本文選題：櫻桃花色苷 + 抗氧化活性　； 參考：《浙江大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：脂質(zhì)沉積是指肝、胰或者脂肪組織中脂滴數(shù)量顯著增多且聚集。脂質(zhì)異位沉積對(duì)骨骼肌、胰島β細(xì)胞、肝臟等均有一定的脂毒性作用,并且與糖尿病、脂肪肝、高脂血癥等疾病發(fā)生密切相關(guān)�，F(xiàn)有的降脂藥物均具有一定的副作用及不良反應(yīng)。作為藥食同源的美味佳果,櫻桃富含多種活性營(yíng)養(yǎng)成分,其中花色苷含量可達(dá)4-450mg/100g鮮重。櫻桃花色苷有抗氧化、預(yù)防心血管疾病以及降脂減肥等功效,可降低膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平,提高載脂蛋白(ApoA)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)表達(dá)水平。因此,從櫻桃中分離制備花色苷并研究其降脂功效具有重要意義。本課題從櫻桃中提取櫻桃花色苷并對(duì)櫻桃花色苷的組分及總黃酮、總多酚含量進(jìn)行測(cè)定并分析了櫻桃花色苷的抗氧化活性及其對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)沉積的抑制改善作用,探討了細(xì)胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細(xì)胞脂質(zhì)沉積中的作用。課題主要研究結(jié)果如下:1.分離純化所得的櫻桃花色苷經(jīng)HPLC組分鑒定發(fā)現(xiàn)其主要成分矢車(chē)菊素-3-葡萄糖苷、矢車(chē)菊素-3-蕓香糖苷、花葵素-3-葡萄糖苷。運(yùn)用DPPH、ATBS等體外抗氧化實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)合熒光探針對(duì)櫻桃花色苷的抗氧化活性進(jìn)行評(píng)價(jià)分析證實(shí)了櫻桃花色苷有較強(qiáng)的體外抗氧化能力,且對(duì)丙烯酰胺(AA)誘導(dǎo)L02細(xì)胞形成的氧化應(yīng)激模型有較好的保護(hù)作用。2.利用油酸(OA)孵育誘導(dǎo)HepG2、L02細(xì)胞建立的細(xì)胞脂肪沉積模型評(píng)價(jià)櫻桃花色苷對(duì)細(xì)胞脂質(zhì)沉積的抑制改善作用,證實(shí)櫻桃花色苷對(duì)HepG2、L02細(xì)胞脂質(zhì)沉積有顯著改善作用。櫻桃花色苷可顯著降低細(xì)胞甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量水平。3.結(jié)合透射電鏡、免疫熒光等實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討細(xì)胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細(xì)胞脂質(zhì)沉積中的作用,發(fā)現(xiàn)櫻桃花色苷可通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞自噬體形成,上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3、Atg5、Beclin1表達(dá)水平,下調(diào)P62的表達(dá)水平進(jìn)一步緩解抑制HepG2、L02脂質(zhì)沉積作用,櫻桃花色苷可下調(diào)脂肪酸合成相關(guān)蛋白FAS、ACC的表達(dá),從而證實(shí)了細(xì)胞自噬參與櫻桃花色苷的降脂作用。
[Abstract]:Lipid deposition refers to the significant increase and accumulation of lipid droplets in liver, pancreas or adipose tissue.Lipid ectopic deposition has some lipid toxicity on skeletal muscle, islet 尾 cells and liver, and is closely related to diabetes mellitus, fatty liver, hyperlipidemia and other diseases.The existing lipid-lowering drugs have some side effects and adverse reactions.As a delicious fruit, cherry is rich in many kinds of active nutrients, among which anthocyanin content can reach 4-450mg/100g fresh weight.Cherry anthocyanin has the functions of anti-oxidation, preventing cardiovascular disease and reducing fat and weight loss. It can reduce the levels of TC, TG, LDL-C, and increase the expression of ApoAn and HDL-C.Therefore, it is of great significance to isolate anthocyanin from cherry and study its lipid-lowering effect.In this study, cherry anthocyanin was extracted from cherry and its components, total flavonoids and total polyphenols were determined. The antioxidant activity of cherry anthocyanin and its effect on the inhibition of cellular lipid deposition were analyzed.The role of autophagy in the inhibition of cherry anthocyanin in improving cell lipid deposition was investigated.The main research results are as follows: 1: 1.The main components of the purified Cherry anthocyanin were identified by HPLC. The main components were cornulin-3-glucoside, cornulin-3-rutinoside and anthocyanin-3-glucoside.The antioxidant activity of cherry anthocyanin was evaluated by using DPPH ATBS and fluorescence probe in vitro. The results showed that cherry anthocyanin had strong antioxidant ability in vitro.And it has a good protective effect on the oxidative stress model of L02 cells induced by acrylamide (AA). 2.The effect of cherry anthocyanin on the inhibition of lipid deposition in HepG2L02 cells was evaluated by using oleic acid (OAA) incubation model. It was proved that cherry anthocyanin could significantly improve the lipid deposition of HepG2L02 cells.Cherry anthocyanin could significantly reduce the contents of TGG, TCU, alt, AST3 in the cell lines of triglyceride, total cholesterol, alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase (AST).In combination with transmission electron microscopy and immunofluorescence assay, the role of cell autophagy in the inhibition of cherry anthocyanin in improving cell lipid deposition was further investigated. It was found that cherry anthocyanin could promote the formation of autophagy.The up-regulated expression of autophagy associated protein LC3 / Atg5 / Beclin1, down-regulated the expression of P62 and further alleviated the inhibition of lipid deposition in HepG2 / L02. Cherry anthocyanin could down-regulate the expression of fatty acid synthase associated protein FASA ACC.It was proved that autophagy was involved in the lipid-lowering effect of Cherry anthocyanin.
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R285.5

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