本文關(guān)鍵詞：基于木犀草素抗肥胖及相關(guān)胰島素抵抗的細(xì)胞分化和探針合成研究

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【摘要】：肥胖及其相關(guān)的胰島素抵抗已嚴(yán)重威脅人類健康,在其發(fā)生發(fā)展中脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的分化與互作發(fā)生著重要的作用。木犀草素作為一種食源性天然產(chǎn)物,對肥胖及相關(guān)的胰島素抵抗具有明確的改善作用,但其作用的細(xì)節(jié)機(jī)制尚不清楚。因此,我們首先研究木犀草素對3T3-L1前脂肪細(xì)胞和骨髓衍生的巨噬細(xì)胞(BMDMs)成脂分化和炎性極化的影響,明確影響的最佳條件,再合成生物素標(biāo)記的木犀草素分子探針,以期為進(jìn)一步的靶標(biāo)和信號通路研究打下基礎(chǔ)。3T3-L1前脂肪細(xì)胞成脂分化過程共需8天,用20μM木犀草素細(xì)胞2、4、6、8天文章證明了木犀草素從細(xì)胞分化開始處理8天可以顯著降低脂滴生成及分化相關(guān)基因PPARγ、C/EBPα、AP2和FAS的表達(dá)。處理2、4、6天對脂滴生成影響不明顯,但可以顯著抑制分化相關(guān)因子表達(dá),說明木犀草素在3T3-L1細(xì)胞的前期分化和后期成熟過程都發(fā)揮了重要作用。骨髓細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞過程共需要6天,流式結(jié)果顯示,用20μM木犀草素處理細(xì)胞24小時、24小時+3天、24小時+6天都能顯著降低M1型細(xì)胞表面標(biāo)記物CD38和CD274的熒光強(qiáng)度。與流式結(jié)果相一致,定量PCR結(jié)果顯示,木犀草素處理細(xì)胞6小時、6小時+3天、6小時+6天都可以顯著降低NOS2、IL-6和IL-1β的基因表達(dá)。用木犀草素在細(xì)胞分化或極化的不同階段處理細(xì)胞都有降低炎性的作用,說明木犀草素在BMDMs的分化及極化過程中都發(fā)揮了重要作用。在此基礎(chǔ)上,我們通過化學(xué)方法合成了3’-生物素化木犀草素分子探針。通過檢測探針對上述兩種細(xì)胞最佳分化條件的影響作用,確定所合成的分子探針相比木犀草素對脂肪細(xì)胞成脂分化的抑制活性較弱,但對BMDMs炎性極化具有相似的抑制活性,因此可用于研究木犀草素抑制BMDMs炎性極化的細(xì)節(jié)信號機(jī)制。綜上所述,我們基于木犀草素改善肥胖及相關(guān)胰島素抵抗作用,明確了其抑制相關(guān)細(xì)胞分化的最佳條件,并合成了能用于其BMDMs炎性極化抑制機(jī)制研究的生物素化分子探針。
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R151

【參考文獻(xiàn)】

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2 Juan Antonio Paniagua;;Nutrition, insulin resistance and dysfunctional adipose tissue determine the different components of metabolic syndrome[J];World Journal of Diabetes;2016年19期

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本文編號：1295189