發(fā)布時間：2017-12-12 08:06

  本文關鍵詞：苦參堿對肝癌HepG-2細胞增殖和遷移的影響及分子機制研究

  更多相關文章： 肝癌細胞 苦參堿 細胞遷移 細胞凋亡 上皮-間質(zhì)轉化 Ezrin

【摘要】：目的:探討苦參堿(matrine,MAT)對肝癌細胞株HepG-2的增殖與遷移的影響及其分子機制。方法:不同濃度的MAT處理肝癌HepG-2細胞,1.MTT法檢測MAT對HepG-2細胞的增殖的影響;2.平板克隆實驗檢測MAT對HepG-2細胞集落形成能力的影響;3.劃痕愈合實驗和Transwell小室實驗檢測MAT對HepG-2細胞遷移能力的影響;4.Hoechst 33342染色實驗探討MAT對HepG-2細胞凋亡的影響;5.Western blot實驗檢測Bax、Bcl-2凋亡相關蛋白,Ezrin、p-Ezrin,上皮-間質(zhì)轉化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)標志物 E-cadherin、Vimentin和Snail蛋白的表達,探討MAT抑制HepG-2細胞增殖和遷移的作用及分子機制。結果:1.HepG-2細胞經(jīng)0.25、0.5、1.0、1.5和2.0mg/ml的MAT處理后其增殖能力與對照組相比顯著降低,并呈劑量和時間依賴性(P0.01);2.平板克隆實驗結果顯示,0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT顯著抑制HepG-2細胞的集落形成,呈劑量依賴性(P0.01);3.Hoechst33342染色實驗結果顯示,與對照組相比0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT處理后HepG-2細胞的藍色凋亡小體明顯增多,并呈劑量依賴性(P0.05或P0.01);4.劃痕愈合實驗及Transwell小室實驗結果顯示,0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT可顯著抑制HepG-2細胞的橫向和縱向的遷移能力,并呈劑量依賴性(P0.01);5.Western blot檢測結果顯示,0.5、1.0和1.5mg/ml的MAT處理可明顯上調(diào)Bax/Bcl-2比值(P0.01)和上皮標記物E-cadherin蛋白的表達(P0.01),下調(diào)Ezrin、p-Ezrin(P0.05或P0.01)和間質(zhì)標記物Vimentin、snail蛋白(P0.05或P0.01)的表達。結論:1.MAT抑制了肝癌HepG-2細胞的增殖和平板克隆形成,其機制可能與其誘導HepG-2細胞的凋亡相關;2.MAT抑制HepG-2細胞的橫向和縱向遷移,機制可能與MAT通過調(diào)控Ezrin和EMT相關蛋白表達,逆轉EMT的發(fā)生相關。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R735.7

【參考文獻】

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本文編號：1281753