本文關(guān)鍵詞：降膽固醇乳酸菌的篩選及其對高脂飲食小鼠的影響　出處：《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：近年來隨著人們生活水平的不斷提高和日常飲食結(jié)構(gòu)的改變,膽固醇攝入過高已經(jīng)導(dǎo)致了種種健康問題,例如心腦血管疾病,因此降低人體中的膽固醇含量對人類的健康非常重要。本研究的主要內(nèi)容是從泡菜、酸奶、發(fā)酵香腸等傳統(tǒng)發(fā)酵食品中分離純化出多株乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB),并通過體外降膽固醇實驗進行篩選,挑選出其中降膽固醇效果較好的幾株菌進行酸耐受性、膽鹽耐受性以及細胞吸附能力的測定,并從中篩選出一株綜合性能較好的菌株作為目標菌株。然后,對目標菌株進行形態(tài)學(xué)、生理生化及遺傳學(xué)鑒定,并檢測目標菌株對高脂飲食小鼠的影響,為菌株的進一步開發(fā)應(yīng)用奠定科學(xué)的理論基礎(chǔ)。實驗結(jié)果如下:(1)利用梯度稀釋、平板劃線等方法從樣品中分離純化得到具有產(chǎn)酸能力、革蘭氏陽性和過氧化氫酶陰性的79株乳酸菌菌株。(2)體外降膽固醇能力的測定。將活化的各菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)基(MRS-CHO,含100μg/m L膽固醇、0.2%膽鹽、0.1%巰基乙酸鈉)中厭氧培養(yǎng),利用鄰苯二甲醛方法測定上清液中膽固醇的含量,計算膽固醇的去除率。篩選結(jié)果顯示菌株LPN5、LP130、LP96、LPZ、LPB、LP37、LP157、LP183、LPN21和LP192B具有較強的降膽固醇能力,這10株菌株通過16S rDNA序列分析進行了初步鑒定,其中菌株LPN5、LP130、LP96、LPZ和LPB屬于植物乳桿菌,LP37、LP157、LP183、LPN21和LP192B屬于戊糖片球菌。(3)酸耐受性、膽鹽耐受性以及細胞吸附能力的測定。將活化后的菌株分別接種到含有0.1%、0.2%、0.3%膽鹽的MRS培養(yǎng)基和pH3.0的MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)3h,計算菌株的存活率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)這十株菌對酸(pH3.0)的耐受性都較好(存活率在80%以上);菌株LP96和LP157對膽鹽的耐受性最高,在含有0.3%膽鹽的培養(yǎng)基中存活率分別為25.07%、25.36%;菌株LP37、LPN21、LP96對細胞的吸附能力較強,在每個細胞上平均吸附的菌體數(shù)分別為145.67、140.26、73.21。綜合分析以上結(jié)果,菌株LP96的綜合性質(zhì)比較好,被選作目標菌株進行下一步的實驗。(4)目標菌株的鑒定。通過進行形態(tài)學(xué)、生理生化和遺傳學(xué)鑒定,目標菌株LP96被鑒定為植物乳桿菌。(5)菌株LP96體外降膽固醇機制的初步研究。將不同狀態(tài)下的LP96菌體進行降膽固醇主要作用的分析,研究不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)的LP96對超聲波的抗性,結(jié)果表明不同狀態(tài)下的菌體降膽固醇的機制不同,培養(yǎng)基中的膽固醇可以提高菌體對超聲波的抗性。(6)目標菌株對高脂飲食小鼠的影響。將菌株LP96活化后,制成不同濃度的菌懸液,每天按照小鼠的分組進行處理。實驗進行6周,實驗中每周稱量小鼠體重。在實驗的最后一天,小鼠禁食12h后被處死,收集血液、肝臟、腎臟、脾臟和盲腸里的新鮮糞便等樣品。將樣品收集處理后,測定各個樣品的指標:血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、過氧化氫酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)的含量,肝組織的TC、TG的含量,新鮮糞便里的大腸桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌的活菌數(shù)。實驗結(jié)果表明菌株LP96可以降低血清中TG、TC和LDL-C的含量,可以有效降低肝臟的TG、TC含量,可以有效提高血液的抗氧化能力,提高腸道維持菌群平衡的能力。(7)目標菌株的發(fā)酵性能測定。測定菌株LP96在脫脂乳中的酸度、pH、活菌數(shù)和蛋白質(zhì)降解能力的變化情況,結(jié)果表明LP96在脫脂乳中具有發(fā)酵潛能。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R371

【參考文獻】

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1 劉長建;姜波;安曉雯;趙軼男;劉秋;;菠菜中降膽固醇乳酸菌的篩選及鑒定[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報;2010年06期

2 孫敦毅;劉學(xué)威;;ABCA_1在膽固醇代謝和動脈粥樣硬化中的作用[J];基層醫(yī)學(xué)論壇;2010年07期

3 趙龍飛;;乳酸菌的保健功能及其在食品中的應(yīng)用研究[J];中國調(diào)味品;2009年06期

4 呂嘉櫪;齊文華;;乳酸菌的生理功能及在食品釀造工業(yè)中的應(yīng)用[J];食品科技;2007年10期

5 張董燕;季海峰;徐煒玲;;益生菌對動物腸道微生物生態(tài)學(xué)影響的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2007年03期

6 郭松年,田淑梅,白洪濤;乳酸菌及乳酸菌發(fā)酵食品[J];糧食與食品工業(yè);2005年01期

7 趙玲艷,鄧放明,楊撫林;乳酸菌的生理功能及其在發(fā)酵果蔬中的應(yīng)用[J];中國食品添加劑;2004年05期

8 尹軍霞,林德榮;腸道菌群與疾病[J];生物學(xué)通報;2004年03期

9 袁靜,李元端,劉變芳,田曉琴;乳酸菌的細菌素及乳鏈菌肽在食品工業(yè)中的發(fā)酵與應(yīng)用[J];哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年05期

10 李鐵軍,李愛云,張曉峰;乳酸菌抗菌機理研究進展[J];微生物學(xué)通報;2002年05期

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1 胡德榮;;我國發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)膽固醇代謝的新機制[N];中國醫(yī)藥報;2007年

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本文編號：1321271