本文選題：肺癌 + 連環(huán)蛋白p120ctn�。� 參考：《廣州中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:課題組前期的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),金福安湯不僅下調(diào)Lewis小鼠肺癌組織p120ctn的異位表達(dá),還降低A549細(xì)胞p120ctn磷酸化程度,而p120ctn又是Kaiso重要的和肺癌轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的結(jié)合蛋白,推測(cè)金福安湯可能是通過調(diào)控p120ctn及其轉(zhuǎn)錄因子Kaiso的表達(dá)而干預(yù)肺癌轉(zhuǎn)移的。本研究擬通過體外實(shí)驗(yàn)觀察金福安湯對(duì)肺癌各種細(xì)胞系的增殖、遷移和侵襲能力的影響,探究p120ctn各亞型、其相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Kaiso和p120ctn絲氨酸288位點(diǎn)的磷酸化的表達(dá),以探究金福安湯是通過連環(huán)蛋白p120ctn的哪些亞型發(fā)揮作用,和其如何調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子Kaiso發(fā)揮抗腫瘤轉(zhuǎn)移的作用,以及其如何通過影響p120ctn絲氨酸288位點(diǎn)的磷酸化狀態(tài)來干預(yù)肺癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制,為揭示中藥復(fù)方干預(yù)肺癌轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究提供了理論支持和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將人肺腺癌細(xì)胞株H1299、H1650和A549細(xì)胞以及人肺鱗癌細(xì)胞株H520進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)傳代。運(yùn)用CCK8法觀察金福安湯對(duì)不同類型肺癌細(xì)胞增殖能力的抑制作用。通過體外基質(zhì)膠遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)(transwell)檢測(cè)金福安湯對(duì)各種類型肺癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。運(yùn)用免疫熒光、Western-Blot方法探討金福安湯對(duì)不同肺癌細(xì)胞中 p120ctn、p120ctn 亞型 1A(p120ctn1A)、p120ctn 亞型 3A(p120ctn3A)和相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Kaiso的表達(dá)以及p120ctn絲氨酸288位點(diǎn)的磷酸化的影響。結(jié)果:1.金福安湯對(duì)人肺腺癌細(xì)胞株H1299、H1650和A549細(xì)胞以及人肺鱗癌細(xì)胞株H520有增殖抑制作用,且不僅具有一定的時(shí)間依賴性還具有一定的濃度依賴性(p0.05),順鉑組也能顯著抑制各肺癌細(xì)胞的增殖能力,其和空白對(duì)照組相比均具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。2.體外基質(zhì)膠遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)中,中藥金福安湯低、中、高劑量組可發(fā)現(xiàn)不同類型肺癌細(xì)胞株中遷移和穿透小室底部的細(xì)胞數(shù)目均在下降,且遷移和侵襲能力的抑制作用隨著濃度的增加逐漸增強(qiáng)(p0.05),順鉑也可抑制肺癌細(xì)胞遷移和侵襲,與空白對(duì)照組比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3.免疫熒光結(jié)果發(fā)現(xiàn),空白對(duì)照組中的人肺鱗癌細(xì)胞H520和人肺腺癌細(xì)胞H1650中的連環(huán)蛋白p120ctn在細(xì)胞漿和細(xì)胞膜上均呈現(xiàn)明亮的綠色熒光,呈現(xiàn)強(qiáng)表達(dá),而在細(xì)胞核的綠色熒光較弱,而肺腺癌H1299細(xì)胞中空白對(duì)照組中的p120ctn蛋白表達(dá)主要定位于胞漿和胞核,細(xì)胞膜幾乎不表達(dá),并且胞漿和胞核的熒光強(qiáng)度較弱。我們還觀察到在空白對(duì)照組中肺腺癌H1299、H650細(xì)胞及鱗癌細(xì)胞H520中Kaiso的表達(dá),發(fā)現(xiàn)H1299中Kaiso主要表達(dá)于細(xì)胞核內(nèi),弱表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),卻還發(fā)現(xiàn)Kaiso在H520和H1650中的表達(dá)很弱,而且主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)。但中藥組處理后的肺癌不同類型細(xì)胞系H1299和H520中連環(huán)蛋白p120ctn和Kaiso的表達(dá)較空白對(duì)照組明減少,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),而在H1650中連環(huán)蛋白p120ctn的表達(dá)下調(diào),但Kaiso的表達(dá)水平是增加的。4.Western-Blot結(jié)果發(fā)現(xiàn)金福安湯可下調(diào)肺癌細(xì)胞系H1299、A549、H1650和H520中的連環(huán)蛋白p120ctn和其p120ctn亞型1A(p120ctn1A)的表達(dá),減弱其相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Kaiso的表達(dá),而處理后的H1650細(xì)胞中Kaiso的表達(dá)水平卻增高。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)金福安湯可減弱連環(huán)蛋白p120ctn絲氨酸288位點(diǎn)的磷酸化的程度。結(jié)論:1.在體外實(shí)驗(yàn)研究中,我們發(fā)現(xiàn)金福安湯可顯著抑制人肺腺癌細(xì)胞株H1299、H1650和A549細(xì)胞以及人肺鱗癌細(xì)胞株H520的生長和增殖能力,具有一定的時(shí)間依賴性和濃度依賴性,還發(fā)現(xiàn)金福安湯可顯著抑制肺癌細(xì)胞遷移和侵襲能力。2.金福安湯可能通過介導(dǎo)與肺癌侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的連環(huán)蛋白p120ctn及p120ctn1A的表達(dá)來調(diào)控其相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Kaiso的表達(dá)水平來降低肺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力從而干預(yù)肺癌的轉(zhuǎn)移。3.我們還發(fā)現(xiàn)金福安湯也可能通過減弱連環(huán)蛋白p120ctn絲氨酸288位點(diǎn)的磷酸化的程度從而抑制肺癌的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of Jin Fu ' an Decoction on the proliferation , migration and invasion of lung cancer cell line H520 by regulating the expression of p120ctn , p120ctn subtype 1A ( p120ctn1A ) , p120ctn subtype 3A ( p120ctn3A ) and human lung squamous cell carcinoma cell line H520 . The expression level of p120ctn , p120ctn and p120ctn1A of human lung cancer cell line H520 was regulated by Western - Blot .
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R734.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳鐘;潘夏薇;鄭曉丹;;P120~(ctn)/E-cad在口腔鱗癌細(xì)胞遷移和侵襲中的功能[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;2016年11期

2 孫哲;曹洋;;p120ctn與肺癌浸潤、轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究進(jìn)展[J];診斷病理學(xué)雜志;2016年09期

3 劉洋;苗原;韓強(qiáng);王恩華;;p120-catenin通過Kaiso在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控肺癌細(xì)胞系LTEP-a-2中β-catenin的表達(dá)[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2016年12期

4 田玲;毛熙光;;P120ctn及Rho GTP酶在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中的研究進(jìn)展[J];中國醫(yī)藥指南;2015年07期

5 魏敏;毛qU光;;P120-連環(huán)蛋白在腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中的研究進(jìn)展[J];海南醫(yī)學(xué);2015年03期

6 桂德春;李小冬;江平;胡f庠;;P120ctn/E-cadherin與腫瘤關(guān)系的研究[J];吉林醫(yī)學(xué);2014年30期

7 娜仁;饒翔;李乾;盧玉娟;;乳腺癌組織中P120ctn蛋白表達(dá)和基因擴(kuò)增的研究[J];中國婦幼保健;2014年22期

8 梁凱;盧德祥;;膀胱移行細(xì)胞癌中Kaiso與p120ctn交互作用機(jī)制研究[J];黑龍江醫(yī)學(xué);2014年07期

9 李莉;謝成耀;王妍;王恩華;;p120ctn、Kaiso及MTA2基因在胸腺瘤中的表達(dá)及臨床病理意義[J];診斷病理學(xué)雜志;2013年06期

10 于涓瀚;苗原;劉洋;張勇;徐洪濤;王恩華;;P120連環(huán)蛋白亞型1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及與E-cadherin表達(dá)的關(guān)系[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 戴順東;p120ctn對(duì)Kaiso的調(diào)控及兩者在肺癌中作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 張朋新;P120連環(huán)蛋白亞型三的磷酸化增強(qiáng)攜帶Kaiso出核促進(jìn)肺癌細(xì)胞的侵襲[D];中國醫(yī)科大學(xué);2010年

，

本文編號(hào)：2047316