本文選題：礞石滾痰湯 + 癲癇　； 參考：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：第一部分:礞石滾痰湯對(duì)癲癇小鼠腦電圖及NMDAR1與GABA-AR表達(dá)的影響目的:建立戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)慢性點(diǎn)燃模型,觀察礞石滾痰湯對(duì)小鼠行為學(xué)、腦電圖、海馬NMDAR1與GABA-AR表達(dá)的影響。方法:將PTZ點(diǎn)燃成功的癲癇模型小鼠隨機(jī)分為四組:模型組:B組;礞石滾痰湯低劑量組:C組;礞石滾痰湯高劑量組:D組;丙戊酸鈉組:E組。每組各10只,另設(shè)空白對(duì)照組:A組10只。B組給予生理鹽水灌胃,C、D、E組分別給予礞石滾痰湯低、高劑量及丙戊酸鈉等不同藥物灌胃處理。給藥4周后,除空白對(duì)照組外,各組小鼠再次腹腔注射PIZ 45mg/(kg·d),觀察動(dòng)物行為的改變,利用腦立體定位儀記錄各組癲癇小鼠右側(cè)額葉皮質(zhì)的腦電變化。取小鼠海馬組織,通過氨基酸試劑盒和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法測定谷氨酸(glutamate,Glu)和 γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid，GABA)的含量,蛋白免疫印跡(westernblot)法檢測NMDAR1及GABA-AR的表達(dá)水平。結(jié)果:1.行為學(xué)表現(xiàn)與B組比較,D、E組小鼠癲癇發(fā)作的潛伏期明顯延長(P0.05),lh強(qiáng)直-陣攣發(fā)作的次數(shù)減少(P0.05),發(fā)作持續(xù)時(shí)間縮短(P0.05)。D組與E組相比較,無明顯差異(P0.05),A組均無癲癇發(fā)作。2.EEG表現(xiàn)A組腦電圖均表現(xiàn)為以α波和β波為主的基礎(chǔ)腦電波,波幅平穩(wěn),無明顯節(jié)律性。B組可以觀察到明顯的陣發(fā)性癇性放電,波幅振幅大,主要表現(xiàn)為尖銳波峰和短暫突發(fā)的尖波、棘波、棘慢復(fù)合波等。與B組相比,C、D組平均波幅明顯減少(P0.05),且D組于15min后才出現(xiàn)第一個(gè)明顯波幅。E組經(jīng)治療后偶有癲癇波出現(xiàn),波幅均在lmV之內(nèi)。3.氨基酸檢測與western blot結(jié)果Glu含量變化:與A組比較,B組海馬Glu升高顯著(P0.05),與B組比較,C、D、E組降低明顯(P0.05),D組含量降低與E組無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。GABA含量變化:GABA含量以D組升高最顯著,與B、C、E組比較有顯著性差異(P0.05),D組含量升高與E組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。通過western blot檢測NMDAR1及GAB A-AR表達(dá),發(fā)現(xiàn)B組NMDAR1較A組明顯增高,GABA-AR較A組明顯降低(P0.01),C、D、E組NMDAR1較B組明顯降低(P0.05),C、D、E組GABA-AR較B組明顯增高(P0.05),D組與E組間無明顯差異(P0.05)。結(jié)論:1.礞石滾痰湯可以延長小鼠癲癇發(fā)作潛伏期,緩解lh強(qiáng)直-陣攣發(fā)作次數(shù),縮短發(fā)作持續(xù)時(shí)間,減輕發(fā)作等級(jí),抑制癲癇樣放電波幅、減少放電頻率;2.礞石滾痰湯可以降低海馬區(qū)Glu含量,抑制NMDAR1的表達(dá),升高GABA含量,促進(jìn)GABA-AR的表達(dá),糾正興奮性和抑制性氨基酸遞質(zhì)的失衡。第二部分:礞石滾痰湯對(duì)癲癇小鼠海馬內(nèi)GFAP表達(dá)的影響目的:建立PIZ慢性點(diǎn)燃模型,觀察礞石滾痰湯對(duì)小鼠海馬內(nèi)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達(dá)的影響。方法:造模及分組同第一部分。取小鼠海馬組織后,多聚甲醛過夜,固定后取出,于冰凍切片機(jī)上制作冰凍切片,進(jìn)行GFAP免疫組化染色,觀察海馬CA1、CA3區(qū)GFAP形態(tài)與數(shù)量,再用實(shí)時(shí)熒光定量(Q-PCR)法檢測GFAPmRNA的表達(dá)水平。結(jié)果:與A組相比,B組GEAP免疫陽性反應(yīng)明顯增強(qiáng),海馬區(qū)數(shù)目明顯增多,GFAP mRNA表達(dá)增強(qiáng),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與B組相比,C、D、E組GFAP免疫陽性反應(yīng)較弱,數(shù)量少于模型組,GFAPmRNA表達(dá)顯著下調(diào)(P0.05),且中藥低劑量組效果優(yōu)于高劑量組,但與陽性對(duì)照組比較無明顯差異(P0.05)。結(jié)論礞石滾痰湯可以減少與抑制PTZ點(diǎn)燃小鼠海馬內(nèi)GFAP的數(shù)量與過度表達(dá),這可能是礞石滾痰湯發(fā)揮抗癲癇作用的機(jī)制之一。
[Abstract]:In the first part , rats were randomly divided into four groups : group B , group B , group C , group D , group E . Compared with group A , the content of GABA in group B was significantly higher than that in group B ( P0.05 ) . The content of GABA in group B was significantly lower than that in group B ( P0.05 ) . Results : Compared with group A , the expression level of GFAP in hippocampus CA1 , CA was significantly lower than that in group A , and the expression of GFAP mRNA was significantly lower than that in group B ( P0.05 ) . Conclusion : Compared with group A , the number of GFAP in hippocampus CA1 and CA was significantly lower than that in group A .
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5

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本文編號(hào)：1952752