本文選題：膿毒癥 + 脂多糖��； 參考：《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景與目的膿毒癥(Sepsis)是指人體在外源性微生物感染時(shí)反應(yīng)失調(diào)時(shí)全身多器官功能障礙,特別是在宿主重度創(chuàng)傷、休克、燒傷等危重疾病病人身上存在的一個(gè)嚴(yán)重性的問題,盡管現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的治療能不斷提升,膿毒癥的致死率仍居高不下。近些年流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果報(bào)告顯示,在美國每年約有75萬膿毒癥患者,其中重癥膿毒血癥(severe sepsis)患者占9%,膿毒性休克(septic shock)患者占3%,這些患者中有超過21萬無法從臨床治療中生還。目前膿毒癥病人的死亡率仍居高不下,最主要的兩大因素依然是多器官功能衰竭和感染。而由細(xì)菌感染引起的約占膿毒癥總數(shù)的90%以上,其中60%是由革蘭氏染色陰性桿菌感染侵襲所致,大腸埃希氏菌則是重要感染源。細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖(LPS)是一種高度�；奶侵�,主要死由核心多糖、脂類、抗原多糖組成,作為革蘭氏陰性桿菌細(xì)胞壁的主要組成成分,是其所致膿毒癥時(shí)最重要的致病因素。脂多糖經(jīng)中性粒細(xì)胞膜表面的模式識(shí)別與Toll4受體結(jié)合使細(xì)胞活化,活化后的中性粒細(xì)胞可以使釋放大量炎癥介子如IL-6、白細(xì)胞三烯B4、活性氧。膿毒癥早期大量的中性粒細(xì)胞聚集在血供豐富的器官中,例如肝臟、脾臟中,在全身感染加重時(shí)細(xì)菌通過釋放促炎因子,可以誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞無法發(fā)揮正常功能,并且使中性粒細(xì)胞在諸如肝臟中大量聚集并活化,引起(SIRS)全身性炎癥反應(yīng)。在臨床治療中,大量或不合理的抗生素應(yīng)用,使得很多致病菌產(chǎn)生強(qiáng)大的耐藥性,使得抗生素種種弊端體現(xiàn)而出。因此在臨床治療上,新的抗菌抑菌藥物或方法則急需發(fā)現(xiàn)與運(yùn)用,脂多糖刺激的中性粒細(xì)胞后增強(qiáng)其吞噬功能,脂多糖對中性粒細(xì)胞刺激后吞噬功能增強(qiáng)的調(diào)控和機(jī)制尚無明確的報(bào)道。方法招募健康成年志愿者采集靜脈血,采用Ficoll梯度離心法分離健康成年人血液中的中性粒細(xì)胞,后采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為正常對照組(CONTROL),脂多糖刺激10分鐘組,脂多糖刺激20分鐘組,脂多糖刺激30分鐘組,抑制劑+脂多糖組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測中性粒細(xì)胞吞噬功能,骨架蛋白F-actin表達(dá)。在透視電鏡下觀察中性粒細(xì)胞形態(tài)的改變。在熒光顯微鏡下觀察中性粒細(xì)胞形態(tài),骨架蛋白F-actin表達(dá),以及對25922GFP的吞噬情況。采用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot,WB)檢測中性粒細(xì)胞胞內(nèi)蛋白Pi3k、P-Pi3k、AKT、P-Akt。的表達(dá)。結(jié)果和結(jié)論1.脂多糖刺激并激活中性粒細(xì)胞后,可見中性粒細(xì)胞呈不規(guī)則形,中性粒細(xì)胞內(nèi)顆粒減少,胞膜褶皺,有大量偽足生成,中性粒細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化。2.脂多糖刺激中性粒細(xì)胞后,中性粒細(xì)胞對細(xì)菌吞噬功能得到加強(qiáng),且呈時(shí)間依賴性。3.脂多糖刺激中性粒細(xì)胞后,中性粒細(xì)胞骨架蛋白F-actin大量增多并且發(fā)生極化。脂多糖刺激中性粒細(xì)胞后F-actin的形成與極化增加與吞噬功能的增強(qiáng)有密切關(guān)系。4.脂多糖通過對中性粒細(xì)胞內(nèi)pi3k/Akt信號(hào)通路的激活,促進(jìn)中性粒細(xì)胞對ATCC 25922GFP的吞噬能力增強(qiáng)。5.脂多糖刺激中性粒細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi)關(guān)鍵蛋白pi3k、Akt的磷酸化水平均發(fā)生大程度的上升。實(shí)驗(yàn)表明脂多糖刺激中性粒細(xì)胞后,其吞噬功能的增強(qiáng)可能與pi3k/Akt信號(hào)通路有關(guān)。
[Abstract]:BACKGROUND & OBJECTIVE sepsis refers to the serious problem of systemic multiple organ dysfunction in patients with severe sepsis , especially in severe trauma , shock , burn , etc . The results and conclusions were as follows : 1 . After stimulation with lipopolysaccharide , neutrophils were stimulated by lipopolysaccharide to stimulate neutrophils .

【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R459.7

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本文編號(hào)：1750440