發(fā)布時間：2018-01-07 03:32

  本文關(guān)鍵詞：艾葉揮發(fā)油抗真菌活性成分和白僵蠶對大鼠紫癜性腎炎治療作用的研究　出處：《新疆醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:1)通過對艾葉提取的揮發(fā)油進(jìn)行有效成分的分離鑒定,對艾葉揮發(fā)油、桉樹腦和4-松油烯醇等的抗真菌作用進(jìn)行初步探討,為深度開發(fā)、儲存和利用艾葉提供有效的基礎(chǔ)資料。2)探索并建立HSPN大鼠模型,觀察白僵蠶對HSPN大鼠蛋白尿及腎組織病理形態(tài)的影響,探討白僵蠶對HSPN大鼠的治療作用及其可能作用機(jī)制。方法:1)采用水蒸氣蒸餾法從艾葉中提取揮發(fā)油并GC/MS分析,用薄層色譜法和硅膠柱層析法從艾葉揮發(fā)油中分離桉樹腦和4-松油烯醇,通過TLC法和GC/MS法定性鑒別,用NMR對其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行確認(rèn);用菌絲生長速率法計(jì)算艾葉揮發(fā)油及其分離的單體對疫霉、黑曲霉、粉紅聚端孢、青霉、鏈格孢的抑菌率,用二倍梯度稀釋法測定其最低抑菌濃度(MIC);ATD、SPME、超聲提取和燃燒等方法收集艾葉揮發(fā)性成分,分析艾葉不同狀態(tài)下有效成分含量變化。2)將70只SD大鼠(雄性)按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組、模型組、陽性對照組、白僵蠶低中高劑量組,每組10只。除了空白組,其他組以BSA+LPS+CC14方法造就IgA腎病模型,同時用熱性藥物灌胃造就瘀熱模型,復(fù)合成為HSPN動物模型。造模及治療結(jié)束后檢測24h尿液中的尿蛋白、尿膽素、肌酐量;光鏡下觀察腎小球系膜變化;采用間接免疫熒光法檢測腎小球IgA沉積;免疫組化法檢測腎臟組織中凋亡因子Fas、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1);TUNEL末端標(biāo)記法檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1)艾葉揮發(fā)油(得油率0.65%)GC/MS分析總檢測出30種化合物,其中有效成分桉樹腦和4-松油烯醇百分含量分別為22.71%和7.34%。分離提純后,TLC法和GC/MS分析樣品和對照品,Rf值和保留時間基本一致,NMR確定桉樹腦和4-松油烯醇的分子結(jié)構(gòu);艾葉揮發(fā)油對5種真菌抑菌率范圍15.2%~74.5%,桉樹腦對5種真菌抑菌率范圍25.6%~69.4%,4-松油烯醇對物種真菌抑菌率范圍18.2%~72.9%,對疫霉和黑曲霉抑菌效果較好。艾葉揮發(fā)油對疫霉、黑曲霉、粉紅聚端孢、青霉的MIC為50μl.ml-1,對鏈格孢M(jìn)IC為100μl.ml-1。桉樹腦對5種真菌的MIC均50μl.ml-1。4-松油烯醇對5種真菌的MIC均40μl.ml-1;ATD、SPME法收集艾葉不做處理的揮發(fā)性成分,均含有桉樹腦和4-松油烯醇成分,艾葉超聲波提取的揮發(fā)油、燃燒煙氣,均含有桉樹腦成分,卻檢測不到4-松油烯醇。2)模型組24h尿蛋白量均顯著高于空白組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),病理結(jié)果提示造模后腎組織腎小球系膜明顯增生,腎小管腫脹,腎小球上有IgA沉積,說明造模有效;給藥6周后,與模型組相比較,白僵蠶各劑量組大鼠24h尿蛋白,尿膽素,尿肌酐含量降低,均有顯著性差異(P0.01);HE染色和PAS染色結(jié)果,白僵蠶中、高劑量組腎小球系膜細(xì)胞輕度增生,系膜區(qū)輕度增寬,管腔無擠壓現(xiàn)象,較模型組明顯改善;免疫組化檢測在模型組大鼠腎組織中Fas和TGF-β1表達(dá),前者表達(dá)減弱,后者表達(dá)增強(qiáng);TUNEL末端標(biāo)記法檢測細(xì)胞凋亡,模型組抑制凋亡。結(jié)論:1)艾葉揮發(fā)油、桉樹腦、4-松油烯醇對5種真菌均有抗菌活性,隨濃度的增加抗菌活性增加。自然狀態(tài)下、溶劑提取和燃燒時艾葉均含有桉樹腦,艾葉加工成艾絨、艾枝其揮發(fā)性成分變化,這為艾葉儲存及更廣泛應(yīng)用于實(shí)際提供理論依據(jù)。2)白僵蠶能改善HSPN模型大鼠腎臟的病理變化,減輕蛋白尿,尿肌酐,改善腎組織炎癥反應(yīng)癥狀,其作用機(jī)制可能與抑制腎臟組織中Fas及TGF-β1表達(dá)和細(xì)胞凋亡有關(guān)。
[Abstract]:Objective : To study the antifungal effect of volatile oil extracted from Folium Artemisiae Argyi by extracting volatile oil from Folium Artemisiae Argyi by means of TLC and GC / MS . The results showed that the MIC of 5 kinds of fungi was 50 渭l 路 ml ~ ( -1 ) . The MIC of 4 - terpineol on 5 kinds of fungi was significantly higher than that in blank group ( P0.01 ) . 4 - terpineol has antibacterial activity on 5 fungi , and the antibacterial activity increases with increasing concentration . Under the natural state , the leaves of Folium Eucalypti and Folium Artemisiae Argyi both contain eucalyptol and Folium Artemisiae Argyi are processed into moxa , and the volatile components thereof are changed .

【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284;R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1390817