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川產(chǎn)中柴2號(hào)主要化學(xué)成分及指紋圖譜研究

發(fā)布時(shí)間:2018-04-30 00:43

  本文選題:中柴2號(hào) + 柴胡皂苷 ; 參考:《西南科技大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:柴胡作為我國(guó)傳統(tǒng)常用中藥,藥用歷史悠久。在2015年版的《中華人民共和國(guó)藥典》中收錄的柴胡原植物有兩種,即北柴胡(Bupleurum chinense DC.)和狹葉柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)。柴胡苦辛微寒,具有解熱、退熱、抗菌、抗病毒、解除胸悶脹痛的作用。柴胡屬植物廣泛分布在我國(guó)各地,除海南省未見(jiàn)報(bào)道外,其他各省均有柴胡屬植物分布,近些年來(lái),四川廣元和綿陽(yáng)已逐漸成為柴胡的主要產(chǎn)地。本研究分析了川產(chǎn)北柴胡中柴2號(hào)中柴胡皂苷、黃酮、多糖等成分含量并建立中柴2號(hào)的HPLC和GC指紋圖譜,為中柴2號(hào)藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)、品種鑒別及其入藥提供科學(xué)依據(jù)。主要結(jié)果如下:通過(guò)對(duì)中柴2號(hào)樣品預(yù)處理?xiàng)l件、檢測(cè)條件、洗脫條件的優(yōu)化,流動(dòng)相、色譜柱的選擇,確定了柴胡皂苷與黃酮類(lèi)成分測(cè)定的最終色譜條件為Hypesil GOLD色譜柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B);梯度洗脫程序(0~5 min,10%A~30%A;5 min~25 min,30%A~70%A);流速為0.8 m L·min-1;柱溫檢測(cè)為常溫(30oC),進(jìn)樣量10μL,運(yùn)行時(shí)間25 min,檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm。采用HPLC法測(cè)定中柴2號(hào)中皂苷與黃酮類(lèi)成分,結(jié)果發(fā)現(xiàn)中柴2號(hào)地下部分中含有柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d,且柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量總和均大于0.30%,高于2015年版《中國(guó)藥典》柴胡藥材含量測(cè)定項(xiàng)下的最低限度規(guī)定,最高可達(dá)1.01%;地下部分僅含有少量的黃酮類(lèi)成分。中柴2號(hào)地上部分中含有少量柴胡皂苷a和柴胡皂苷d,其和最高為0.10%;地上部分含有較多的黃酮類(lèi)成分,其含量最高為0.68%。采用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定中柴2號(hào)中總皂苷、總黃酮和多糖含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)中柴2號(hào)地上部分柴胡總皂苷含量為0.26%~0.82%,總黃酮含量為0.81%~2.76%,可溶性多糖含量為0.996~3.859 mg·g-1,粗多糖含量為6.032~10.632 mg·g-1,總多糖含量最高可達(dá)12.837 mg·g-1。地下部分柴胡總皂苷含量為1.05%~2.12%,總黃酮含量為0.18%~0.46%,可溶性多糖含量為2.118~13.809 mg·g-1,粗多糖含量為7.153~20.257 mg·g-1,總多糖含量最高可達(dá)28.992 mg·g-1。中柴2號(hào)地上部分總皂苷含量在8、9月份達(dá)到最高值,10、11月份總皂苷含量降低,地下部分在總皂苷含量在7、8月份達(dá)到最高值,9、10、11月后總皂苷含量逐漸降低;中柴2號(hào)地上部分總黃酮含量在8、9月份達(dá)到最高值,10、11月份逐漸降低,中柴2號(hào)地下部分總黃酮含量在7、8月份達(dá)到最高值,9、10、11月后逐漸降低;中柴2號(hào)地上部分及地下部分總多糖含量從7月份至11月份基本呈上升趨勢(shì)。10批中柴2號(hào)樣品HPLC及GC色譜圖導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》,HPLC指紋圖譜匹配10個(gè)共有峰并確定柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d三個(gè)有效成分,共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD值在0.18%~0.70%之間,共有峰相對(duì)峰面積RSD值在20.95%~101.05%之間;GC指紋圖譜匹配12個(gè)共有峰,共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD值在0.04%~0.32%之間,共有峰相對(duì)峰面積RSD值在20.67%~88.92%之間,結(jié)果表明10批柴胡主要成分基本相同,但各成分含量差異較大,即相同品種不同產(chǎn)區(qū)川產(chǎn)柴胡各化學(xué)成分的含量有明顯差別。中柴2號(hào)HPLC指紋圖譜相似度結(jié)果表明各批柴胡樣品與對(duì)照指紋圖譜的相似度在0.39%~0.97%之間,其它各樣品間的相似度在0.05%~0.95%之間;中柴2號(hào)GC指紋圖譜相似度結(jié)果表明各批柴胡樣品與對(duì)照指紋圖譜的相似度在0.76%~0.99%之間,其它各樣品間的相似度在0.33%~0.98%之間。雖然各批柴胡樣品基源相同,但由于生長(zhǎng)環(huán)境不同,指紋圖譜相似度也有所不同。本課題通過(guò)對(duì)四川種植基地10批柴胡中柴2號(hào)指紋圖譜的研究,建立了川產(chǎn)柴胡中柴2號(hào)HPLC與GC指紋圖譜分析方法,將中柴2號(hào)柴胡皂苷成分與揮發(fā)油成分的共有峰信息分別在GC與HPLC圖譜中展現(xiàn),更全面科學(xué)的對(duì)藥材質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià),該方法簡(jiǎn)單易行,重現(xiàn)性好,為川產(chǎn)柴胡藥材的品質(zhì)監(jiān)控提供了一定的科學(xué)依據(jù)。
[Abstract]:Bupleurum Bupleurum is a traditional Chinese traditional medicine with a long history of medicinal use. In the 2015 edition of the People's Republic of China Pharmacopoeia, there are two kinds of Bupleurum bupleurum, which are Bupleurum chinense DC. and Bupleurum scorzonerifolium Willd.. The bupleurum Bupleurum is bitter and cold, it has antipyretic, antipyretic, antiviral, antiviral, and relieving pain in the chest. The genus Bupleurum is widely distributed in all parts of China, except in Hainan province. In other provinces, the genus Bupleurum is distributed. In recent years, Sichuan Guangyuan and Mianyang have gradually become the main producing areas of Bupleurum Bupleurum. This study analyzed the content of Bupleurum bupleurum, flavonoids and polysaccharides in Bupleurum Bupleuri No. 2 in Sichuan Province, and set up No. 2 of Zhong Chai. The HPLC and GC fingerprints provide scientific basis for the quality evaluation of Chinese Chai 2, variety identification and drug delivery. The main results are as follows: the final chromatographic conditions for the determination of saponins and flavonoids of Bupleurum saponins and flavonoids are determined to be Hypesi by the pretreatment conditions of the sample of Zhong Chai No. 2, the conditions of detection, the optimization of the elution conditions, the selection of the mobile phase and the chromatographic column. The L GOLD column (4.6 mm x 250 mm, 5 mu m), the mobile phase is acetonitrile (A) -0.1% phosphoric acid solution (B), the gradient elution program (0~5 min, 10%A~30%A, 5 min~25), the flow velocity is 0.8, and the column temperature is measured as normal temperature, the sample volume is 10 mu, the transportation time 25, and the detection wavelength 210 for the determination of saponins and flavonoids in the middle Chai 2 The results found that the underground part of Zhong Chai 2 contains saponins a, bupleurum saponins C and Bupleurum saponins D, and the total content of Radix Bupleurum saponins A and Radix Bupleurum saponins D is more than 0.30%, which is higher than the minimum regulation of Chinese Pharmacopoeia < Chinese Pharmacopoeia > Radix Bupleuri content determination, up to 1.01%. The underground part only contains a small amount of flavonoids. The upper part of Zhong Chai No. 2 contains a small amount of Bupleurum saponins A and Bupleurum saponins D, and the highest is 0.10%; the upper part of the ground contains more flavonoids. The highest content is 0.68%. using UV visible spectrophotometry to determine the total saponins, total flavones and polysaccharides content in No. 2 of Zhong Chai, and the results found the total saponins content of Bupleurum Bupleurum in the middle part of Chai 2. The content of total flavonoids was 0.81%~2.76%, the content of soluble polysaccharide was 0.996~3.859 mg. G-1, the content of crude polysaccharide was 6.032~10.632 mg. G-1, the total polysaccharide content was up to 12.837 mg. G-1., the total content of total saponins of Radix Bupleuri was 1.05%~2.12%, the content of total flavonoids was 0.18%~ 0.46%, and the content of soluble polysaccharide was much more coarse. The content of sugar was 7.153~20.257 mg g-1, the content of total polysaccharide was up to 28.992 mg. G-1., the total saponsides content of Chai No. 2 reached the highest value in the month of 8,9, the total saponins content in the month of 10,11 decreased, the total saponins content in the underground part reached the highest value in 7,8 month, and the total saponins content gradually decreased after 9,10,11 month, and the upper part of Zhong Chai 2 was total. The content of flavonoids reached the highest value in the month of 8,9 and gradually decreased in the month of 10,11. The content of total flavonoids in the underground part of Zhong Chai 2 reached the highest value in the month of 7,8, and gradually decreased after 9,10,11 months. The total polysaccharide content of the upper and underground parts of the middle Chai No. 2 was basically up from July to November. 10 common peaks were matched by HPLC fingerprints and three effective components of Bupleurum saponins a, bupleurum saponins C and Bupleurum saponins D, the RSD value of the total peak relative retention time was between 0.18%~0.70%, the total peak area RSD value was between 20.95%~ 101.05% and the GC fingerprint matched 12 common peaks. The peak relative retention time RSD value was between 0.04%~0.32%, and the total peak relative peak area RSD value was between 20.67%~88.92%. The results showed that the main components of the 10 batches of Radix Bupleuri were basically the same, but the content of each component was different, that is, the content of the chemical composition of the radix Bupleuri in the same variety of different producing areas was distincently different. The similarity of the HPLC fingerprint of Zhong Chai 2 was similar. The results showed that the similarity degree of each batch of Radix Bupleuri samples and the control fingerprints was between 0.39%~0.97%, the similarity of all kinds of products was between 0.05%~0.95%, and the similarity of GC fingerprint of Zhong Chai 2 showed that the similarity degree of each batch of Radix Bupleuri samples and the control fingerprints was between 0.76%~0.99% and the similarity of all kinds of products was in 0.33%~0.98%. Although the base source of all batches of Radix Bupleuri was the same, the similarity of fingerprints was different because of the different growth environment. Through the study on the fingerprint of 10 batches of Chaihu Zhong Chai 2 in Sichuan planting base, the method of HPLC and GC fingerprint analysis of Bupleurum chinchai 2 was established, and the composition of Bupleurum saponins and the volatile oil composition of Zhong Chai 2 The common peak information was displayed in the GC and HPLC maps, and the quality of the medicinal materials was evaluated in a more comprehensive and scientific way. The method was simple and reproducible, which provided a scientific basis for the quality control of Radix Bupleuri in Sichuan Province.

【學(xué)位授予單位】:西南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R284.1

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本文編號(hào):1822317

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