發(fā)布時間：2017-12-14 21:24

  本文關鍵詞：替格瑞洛含藥血清對人胃黏膜上皮細胞GES-1的損傷作用及機制研究

  更多相關文章： 替格瑞洛 人胃黏膜上皮細胞 血清藥理學 緊密連接蛋白

【摘要】：目的:探究藥物替格瑞洛對人胃黏膜上皮細胞GES-1的損傷作用及機制。方法:體外培養(yǎng)人胃黏膜上皮細胞株GES-1,抽取一例服用替格瑞洛(180mg/d)后2h的急性冠脈綜合征(ACS)病人血液標本,將其離心后取上層血清,與高糖培養(yǎng)液DMEM混合后配置成濃度分別為5%、10%、15%、20%的替格瑞洛含藥血清,同時取該病人服用替格瑞洛前的正常血清作為對照,與人胃黏膜上皮細胞株GES-1共同培養(yǎng)24h、48h及72h,采用倒置相差顯微鏡觀察正常對照組GES-1的形態(tài)以及各個濃度藥物與GES-1細胞共同培養(yǎng)24h后的細胞形態(tài)學改變情況、噻唑藍試劑盒(MTT)測定GES-1細胞活力及增殖情況、流式細胞儀檢測各濃度組含藥血清與GES-1共培養(yǎng)24h后細胞凋亡情況,細胞免疫熒光法檢測各組細胞中Occludin、ZO-1蛋白表達,透射電鏡觀察對照組和15%含藥血清實驗組細胞緊密連接結(jié)構(gòu)的變化,蛋白免疫印跡法檢測對照組和各濃度藥物組細胞中目標蛋白Occludin及ZO-1的表達。結(jié)果:倒置相差顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)對照組GES-1細胞數(shù)量較多,鋪滿整個視野,細胞形態(tài)規(guī)則,外觀呈扁平長梭狀,而實驗組GES-1細胞數(shù)目減少,細胞外形變圓或者不規(guī)則、可見較多凋亡細胞漂浮于培養(yǎng)瓶內(nèi);MTT比色法顯示替格瑞洛含藥血清對GES-1細胞的損傷隨著濃度增加而加重,各濃度組間差異有統(tǒng)計學意義,(P0.05),而同一組細胞不同培養(yǎng)時間下的細胞增殖抑制率無統(tǒng)計學差異(P0.05);流式細胞術(shù)檢測表明,實驗組細胞凋亡率隨著藥物濃度增加而逐漸增大,各濃度組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);細胞免疫熒光法顯示實驗組細胞Occludin、ZO-1表達降低,陽性染色區(qū)面積減小,平均光密度值降低:透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)對照組GES-1細胞胞膜完整、細胞間連接結(jié)構(gòu)緊密無缺損,可見橋粒,而實驗組細胞間緊密連接結(jié)構(gòu)有缺損破壞,橋粒消失,細胞間隙增大;蛋白免疫印跡實驗發(fā)現(xiàn)實驗組緊密連接蛋白Occludin、ZO-1表達量下降。結(jié)論:替格瑞洛作用于人胃黏膜上皮細胞后可抑制其增殖并促進其凋亡,可使緊密連接蛋白Occludin及ZO-1的表達降低,從而損傷胃黏膜屏障。
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R96

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉全忠;;生長抑素的表達與胃黏膜上皮癌變的關系[J];中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志;2006年02期

2 楊宗保;鄒小平;嚴潔;;大鼠胃黏膜上皮細胞分離方法的實驗研究[J];中醫(yī)藥學刊;2006年04期

3 王茵萍,孫茂峰,吳旭;胃黏膜上皮緊密連接與實驗性胃癌前病變的關系[J];腫瘤防治雜志;2003年03期

4 張明明;賈彬;陳棟;閆慧明;;1,25-二羥維生素D3對人胃黏膜上皮細胞惡性轉(zhuǎn)化過程的影響[J];山西醫(yī)科大學學報;2013年06期

5 朱莉;靳蓉;劉文莉;王鴻娟;李惠;詹泉;全小麗;;幽門螺桿菌感染患兒胃黏膜上皮細胞動力學研究[J];實用兒科臨床雜志;2008年19期

6 吳艷萍;李京彬;楊永濱;;細胞周期調(diào)控因子在胃黏膜上皮癌變過程中的表達及意義[J];軍醫(yī)進修學院學報;2006年01期

7 丁小云,李定國,陸漢明;幽門螺桿菌感染的胃黏膜上皮細胞環(huán)氧合酶-2表達及意義[J];中華腫瘤雜志;2005年04期

8 周海波,顏云,顏世軍,朱菊人;CagA~+幽門螺桿菌與胃黏膜上皮細胞凋亡的分子研究[J];中國臨床醫(yī)學;2002年06期

9 石s，

本文編號：1289420