本文關(guān)鍵詞： 糖尿病胃輕癱 氧化應(yīng)激 平滑肌細胞凋亡 和胃湯 治療機制　出處：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：糖尿病具有多種并發(fā)癥,糖尿病胃輕癱(diabetic gastroparesis,DGP)就是其中常見的并發(fā)癥之一,并且對患者的生活質(zhì)量有非常嚴重的影響。目前,多種研究發(fā)現(xiàn)DGP患者體內(nèi)多存在高氧化應(yīng)激狀態(tài),并且具有胃平滑肌細胞凋亡的改變,這些因素導(dǎo)致的胃排空功能失調(diào)在糖尿病胃輕癱的發(fā)病機制中扮演了十分重要的角色。胃竇平滑肌細胞是胃收縮、排空的直接動力來源,氧化應(yīng)激導(dǎo)致的胃竇平滑肌細胞的凋亡是胃排空功能失調(diào)的重要病理生理基礎(chǔ)。目前,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)主要是通過促胃腸動力藥來改善糖尿病胃輕癱患者胃排空障礙的癥狀,但存在著療效不持久、具有一定副作用等問題。和胃湯(由生地黃、麥冬、玉竹、北沙參、生白術(shù)、佛手、萊菔子組成)是導(dǎo)師夏教授的經(jīng)驗方,根據(jù)DGP患者胃陰不足、脾氣虛弱的病機擬定,在臨床上取得了很好的治療效果,但和胃湯發(fā)揮藥效具體的作用機制尚不十分明確。課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn),該方在促進糖尿病胃輕癱大鼠胃排空和增加胃血流量方面具有十分重要的作用,同時可通過上調(diào)SCF-Kit信號途徑增加DGP大鼠胃竇Cajal間質(zhì)細胞的數(shù)量,可以有效改善糖尿病胃輕癱大鼠的胃起搏功能,具有促進胃動力的作用。但和胃湯能否通過改善機體氧化應(yīng)激水平,減少胃竇平滑肌細胞的凋亡,從而改善胃排空,仍需進一步驗證。目的:探討和胃湯治療糖尿病胃輕癱大鼠的靶點,明確是否可通過改善氧化應(yīng)激狀態(tài),減少胃平滑肌細胞的凋亡,從而逆轉(zhuǎn)DGP胃排空障礙,為中藥和胃湯多靶點治療糖尿病胃輕癱的機制闡明提供實驗依據(jù)。方法:健康清潔級體重201-205g成年雄性SD大鼠隨機分為正常對照組、糖尿病胃輕癱模型組,模型組按照70 mg/kg 一次性腹腔注射1%鏈脲佐菌素(STZ)建立糖尿病胃輕癱大鼠模型。造模完成后,將糖尿病胃輕癱模型組大鼠隨機分為三組,分別為模型對照組、和胃湯組和莫沙比利組。然后,按照體重分別予和胃湯組和莫沙比利組等量和胃湯和莫沙比利混懸液灌胃,正常對照組和糖尿病胃輕癱模型組予等量蒸餾水灌胃。給藥結(jié)束后,眼球取血,離心分離血漿,檢測血漿MDA、SOD含量,行酚紅灌胃實驗檢測胃排空率,留取胃部組織,部分用于TUNEL檢測胃竇平滑肌細胞凋亡的情況,部分用于提取蛋白Western blot檢測胃竇組織bcl-2蛋白、bax蛋白、HO-1蛋白的表達。結(jié)果:1、一般情況比較正常對照組大鼠皮膚完好、毛發(fā)柔軟有光澤、活潑好動、對外界刺激反應(yīng)靈敏、精神狀態(tài)佳。模型組大鼠皮膚出現(xiàn)局部缺損感染潰爛、毛發(fā)粗糙晦暗無光澤、不善運動活動度差、對外界刺激反應(yīng)遲鈍、精神差。各給藥組大鼠以上這些情況都優(yōu)于模型組,但與正常對照組比較仍有差距。2、各組大鼠體重比較正常對照組大鼠在體重持續(xù)增長一段時間后維持穩(wěn)定;給藥前,DGP模型組、和胃湯組和枸櫞酸莫沙比利組大鼠之間的體重?zé)o明顯差異(p0.05)。給藥結(jié)束后,與DGP模型組相比,和胃湯組大鼠體重明顯升高(P0.05),枸櫞酸莫沙比利組大鼠體重也明顯升高(P0.05)。與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠體重減輕(P0.05)。3、各組大鼠血糖比較給藥結(jié)束后,DGP模型組和正常對照組大鼠的血糖與給藥前相比無明顯變化,DGP模型組大鼠的血糖仍顯著高于正常對照組(P0.01)。和胃湯組的血糖與給藥前相比有明顯的下降(p0.05),但仍高于正常水平;枸櫞酸莫沙比利組大鼠血糖與給藥前相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),仍高于正常對照組的水平。4、各組大鼠胃排空率比較與正常對照組相比,DGP模型組大鼠的胃排空障礙十分明顯胃排空率顯著降低(P0.01)。經(jīng)藥物干預(yù)后,和胃湯組和枸櫞酸莫沙比利組大鼠的胃排空障礙得到部分糾正胃排空率較DGP模型組均有提高(P0.05);與枸櫞酸莫沙比利組大鼠相比較,和胃湯組大鼠的胃排空率略低于枸櫞酸莫沙比利組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5、各組大鼠血漿MDA、SOD含量比較與正常對照組相比,DGP模型組大鼠和藥物干預(yù)后大鼠血漿中MDA含量明顯升高(P0.05);與DGP模型組比較,枸櫞酸莫沙比利組大鼠與和胃湯組大鼠MDA含量明顯都顯著降低(P0.05);與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠血漿MDA含量明顯較低(P0.05)。與正常對照組相比,DGP模型組大鼠和給藥組大鼠血漿SOD活力顯著較低(P0.05);與DGP模型組比較,枸櫞酸莫沙比利組大鼠與和胃湯組大鼠SOD活力明顯較高(P0.05);與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠血漿SOD活力明顯較高(P0.05)。6、各組大鼠胃竇組織bax、bcl-2、HO-1蛋白含量變化與正常對照組相比,DGP模型組和給藥組大鼠胃竇組織bax蛋白含量均顯著升高(P0.05);與DGP模型組比較,給藥組bax大鼠胃竇組織蛋白含量明顯降低(P0.05);與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠胃竇組織bax蛋白含量較低,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。與正常對照組相比,DGP模型組和給藥組大鼠胃竇組織bcl-2蛋白含量明顯較低(P0.05);與DGP模型組比較,給藥組大鼠胃竇組織bcl-2蛋白較高(P0.05);與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠胃竇組織bcl-2蛋白含量較高,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。與正常對照組相比,DGP模型組和給藥組大鼠HO-1蛋白含量均顯著升高(P0.05);與DGP模型組比較,給藥組大鼠HO-1蛋白含量經(jīng)藥物作用后明顯升高(P0.05):與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠HO-1蛋白含量較高,但無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。7、各組大鼠胃竇平滑肌細胞凋亡情況正常對照組大鼠胃竇平滑肌組織結(jié)構(gòu)緊密排列整齊細胞凋亡較少,幾乎未見。與正常對照組相比,DGP模型組和給藥組大鼠胃竇平滑肌組織可見不同程度的結(jié)構(gòu)疏松排列紊亂等改變凋亡細胞數(shù)量明顯增多(P0.05)。與DGP模型組比較,給藥組大鼠胃竇平滑肌組織結(jié)構(gòu)有不同程度的改善凋亡細胞明顯減少(P0.05)。與枸櫞酸莫沙比利組相比,和胃湯組大鼠平滑肌凋亡細胞較少,但不具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:實驗研究表明和胃湯可顯著降低機體氧化損傷的程度,增強機體抗氧化能力,減少機體胃竇平滑肌細胞的凋亡,從而改善胃排空障礙增加胃動力,這可能是其治療DGP的機制路徑之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R285.5

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本文編號：1517423