表皮囊腫與HPV感染相關(guān)性研究
發(fā)布時間:2018-01-06 08:10
本文關(guān)鍵詞:表皮囊腫與HPV感染相關(guān)性研究 出處:《山東大學》2017年碩士論文 論文類型:學位論文
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【摘要】:研究背景:目前認為表皮囊腫起源于破壞的毛囊結(jié)構(gòu)或外傷植入性上皮,未發(fā)炎時通常無癥狀,繼發(fā)感染可引起疼痛等不適,極少數(shù)損害可發(fā)生鱗狀細胞癌或基底細胞癌。臨床工作中我們發(fā)現(xiàn)部分表皮囊腫的HE切片中可以見到近腔側(cè)面的囊壁細胞內(nèi)透明角質(zhì)顆粒明顯增多、粗大,有空泡樣細胞及大而圓的角化不全細胞核等HPV感染的組織學特點,由此猜測HPV感染可能與表皮囊腫的形成有關(guān)。文獻檢索發(fā)現(xiàn)有許多關(guān)于HPV57、60與掌跖部位表皮囊腫形成有關(guān)的報道。我們發(fā)現(xiàn)具有HPV感染組織學特征的表皮囊腫均為非掌跖部位,由此推測非掌跖部位的表皮囊腫可能也與HPV感染有關(guān)。人類乳頭瘤病毒(HPV)是一類侵犯人類皮膚和粘膜的無包膜的雙鏈DNA病毒。目前已經(jīng)鑒定了 170多種人類乳頭瘤病毒,已證實其感染可引起多種疾病,包括疣、疣狀表皮發(fā)育不良、鮑溫樣丘疹病、尖銳濕疣及多種良、惡性腫瘤,如脂溢性角化病、日光性角化病、鱗狀細胞癌、基底細胞癌、宮頸癌、卵巢腫瘤等。HPV主要分為皮膚型、粘膜型,該病毒容易感染皮膚和黏膜的上皮,可以通過微小損傷侵入上皮,潛伏于上皮的基底層細胞,待時機成熟后進入角質(zhì)形成細胞的細胞核內(nèi)進行增殖,形成空泡樣細胞,該細胞在診斷HPV感染時具有重要的意義。目前用于檢測HPV的方法很多,免疫組織化學法、原位雜交法、PCR等檢測方法相對靈敏,可以檢測出低水平的病毒感染量。實驗?zāi)康?(1)檢測表皮囊腫中HPV的存在情況及其相關(guān)分型;(2)擴展HPV感染引起的疾病譜;(3)探討HPV感染是否與表皮囊腫的發(fā)生有關(guān),進一步明確表皮囊腫的形成原因及HPV感染引起多種疾病的機制。材料與方法:(1)收集山東省立醫(yī)院皮膚科門診經(jīng)臨床及組織病理確診為表皮囊腫的樣本57例(其中8例同時留取新鮮組織)、正常皮膚30例為對照組。(2)所有標本進行免疫組織化學染色觀察HPV感染的情況。(3)通過石蠟組織塊及新鮮組織DNA提取試劑盒提取DNA,PCR引物設(shè)計來源于文獻原文,對PCR擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳分析及利用人乳頭瘤病毒核酸分型檢測試劑盒對本次實驗所提取的DNA進行HPV分型檢測,分析表皮囊腫中HPV的感染率及HPV亞型。(4)統(tǒng)計所得數(shù)據(jù),用SPSS22.0軟件進行統(tǒng)計學分析,計算出P值。實驗結(jié)果:(1)免疫組織化學(IHC)結(jié)果示:57例表皮囊腫的石蠟組織切片中無空泡樣細胞的32例樣本IHC陰性,25例有空泡樣細胞的樣本中2例強陽性(+++),4例中度陽性(++),5例弱陽性(+)。陽性病例中囊壁細胞出現(xiàn)典型細胞核著色的陽性細胞主要分布在棘層,少數(shù)分布在顆粒層。11例IHC陽性的病例中9例位于頭面部,2例位于軀干部,病例組HPV總陽性率為21%(11/57),占有空泡細胞等HPV感染特征的病例44%(11/25),而正常對照皮膚呈陰性,病例組與對照組比較差別具有顯著性(P0.05)。(2)聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR):57例表皮囊腫組織中有1例出現(xiàn)HPV 1、2、3、4、7、10、57DNA陽性,但是條帶欠佳,余表皮囊腫及正常對照組皮膚呈陰性。HPV 核酸分型檢測試劑盒包括 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、6、11、42、43、44、53、81、73、82 共 23 個分型,所有樣本在熒光PCR儀上顯示結(jié)果均為陰性。具有HPV感染組織學特點的表皮囊腫病例組與對照組比較差別無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:HPV感染與非掌跖部位的表皮囊腫的發(fā)生可能具有相關(guān)性,具體分型有待進一步求證。PCR及IHC對該實驗樣本可能不敏感。
[Abstract]:In this paper , we have found that there are many kinds of diseases , such as wart , verrucous epidermal dysplasia , cell carcinoma of basal cell , cervical cancer , ovarian tumor , etc . ( 3 ) DNA was extracted by paraffin block and fresh tissue DNA extraction kit . The PCR primers were analyzed by agarose gel electrophoresis and human papillomavirus nucleic acid typing test kit .
【學位授予單位】:山東大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R752
【參考文獻】
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,本文編號:1387011
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