本文關(guān)鍵詞：熊果酸和山奈酚對(duì)UVB損傷HaCaT細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制研究

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【摘要】：目的:研究十精丸中山茱萸和菟絲子的活性成分熊果酸和山奈酚對(duì)紫外線(UVB)損傷人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)的保護(hù)作用,探討熊果酸和山奈酚對(duì)UVB損傷HaCaT細(xì)胞TNF-α、IL-6相關(guān)炎癥因子以及JNK、P-JNK、AKT、P-AKT信號(hào)通路的影響與調(diào)控機(jī)制,為十精丸防治皮膚光老化提供理論依據(jù)。方法:1.選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HaCaT細(xì)胞,用劑量為60mJ·cm-2的UVB輻射,建立光老化HaCaT模型。2.用MTT法檢測(cè)HaCaT細(xì)胞的增殖率,篩選藥物的安全濃度與有效濃度。3.篩選濃度后用10-1mol·L~(-1)的熊果酸和10-10mol·L~(-1)的山奈酚處理光老化HaCaT細(xì)胞24h,檢測(cè)細(xì)胞中SOD活性及MDA含量;蛋白免疫印跡法(Western Blot)檢測(cè)細(xì)胞中TNF-α、IL-6、AKT、P-AKT、JNK、P-JNK等相關(guān)指標(biāo)的蛋白表達(dá)量。結(jié)果:1.倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài),正常HaCaT細(xì)胞緊湊排列,邊界清晰,而光老化HaCaT細(xì)胞間隙變大,形狀不規(guī)則,邊界模糊;2.MTT結(jié)果顯示:當(dāng)熊果酸濃度高于10-12mol·L~(-1)、山奈酚濃度高于l0-8mol·L~(-1)時(shí)會(huì)明顯抑制正常HaCaT的增殖(P0.01或P0.05),而在安全濃度范圍內(nèi),以濃度為10-14mol·L~(-1)的熊果酸和濃度為10-10mol·L~(-1)的山奈酚對(duì)光老化HaCaT的保護(hù)作用最明顯(P0.01)。3.與空白組相比,模型組SOD的活性顯著降低,MDA含量顯著提高(P0.01);與模型組相比,濃度為10-14mol·L~(-1)的熊果酸和濃度為10-10mol·L~(-1)的山奈酚可以明顯提高細(xì)胞內(nèi)SOD活性,降低MDA含量(P0.01);與空白組相比,模型組TNF-α和IL-6的蛋白表達(dá)量以及P-AKT/AKT和P-JNK/JNK的比值顯著升高(P0.01);與模型組相比,經(jīng)過(guò)濃度為10-14mol·L~(-1)的熊果酸和濃度為10-10mol·L~(-1)的山奈齡預(yù)處理后的光老化HaCaT細(xì)胞TNF-α和IL-6的蛋白表達(dá)量以及P-AKT/AKT和P-JNK/JNK的比值顯著降低(P0.01)。結(jié)論:熊果酸和山奈酚能夠促進(jìn)光老化HaCaT細(xì)胞的增殖,提高細(xì)胞SOD活力,降低MDA含量,抑制TNF-α、IL-6炎癥因子的分泌同時(shí)下調(diào)磷酸化AKT和磷酸化JNK的表達(dá),抑制JNK信號(hào)通路和AKT信號(hào)通路的激活,從而有效預(yù)防皮膚光老化的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

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本文編號(hào)：1293731