海底熱液口微生物次級代謝產(chǎn)物研究
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《浙江大學》 2016年
海底熱液口微生物次級代謝產(chǎn)物研究
丁馳弘
【摘要】:海底熱液口微生物由于其獨特的生存環(huán)境,對高濃度重金屬具有極強的耐受能力,其良好的生物和化學多樣性使它們能夠產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎的次級代謝產(chǎn)物,逐漸成為了海洋天然產(chǎn)物開發(fā)和研究的熱點。本文以兩株從臺灣龜山島熱液口泥沙和生物樣本中分離得到的曲霉屬真菌(YQ-13, Aspergillus sp. WU 243)作為研究對象,采用普通實驗室發(fā)酵和金屬逆境脅迫兩種不同方式,研究其發(fā)酵產(chǎn)物乙酸乙酯萃取層的次級代謝物,并利用NMR、LC-MS、UV等光譜分析手段對分離純化后的單體化合物進行了結(jié)構(gòu)鑒定。從曲霉屬真菌YQ-13的浸膏中一共分離得到了8個化合物,其中1個為新天然產(chǎn)物,名稱為3-hydroxy-2-(2-hydroxy-6-methoxy-4-methylbenzoyl)-5-methoxy(1),是二苯基甲酮類衍生物。其余7個已知化合物分別為myristic acid (2), orcinol (3), 1,2-seco-trypacidin(4), leporin A(5), chaetominine (6),5-hydroxy-2-hydroxym ethyl-4H-pyran-4one (7), N-methyl-2-pyrolidinone (8)。從普通條件發(fā)酵培養(yǎng)的曲霉屬真菌Aspergillus sp. WU 243的浸膏中一共分離得到了11個已知化合物,分別為1-acetyl-7-hydroxy-β-arboline (9),2-(4-hydrixy phenyl)-ethanol(10), ergosterol (11), asperbiphenyl (12), hydroxysydonic acid(13), sydonol(14)aspergillusene A(15), diorcinol(16), acremolin(17),4H-pyran-4-one, 2,3-dihydro-3-hydroxy-6-methyl (18), ditryptophenaline(19)。熱液口微生物由于其特殊的棲息環(huán)境使其對環(huán)境中的重金屬有較強的耐受能力。本文除了常規(guī)的培養(yǎng)發(fā)酵,還研究了Cu2+離子對曲霉屬真菌YQ-13代謝模式的影響,發(fā)現(xiàn)雖然沒有新天然產(chǎn)物產(chǎn)生,但隨著銅離子濃度的升高,2種原本產(chǎn)量較低的二次代謝產(chǎn)物變成了主要的代謝產(chǎn)物;對Aspergillus sp. WU 243采用金屬脅迫法培養(yǎng),結(jié)果表明在Co2+刺激下其代謝模式發(fā)生改變,新產(chǎn)生了4種不同的代謝產(chǎn)物。通過提取分離,運用NMR,液相質(zhì)譜聯(lián)用等手段進行了結(jié)構(gòu)鑒定,確認產(chǎn)生了一個混合型聚酮萜類的新化合物aspergstressin(20)并確定了其相對構(gòu)型,并根據(jù)相關(guān)文獻推測給出了可能的生合成途徑。其余3個脅迫產(chǎn)物為已知化合物cyclo-(L-tryptophyl-L-phenylalanyl) (21),cordyol C (22),sydonic acid(23)。新化合物20由多取代的7元雙烯環(huán)和高度稠合的三個聚酮類雜環(huán)構(gòu)成主體骨架,其中稠合的5元酮醚環(huán)和6元內(nèi)酯環(huán)還由一個酰胺橋接使其構(gòu)成一個籠狀結(jié)構(gòu);衔21具有和普通代謝產(chǎn)物完全不同的骨架,化合物22為普通代謝產(chǎn)物diorcinol的羥基化產(chǎn)物,化合物23為普通代謝產(chǎn)物hydroxysydonic acid的脫羥基產(chǎn)物。這表明金屬的逆境脅迫作用使熱液口微生物原有的生合成路徑和代謝模式發(fā)生變化,對于挖掘微生物基因潛力,開拓發(fā)現(xiàn)新的海洋微生物次級代謝產(chǎn)物具有重要的意義。
【關(guān)鍵詞】:
【學位授予單位】:浙江大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:Q936
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