本文選題：淋球菌　切入點(diǎn)：抗菌藥物耐藥性　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：第一部分合肥地區(qū)淋球菌抗菌藥物耐藥情況分析目的:抗菌藥物對合肥地區(qū)淋球菌的抗菌藥物耐藥性進(jìn)行檢測,并研究2014到2015年間本區(qū)域淋球菌的耐藥現(xiàn)狀。方法:對2014到2015年間就診于合肥省立醫(yī)院性病門診就診的有急性尿道炎癥狀的患者進(jìn)行淋球菌分離培養(yǎng)。使用瓊脂稀釋法測定大觀霉素、阿奇霉素、頭孢曲松、頭孢克肟、青霉素、環(huán)丙沙星及四環(huán)素對全部126株淋球菌的最小抑菌濃度(MIC)。對于四環(huán)素高度耐藥淋球菌(TRNG)和產(chǎn)青霉素酶淋球菌(PPNG),使用多重聚合酶鏈反應(yīng)法(PCR)分型其耐藥質(zhì)粒。結(jié)果:本研究中淋球菌對抗菌藥物耐藥率依次為:阿奇霉素28.6%(36/126),其中高度耐藥菌株比例為10.3%(13/126)、青霉素73.8%(93/126)、環(huán)丙沙星100%(126/126)、四環(huán)素81.7%(103/126)。頭孢曲松低敏菌株比例為10.3%(13/126),頭孢克肟低敏菌株比例為3.2%(4/126)。在所有的菌株中,不存在頭孢曲松、頭孢克肟以及大觀霉素的淋球菌耐藥菌株。但PPNG占總菌株的39.7%(50/126),TRNG比例為31.7%(40/126)。PPNG主要攜帶亞洲型質(zhì)粒(80%,40/50),非洲型質(zhì)粒比例(20%,10/50),未發(fā)現(xiàn)多倫多型。TRNG的主要質(zhì)粒型別為荷蘭型(97.5%,39/40)。結(jié)論:阿奇霉素耐藥菌株大比例出現(xiàn),呈上升趨勢的大觀霉素MIC及頭孢曲松低敏菌株數(shù)量,都預(yù)示著合肥地區(qū)淋球菌耐藥的嚴(yán)峻處境。針對這種情況,加強(qiáng)監(jiān)測其耐藥性趨勢和研究淋球菌耐藥性原理變得更加迫切。目前合肥地區(qū)的一線用藥依然可以選擇大觀霉素和頭孢曲松。另外研究發(fā)現(xiàn),合肥地區(qū)淋球菌質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥比例和TRNG質(zhì)粒型別分布與南京等中國東南部地區(qū)相似。第二部分耐阿奇霉素及頭孢低敏淋球菌的耐藥機(jī)制和分子流行病學(xué)研究目的:了解合肥地區(qū)阿奇霉素耐藥及頭孢類抗菌藥物低敏淋球菌菌株的基因型別、耐藥相關(guān)基因突變情況及菌株間的進(jìn)化關(guān)系。方法:1.對全部126株淋球菌菌株進(jìn)行耐藥相關(guān)基因mtrR檢測,并比較耐藥基因突變在阿奇霉素敏感組(MIC1 mg/L)和耐藥組(MIC≥1mg/L)間的差異。以淋球菌多抗原序列分型(NG-MAST)方法確立菌株的序列型(ST),并構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。2.對36株阿奇霉素耐藥淋球菌菌株及5株敏感菌株進(jìn)行23SrRNA的檢測,比較阿奇霉素耐藥菌株耐藥基因突變在中度耐藥組(MIC 1~64 mg/L)和高度耐藥組(MIC≥256 mg/L)間的差異。3.對14株頭孢曲松和/或頭孢克肟低敏的淋球菌菌株進(jìn)行Pen A檢測。結(jié)果:126株菌株中,mtrR序列前區(qū)A的缺失出現(xiàn)在107株菌株中,耐藥菌株中有33株(33/36;91.7%),敏感菌株中有74株(74/90;82.2%),兩者之間差異無顯著性(p=0.181)。而突變點(diǎn)G45D出現(xiàn)在25株耐藥菌株中(25/36,69.4%),9株敏感菌株中(9/90,10%),兩者間差異有顯著性(p0.01)。A40D的突變出現(xiàn)在三株頭孢低敏的菌株中,A39T突變出現(xiàn)在16株阿奇敏感菌株中。23Sr RNA基因4個等位基因的A2143G突變均出現(xiàn)在阿奇霉素高度耐藥(MICs≥256 mg/L)菌株中,4個等位基因的C2599T突變出現(xiàn)在MIC=8-32 mg/L的四株菌株中,5株敏感菌株中均未發(fā)生突變。該實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)廣譜頭孢菌素耐藥菌株,但其中有13株菌株對頭孢曲松低敏(MIC=0.125 mg/L),4株對頭孢克肟敏感性均降低(MIC=0.25 mg/L)。14株頭孢低敏菌株中共檢測出了6種不同氨基酸序列的PBP2,其中包含一個鑲嵌狀結(jié)構(gòu)(XXXV,n=3)。11個非鑲嵌狀結(jié)構(gòu)中,7株P(guān)BP2型別為XIII,XVII,XXI的菌株中出現(xiàn)了A501V的突變,3株(PBP2,XVIII)發(fā)生A501T突變,1株發(fā)生了G542S突變。126株菌株共鑒定出86個不同的STs,其中53個為新發(fā)現(xiàn)的STs,ST7469為最常見的菌株類型為6株,其次是ST1866為5株,且ST1866均為阿奇霉素耐藥菌株。經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)化樹分析未發(fā)現(xiàn)阿奇霉素耐藥與頭孢低敏菌株同源進(jìn)化現(xiàn)象。結(jié)論:mtrR編碼區(qū)G45D替換突變可能參與阿奇霉素高度耐藥。23Sr RNA中A2143G和C2599T突變分別與阿奇霉素高度和中度耐藥相關(guān),ST1866是本地區(qū)與阿奇霉素高度耐藥相關(guān)的優(yōu)勢基因型。鑲嵌狀pen A突變模式可能在介導(dǎo)本地區(qū)淋球菌對頭孢克肟低敏中發(fā)揮重要作用,特定的非鑲嵌狀pen A突變模式(尤其是PBP2氨基酸A501位點(diǎn)突變)可能在介導(dǎo)本地區(qū)淋球菌對頭孢曲松低敏中起著重要作用。合肥地區(qū)淋球菌菌株遺傳背景具有多樣性。
[Abstract]:In the first part , the drug resistance of gonococcus in Hefei was analyzed . The drug resistance of Neisseria gonococcus in Hefei was studied by using agar dilution method . The results showed that the ratio of antibiotic resistance was 10.3 % ( 13 / 126 ) , penicillin was 73.8 % ( 93 / 126 ) , ciprofloxacin 100 % ( 126 / 126 ) , tetracycline 81.7 % ( 103 / 126 ) . Conclusion : The gene mtrR of the resistant strains and the resistance to the resistance of the strains were detected by the method : 1 . The resistance mechanism and the molecular epidemiology of the resistant strains were compared between the susceptible strains and the resistant strains ( MIC 鈮，

本文編號：1687049