乳腺腫瘤小鼠的模型建立及其骨髓MDSC細(xì)胞的亞型分析
本文關(guān)鍵詞:乳腺腫瘤小鼠的模型建立及其骨髓MDSC細(xì)胞的亞型分析
更多相關(guān)文章: 髓源抑制性細(xì)胞 趨化因子 趨化因子受體 骨髓 免疫逃逸
【摘要】:乳腺癌是造成世界上女性癌癥高發(fā)病率和死亡率的惡性腫瘤之一。隨著髓源抑制性細(xì)胞(MDSCs)在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移中的作用逐漸被探明,對(duì)MDSCs細(xì)胞的研究愈加重要。但是由于MDSCs本身是異質(zhì)性的,生物學(xué)功能復(fù)雜,并且現(xiàn)有對(duì)其進(jìn)行分析鑒定的細(xì)胞表型不能明確劃定其與其它髓系來(lái)源細(xì)胞的界限,如腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAM)、腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞(TAN)等具有類似抑制功能的細(xì)胞以及粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突細(xì)胞等。因此,限制了對(duì)其發(fā)揮分子作用機(jī)制的深入研究。目的:分析4T1細(xì)胞系表面趨化因子受體的表達(dá),并對(duì)移植小鼠骨髓MDSCs細(xì)胞表面的趨化因子受體和Toll樣受體(TLR)進(jìn)行分析,建立4T1細(xì)胞移植小鼠的骨髓MDSCs細(xì)胞亞型的趨化因子受體及Toll樣受體表面分子的標(biāo)記圖譜,為進(jìn)一步分析、研究各不同亞型的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:利用原位移植法構(gòu)建4T1移植小鼠模型,采用流式細(xì)胞技術(shù)分析4T1細(xì)胞系表面趨化因子受體的表達(dá),采用流式細(xì)胞技術(shù)對(duì)移植腫瘤前后小鼠骨髓MDSCs細(xì)胞表面的趨化因子受體和Toll樣受體進(jìn)行分析,多色流式分析法對(duì)小鼠骨髓MDSCs細(xì)胞亞型進(jìn)行進(jìn)一步分析。結(jié)果:建立了 4T1細(xì)胞小鼠移植腫瘤重建模型,并獲得了腫瘤重建過程中小鼠腫瘤發(fā)育的時(shí)間曲線;通過對(duì)4T1細(xì)胞系表面趨化因子受體的表達(dá)分析,顯示4T1細(xì)胞表面在CCR1、CCR5、CCR7、CCR9、CXCR7這五種趨化因子的陽(yáng)性表達(dá)率均在25%以上,而其他趨化因子受體表達(dá)率極低,幾乎不表達(dá)。通過小鼠骨髓MDSCs細(xì)胞表面的趨化因子受體和Toll樣受體進(jìn)行分析。根據(jù)初步分析得到的結(jié)果,挑選出了 CCR2、CXCR2、CXCR4、CXCR6、CX3CR1對(duì)獲得的骨髓細(xì)胞進(jìn)一步進(jìn)行多色(8色)流式細(xì)胞分析骨髓MDSC細(xì)胞亞型進(jìn)行進(jìn)一步分析;CCR2、CXCR2、CXCR4、CXCR6、CX3CR1與其他七色抗體共同孵育進(jìn)一步分析骨髓MDSC細(xì)胞亞型,確定了 30種不同的骨髓細(xì)胞亞型。結(jié)論:利用原位移植4T1細(xì)胞的方法,成功建立了轉(zhuǎn)移性小鼠乳腺癌模型,利用流式細(xì)胞分析術(shù),成功分析了 4T1細(xì)胞系表面趨化因子受體表達(dá),成功對(duì)小鼠骨髓MDSCs細(xì)胞表面的趨化因子受體和Toll樣受體進(jìn)行了分析,對(duì)骨髓MDSC細(xì)胞亞型進(jìn)行了多色分析,進(jìn)行了初步分型。通過這一系列試驗(yàn),我們可以更清楚的得出腫瘤以及免疫細(xì)胞的遷移動(dòng)向,為揭開乳腺癌細(xì)胞腫瘤逃逸的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了依據(jù),同時(shí)為臨床乳腺腫瘤治療的靶點(diǎn)的選擇提供了思路。
【學(xué)位授予單位】:沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R737.9;R-332
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,本文編號(hào):1286030
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