太歲的抑菌作用及對(duì)小鼠免疫功能影響的研究
本文關(guān)鍵詞:太歲的抑菌作用及對(duì)小鼠免疫功能影響的研究 出處:《西南交通大學(xué)》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
更多相關(guān)文章: 抑菌 太歲 免疫調(diào)節(jié) LPS(脂多糖) 小鼠 巨噬細(xì)胞RAW264.7
【摘要】:目的:對(duì)太歲進(jìn)行菌種分離和分子鑒定,探索太歲的組成成分;觀察太歲及其分離菌株發(fā)酵液的抑菌效果;探討太歲對(duì)免疫低下小鼠的免疫功能,以及對(duì)體外培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞RAW264.7的影響。方法:對(duì)太歲中的菌株進(jìn)行分離純化,提取所純化的太歲分離菌株的基因組DNA,以之為模板,用16SrRNA、18SrRNA和TIS序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增,通過(guò)序列對(duì)比對(duì)太歲菌種進(jìn)行分子鑒定;觀察太歲及其分離菌株發(fā)酵液的抑菌作用。用環(huán)磷酰胺制備免疫低下小鼠模型,太歲溶液灌胃后,通過(guò)體征觀察,臟器指數(shù)測(cè)定;用ELISA檢測(cè)血清IL-2;用CCK-8檢測(cè)淋巴細(xì)胞增值;用SRBC溶血實(shí)驗(yàn)測(cè)定抗體形成細(xì)胞數(shù)量;用中性紅檢測(cè)巨噬細(xì)胞吞噬能力,觀察太歲對(duì)免疫低下小鼠的免疫功能影響。用不同終濃度太歲處理靜息和被LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞RAW264.7,CCK-8測(cè)定細(xì)胞的活性,用中性紅測(cè)定細(xì)胞吞噬能力;用ELISA試劑盒測(cè)定細(xì)胞分泌的NO、IL-1、IL-12,觀察太歲對(duì)巨噬細(xì)胞RAW264.7的影響。結(jié)果:從太歲中分離純化出了三個(gè)菌株,通過(guò)鑒定,一種是真菌Pseudeurotium ovale(假散囊菌屬),另外兩個(gè)是細(xì)菌分別是BetaproteobacteriumMBIC3293(β變形菌屬),bacterium YC-ZS S-LK J183(微小桿菌屬)。太歲及這三個(gè)菌株的發(fā)酵液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制作用不明顯。在免疫低下小鼠實(shí)驗(yàn)中,模型組脾臟指數(shù)、T淋巴細(xì)胞增值、抗體形成細(xì)胞數(shù)量及巨噬細(xì)胞吞噬能力降低;與模型組比較,太歲組脾臟指數(shù)、T淋巴細(xì)胞增值、抗體形成細(xì)胞數(shù)量及巨噬細(xì)胞吞噬能力升高。用不同終濃度太歲作用于靜息的巨噬細(xì)胞RAW264.7,能夠促進(jìn)其分泌NO、IL-1、IL-12,促進(jìn)其吞噬能力;LPS誘導(dǎo)后,太歲能抑制細(xì)胞分泌NO、IL-1、IL-12,抑制其吞噬能力。結(jié)論:太歲是一種復(fù)雜的生命體,其中包含有真菌Pseudeurotiumovale(假散囊菌屬)、細(xì)菌Beta proteobacterium MBIC3293(β 變形菌屬)和 bacterium YC-ZS S-LK J183(微小桿菌屬)。本研究是第一次從太歲中分得這三個(gè)菌株。太歲及以上三個(gè)菌株的發(fā)酵液對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌無(wú)明顯抑制作用。太歲能夠提高免疫低下小鼠的細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能和非特異性免疫功能。太歲對(duì)巨噬細(xì)胞RAW264.7有明顯的激活作用,同時(shí)能降低LPS對(duì)RAW264.7刺激作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R285.5
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1352801
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