發(fā)布時間：2018-05-18 03:13

  本文選題：絞股藍總皂苷 + 視神經(jīng)炎�。� 參考：《廣西醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的誘導C57BL/6小鼠建立實驗性自身免疫性腦脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)動物模型,應用絞股藍總皂苷(Gypenosides,GPs)進行干預,觀察小鼠神經(jīng)功能行為改變、視神經(jīng)及視網(wǎng)膜形態(tài)學改變、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(Retinal Ganglion Cells,RGCs)凋亡情況,探討GPs對EAE小鼠視神經(jīng)及視網(wǎng)膜的保護作用。方法應用MOG35-55多肽加完全弗氏佐劑皮下注射免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,實驗分為正常對照組、EAE模型組、GPs干預組、甲基強的松龍組(MP組)、GPs與甲基強的松龍聯(lián)合干預組(COM組)。自免疫后第7天起,GPs干預組每天給予腹腔內(nèi)注射GPs 30mg/kg,連續(xù)給藥至動物處死;MP組每天給予腹腔內(nèi)注射甲基強的松龍20mg/kg,連續(xù)給藥3天;COM組每天給予腹腔內(nèi)注射甲基強的松龍20mg/kg,連續(xù)給藥3天,給予腹腔內(nèi)注射GPs 30mg/kg,連續(xù)給藥至動物處死。每天稱量小鼠體重,觀察記錄神經(jīng)功能表現(xiàn)、評分,于免疫后第7天進行視覺誘發(fā)電位檢查;于免疫后第14天、第20天、第30天、第40天進行OCT檢查,于免疫后第20天、第40天取小鼠視神經(jīng)及視網(wǎng)膜組織制成石蠟切片,采用HE染色評估視神經(jīng)、視網(wǎng)膜炎性細胞浸潤情況,TUNEL法檢測RGCs凋亡改變。結果1、發(fā)病時間、評分:正常對照組小鼠未出現(xiàn)癥狀;實驗組小鼠于免疫后一周左右體重稍有下降,后逐漸增長;實驗組小鼠于免疫后第9天起陸續(xù)發(fā)病。EAE組小鼠發(fā)病率為100%,神經(jīng)功能評分較高,病情最嚴重;GPs組發(fā)病率為97%,COM組、MP組發(fā)病率均為90%。COM組可推遲發(fā)病時間,與EAE組相比,差別具有統(tǒng)計學意義。正常對照組小鼠評分均為0分,免疫后第14天,COM組與EAE組相比,癥狀較輕,評分較低,差別具有統(tǒng)計學意義;在其余各時間段三組藥物干預組小鼠癥狀評分與EAE組相比,總體評分較低,但差別無統(tǒng)計學意義。2、VEP:正常對照組、EAE組小鼠免疫后第7天VEP檢查結果顯示EAE組小鼠的N1波潛伏期、P1波潛伏期、P2波潛伏期均較正常對照組延長,P1波振幅較正常對照組下降,差別具有統(tǒng)計學意義(P0.05);而N2波潛伏期、P2波振幅與正常對照組相比無明顯差異。3、OCT:免疫后第20天,EAE組RNFL與正常對照組、三個藥物干預組相比明顯變薄,差別具有統(tǒng)計學意義;三個藥物干預組之間對比差異不大,且均與正常對照組相似厚度,無統(tǒng)計學差異。免疫后第30天,EAE組RNFL進一步變薄,EAE組、MP組RNFL與正常對照組相比均明顯變薄P0.01,EAE組為甚,正常對照組、GPs組、COM組相似厚度,無統(tǒng)計學差異;三個藥物干預組均較EAE組厚,具有統(tǒng)計學差異;MP組較GPs組、COM組薄,差別具有統(tǒng)計學意義。免疫后第40天,EAE組、MP組RNFL進一步變薄,GPs組、COM組相似厚度且均與正常對照組相似厚度,無統(tǒng)計學差異;GPs組、COM組均較EAE組、MP組為厚,具有統(tǒng)計學差異。4、HE染色:正常對照組小鼠視網(wǎng)膜結構排列整齊,染色均勻,未發(fā)現(xiàn)有炎性細胞浸潤;視神經(jīng)縱切面HE染色均勻,神經(jīng)纖維整齊均勻排列,未觀察到有炎性細胞浸潤現(xiàn)象。于小鼠免疫后第20天,EAE組視網(wǎng)膜、視神經(jīng)可見較多數(shù)量的炎性細胞浸潤,水腫較明顯,神經(jīng)纖維排列紊亂,大量空泡形成;三個藥物干預組炎性浸潤程度相似且均較EAE組少見,水腫較輕。于小鼠免疫后第40天,各組小鼠視神經(jīng)、視網(wǎng)膜的炎性細胞浸潤均較前減少,水腫較前減輕,三個藥物干預組與EAE組相比,神經(jīng)節(jié)細胞層水腫較輕,炎性細胞也較少見。可見EAE組、MP組RGCs較前明顯減少,排列疏松。5、TUNEL染色:正常對照組小鼠幾乎未觀察到RGCs凋亡;實驗組均可見不同程度的RGCs凋亡,其中以EAE組、MP組最為明顯,且隨著時間的推移,凋亡細胞數(shù)目逐漸增多,與正常對照組相比具有顯著差異。GPs組、COM組凋亡細胞相對較少,隨著藥物干預時間的延長,存活的RGCs較EAE組多。結論(1)絞股藍總皂苷與甲基強的松龍聯(lián)合運用可推遲EAE小鼠的發(fā)病;(2)絞股藍總皂苷單獨或與甲基強的松龍聯(lián)合運用可阻止EAE病變中視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層變薄,對其起到保護作用;(3)絞股藍總皂苷可減輕EAE炎癥反應;(4)絞股藍總皂苷可減少EAE視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡,起到神經(jīng)保護作用。
[Abstract]:Objective To investigate the effects of GPs on optic nerve and retina in C57BL / 6 mice . Compared with the normal control group , there was no significant difference between the two groups . Compared with the normal control group , there was no significant difference between the two groups : the N1 wave latency , the P1 wave latency and the P2 wave latency were significantly lower than those in the normal control group . Compared with normal control group , there were no inflammatory cell infiltration . ( 2 ) The combined use of gypenoside alone or combined with methyl prednisolone can prevent the retinal nerve fiber layer from thinning and protect it ; ( 3 ) the gypenoside can reduce the inflammatory reaction of rats ; and ( 4 ) the gypenoside can reduce the apoptosis of the ganglion cells of the retina and play a role of nerve protection .
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R774.6

【參考文獻】

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2 張道來;孫濤;謝珊珊;王玉卓;馮玉新;辛華;;PI3K/Akt信號轉導通路在絞股藍皂苷拮抗谷氨酸誘導胎鼠大腦皮層神經(jīng)元氧化性損傷中的作用[J];山東大學學報(醫(yī)學版);2011年10期

3 史琳;趙紅;張璐雅;滿亮;;絞股藍藥理作用的研究進展[J];藥物評價研究;2011年02期

4 趙長龍,方嚴;視神經(jīng)損傷藥物治療的新進展[J];臨床眼科雜志;2000年05期

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本文編號：1904107