本文選題：丙酮酸脫氫酶復合體 + NLRP3炎癥小體��； 參考：《大連醫(yī)科大學》2017年碩士論文

【摘要】：目的:丙酮酸脫氫酶復合體(PDC)是位于線粒體的催化丙酮酸脫羧成乙酰輔酶A的復雜酶系。PDC介導一系列病理生理過程包括乳酸性酸中毒、高血壓、腫瘤細胞突變等。目前尚不清楚PDC是否介導動脈粥樣硬化的病理生理過程。動脈粥樣硬化被認為是一種慢性炎癥過程,其中NLRP3炎癥小體起著重要的作用。本課題,我們探討PDC對NLRP3炎癥小體的活化及其隨后在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展中所起的潛在作用。方法:實驗分為四組:對照組、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)組、二氯乙酸鈉(DCA)組和雷諾嗪組。細胞模型采用人單核細胞/巨噬細胞系THP 1細胞。用DCA(1 mM)或雷諾嗪(5μM)分別直接或間接地激活PDC。免疫印跡(Western blot)分析用來確定NLRP3和其下游蛋白半胱氨酸蛋白酶-1、白細胞介素(IL)-1β,和IL-18的蛋白表達水平。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)用于確定釋放到培養(yǎng)上清液中的IL-1β和IL-18。用共培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)和THP-1單核細胞的方法測定單核細胞向內皮細胞的黏附功能。結果:DCA,類似于Ox-LDL,增加了 NLRP3和其下游蛋白半胱氨酸蛋白酶-1、IL-1 β和IL-18蛋白表達量。IL-1 β和IL-18釋放到上清液的量也隨著DCA的處理而增加,表明在THP-1細胞,PDC可激活NLRP3炎癥小體的活化。DCA所介導的PDC和NLRP3的活化可致單核細胞向內皮細胞的粘附功能增加,提示PDC的活化在動脈粥樣硬化病理生理過程的起始階段起著潛在的重要作用。然而,雷諾嗪作為間接的PDC激活劑,無論是免疫印跡還是酶聯(lián)免疫吸附試驗,均未發(fā)現NLRP3小體各組分的蛋白表達或其下游的細胞因子的釋放的增加,單核細胞向內皮細胞粘附亦未見明顯變化。結論:在THP-1細胞,DCA直接激活PDC可誘導NLRP3炎癥小體的活化及單核細胞向內皮細胞的粘附功能增加。
[Abstract]:Objective : To study the effect of PDC on the activation of NLRP3 and its downstream protein cystatin - 1 , IL - 1尾 and IL - 18 .

【學位授予單位】：大連醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R543.5
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本文編號：1739850