發(fā)布時間：2018-04-16 01:03

  本文選題：櫻桃花色苷 + 抗氧化活性　； 參考：《浙江大學》2017年碩士論文

【摘要】：脂質沉積是指肝、胰或者脂肪組織中脂滴數量顯著增多且聚集。脂質異位沉積對骨骼肌、胰島β細胞、肝臟等均有一定的脂毒性作用,并且與糖尿病、脂肪肝、高脂血癥等疾病發(fā)生密切相關�，F有的降脂藥物均具有一定的副作用及不良反應。作為藥食同源的美味佳果,櫻桃富含多種活性營養(yǎng)成分,其中花色苷含量可達4-450mg/100g鮮重。櫻桃花色苷有抗氧化、預防心血管疾病以及降脂減肥等功效,可降低膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平,提高載脂蛋白(ApoA)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)表達水平。因此,從櫻桃中分離制備花色苷并研究其降脂功效具有重要意義。本課題從櫻桃中提取櫻桃花色苷并對櫻桃花色苷的組分及總黃酮、總多酚含量進行測定并分析了櫻桃花色苷的抗氧化活性及其對細胞脂質沉積的抑制改善作用,探討了細胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細胞脂質沉積中的作用。課題主要研究結果如下:1.分離純化所得的櫻桃花色苷經HPLC組分鑒定發(fā)現其主要成分矢車菊素-3-葡萄糖苷、矢車菊素-3-蕓香糖苷、花葵素-3-葡萄糖苷。運用DPPH、ATBS等體外抗氧化實驗、細胞實驗結合熒光探針對櫻桃花色苷的抗氧化活性進行評價分析證實了櫻桃花色苷有較強的體外抗氧化能力,且對丙烯酰胺(AA)誘導L02細胞形成的氧化應激模型有較好的保護作用。2.利用油酸(OA)孵育誘導HepG2、L02細胞建立的細胞脂肪沉積模型評價櫻桃花色苷對細胞脂質沉積的抑制改善作用,證實櫻桃花色苷對HepG2、L02細胞脂質沉積有顯著改善作用。櫻桃花色苷可顯著降低細胞甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)含量水平。3.結合透射電鏡、免疫熒光等實驗進一步探討細胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細胞脂質沉積中的作用,發(fā)現櫻桃花色苷可通過促進細胞自噬體形成,上調自噬相關蛋白LC3、Atg5、Beclin1表達水平,下調P62的表達水平進一步緩解抑制HepG2、L02脂質沉積作用,櫻桃花色苷可下調脂肪酸合成相關蛋白FAS、ACC的表達,從而證實了細胞自噬參與櫻桃花色苷的降脂作用。
[Abstract]:Lipid deposition refers to the significant increase and accumulation of lipid droplets in liver, pancreas or adipose tissue.Lipid ectopic deposition has some lipid toxicity on skeletal muscle, islet 尾 cells and liver, and is closely related to diabetes mellitus, fatty liver, hyperlipidemia and other diseases.The existing lipid-lowering drugs have some side effects and adverse reactions.As a delicious fruit, cherry is rich in many kinds of active nutrients, among which anthocyanin content can reach 4-450mg/100g fresh weight.Cherry anthocyanin has the functions of anti-oxidation, preventing cardiovascular disease and reducing fat and weight loss. It can reduce the levels of TC, TG, LDL-C, and increase the expression of ApoAn and HDL-C.Therefore, it is of great significance to isolate anthocyanin from cherry and study its lipid-lowering effect.In this study, cherry anthocyanin was extracted from cherry and its components, total flavonoids and total polyphenols were determined. The antioxidant activity of cherry anthocyanin and its effect on the inhibition of cellular lipid deposition were analyzed.The role of autophagy in the inhibition of cherry anthocyanin in improving cell lipid deposition was investigated.The main research results are as follows: 1: 1.The main components of the purified Cherry anthocyanin were identified by HPLC. The main components were cornulin-3-glucoside, cornulin-3-rutinoside and anthocyanin-3-glucoside.The antioxidant activity of cherry anthocyanin was evaluated by using DPPH ATBS and fluorescence probe in vitro. The results showed that cherry anthocyanin had strong antioxidant ability in vitro.And it has a good protective effect on the oxidative stress model of L02 cells induced by acrylamide (AA). 2.The effect of cherry anthocyanin on the inhibition of lipid deposition in HepG2L02 cells was evaluated by using oleic acid (OAA) incubation model. It was proved that cherry anthocyanin could significantly improve the lipid deposition of HepG2L02 cells.Cherry anthocyanin could significantly reduce the contents of TGG, TCU, alt, AST3 in the cell lines of triglyceride, total cholesterol, alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase (AST).In combination with transmission electron microscopy and immunofluorescence assay, the role of cell autophagy in the inhibition of cherry anthocyanin in improving cell lipid deposition was further investigated. It was found that cherry anthocyanin could promote the formation of autophagy.The up-regulated expression of autophagy associated protein LC3 / Atg5 / Beclin1, down-regulated the expression of P62 and further alleviated the inhibition of lipid deposition in HepG2 / L02. Cherry anthocyanin could down-regulate the expression of fatty acid synthase associated protein FASA ACC.It was proved that autophagy was involved in the lipid-lowering effect of Cherry anthocyanin.
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：1756585