機(jī)體抗腫瘤免疫過(guò)程中起到重要作用。DCs通過(guò)體內(nèi)誘導(dǎo)效應(yīng)T細(xì)胞而發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。我們以及其他研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)分泌IL-9的Th9細(xì)胞在小鼠體內(nèi)具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性,因而開(kāi)發(fā)體內(nèi)能夠特異性誘導(dǎo)和擴(kuò)增Th9細(xì)胞的DC疫苗必將強(qiáng)有力地增強(qiáng)DC疫苗的抗腫瘤效果。我們最近的研究結(jié)果顯示Dectin-1信號(hào)活化的DCs(Dectin-1-DCs)體內(nèi)體外能夠強(qiáng)有力促進(jìn)Th9細(xì)胞生成,其機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。我們發(fā)現(xiàn)Dectin-1-DCs表達(dá)大量的IL-33,然而我們對(duì)IL-33在Dectin-1-DCs誘導(dǎo)Th9和抗腫瘤免疫反應(yīng)中的作用還不清楚。IL-33是一種多功能細(xì)胞因子。以往的研究證實(shí),IL-33促進(jìn)CD8+T、ILC2、Th2和Th1細(xì)胞反應(yīng)等對(duì)于抗腫瘤免疫有利一面,IL-33也能促進(jìn)Treg的產(chǎn)生等對(duì)于抗腫瘤免疫不利一面。因此,在本項(xiàng)研究中,我們將深入探討IL-33在Dectin-1-DCs體內(nèi)誘導(dǎo)Th9及抗腫瘤免疫中的作用及其內(nèi)在機(jī)制。方法:首先,我們用基因表達(dá)譜(Gene expression profile,GEP)分析Dectin-1-DCs中上調(diào)的基因,找到上調(diào)幅度顯著的IL-33。為了驗(yàn)證dectin-1信號(hào)促進(jìn)DCs表達(dá)大量IL-33,我們用C57BL/6骨髓來(lái)源的DCs體外生成BMDCs及兩種Dectin-1-DCs:CurDCs和SclDCs,通過(guò)QPCR、ELISA和FCM檢測(cè)其表達(dá)的IL-33 mRNA和蛋白水平,并用同樣的方法在dectin-1-/-小鼠骨髓來(lái)源的DCs中進(jìn)行驗(yàn)證,檢測(cè)敲除基因dectin-1后IL-33 mRNA和蛋白水平是否下降。其次,為研究Dectin-1-DCs體內(nèi)誘導(dǎo)的主要抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞是否為T(mén)h9細(xì)胞,我們以O(shè)T2小鼠為模型,對(duì)其進(jìn)行DCs免疫,并通過(guò)FCM,ELISA及QPCR方法檢測(cè)OT2小鼠脾臟中CD4+T細(xì)胞是否表達(dá)Th9、Th1和Th17細(xì)胞的相關(guān)細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子。接下來(lái),為研究Dectin-1-DCs如何誘導(dǎo)Th9細(xì)胞,我們分別以O(shè)T2小鼠和C57BL/6小鼠為模型,對(duì)其進(jìn)行DCs免疫,FCM及QPCR方法檢測(cè)Dectin-1-DCs體內(nèi)誘導(dǎo)的CD4+T細(xì)胞表達(dá)IL-33受體ST2的情況。為進(jìn)一步驗(yàn)證Dectin1-DCs通過(guò)ST2促進(jìn)Th9細(xì)胞分化,加入ST2的封閉抗體,檢測(cè)封閉ST2能否影響Dectin-1-DCs對(duì)Th9細(xì)胞生成的促進(jìn)作用。由于Dectin-1-DCs分泌到胞外的IL-33濃度很低,為了研究IL-33對(duì)Dectin-1-DCs體內(nèi)誘導(dǎo)Th9的促進(jìn)作用,我們以O(shè)T2小鼠為模型,對(duì)其進(jìn)行DCs免疫的同時(shí)加入外源IL-33,通過(guò)FCM,ELISA及QPCR方法檢測(cè)ST2及Th細(xì)胞特征性細(xì)胞因子的mRNA和蛋白水平。然后,我們以O(shè)T-2小鼠B16-OVA黑色素瘤為模型,對(duì)其進(jìn)行DCs疫苗免疫治療,以研究IL-33是否對(duì)Dectin-1-DCs體內(nèi)的抗腫瘤免疫起到促進(jìn)作用。最后,作為對(duì)照我們也研究了IL-33聯(lián)合BMDCs體內(nèi)是否有助于誘導(dǎo)Th9及抗腫瘤免疫反應(yīng)。結(jié)果:Dectin-1信號(hào)促進(jìn)DCs表達(dá)IL-33。Dectin-1-DCs體內(nèi)能夠誘導(dǎo)大量的Th9細(xì)胞及一定量的Th1細(xì)胞,其中具有抗腫瘤效應(yīng)的Th9細(xì)胞占主導(dǎo)地位。Dectin1-DCs體內(nèi)促進(jìn)CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生ST2,封閉ST2顯著抑制了Dectin1-DCs對(duì)Th9細(xì)胞的誘導(dǎo)。加入外源IL-33顯著促進(jìn)了Dectin-1-DCs體內(nèi)誘導(dǎo)Th9的生成,而對(duì)BMDCs體內(nèi)誘導(dǎo)Th9及其抗腫瘤效應(yīng)沒(méi)有作用。加入外源IL-33顯著提高Dectin-1-DCs的抗腫瘤效應(yīng)。但外源IL-33促進(jìn)BMDCs體內(nèi)誘導(dǎo)Treg細(xì)胞,抑制BMDCs誘導(dǎo)的CD4+T細(xì)胞表達(dá)T細(xì)胞生長(zhǎng)因子IL-2,促進(jìn)T細(xì)胞表達(dá)PD-1免疫抑制分子,從而抑制BMDCs的抗腫瘤效應(yīng)。結(jié)論:IL-33促進(jìn)Dectin-1-DCs在體內(nèi)誘導(dǎo)Th9細(xì)胞并進(jìn)一步增強(qiáng)Dectin-1-DCs在體內(nèi)的抗腫瘤免疫效應(yīng)。
[Abstract]:Objective : To study the effect of IL - 33 on anti - tumor immune responses induced by Dectin - 1 - DCs . The results showed that IL - 33 stimulated CD8 + T , ILC2 , Th2 and Th1 cell responses . We also studied whether IL - 33 could induce Th9 and anti - tumor immune responses in Dectin - 1 - DCs . Conclusion : IL - 33 promotes the expression of Th9 cells in the body of Dectin - 1 - DCs .
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R730.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Terence Moyana;Jicheng Yang;Jim Xiang;;Type 1 CD8~+ T Cells are Superior to Type 2 CD8~+ T Cells in Tumor Immunotherapy due to Their Efficient Cytotoxicity,Prolonged Survival and Type 1 Immune Modulation[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年04期

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本文編號(hào)：2102094