本文關(guān)鍵詞：印度獐牙菜抗肝纖維化作用及物質(zhì)基礎(chǔ)初步研究

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【摘要】：肝纖維化是肝臟對(duì)各種慢性肝損傷的代償反應(yīng)所形成的肝臟瘢痕組織,主要表現(xiàn)為肝內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)成分(ECM)過度異常地沉積進(jìn)而形成纖維化。肝纖維化是慢性肝病進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化乃至肝癌的重要病理過程,極大地威脅著人類健康。近年來,國(guó)內(nèi)外學(xué)者不斷探索治療肝纖維化的方法和措施,但因其發(fā)生發(fā)展機(jī)制的復(fù)雜性,并且作用環(huán)節(jié)較多,致使臨床治療仍處在摸索階段,迄今仍缺乏針對(duì)性強(qiáng)、療效顯著、毒副作用小的藥物。藏藥是祖國(guó)醫(yī)藥的寶貴財(cái)富,在肝臟疾病的治療上有著獨(dú)特的效果,治療肝病歷史悠久,具有多成分、多途徑、多靶點(diǎn)協(xié)同作用的優(yōu)勢(shì)。但長(zhǎng)期以來對(duì)其研究遠(yuǎn)滯后于中藥,因此加大藏藥的基礎(chǔ)研究,從中挖掘具有較好活性的抗肝纖維化藥物具有重要意義。印度牙菜,藏藥名"甲蒂",為龍膽科植物印度獐牙菜Swertiachirayita(Roxb.ex Flemi)Karsten的干燥全草,具有清肝利膽,退諸熱之功效,用于黃疸型肝炎,病毒性肝炎以及血熱癥。該藥臨床應(yīng)用歷史悠久,是治療肝臟疾病的"蒂達(dá)"上品,亦是課題組獲得二期臨床批件的抗肝纖維化新藥"郎慶阿塔顆粒"中的一味主要藥味,然而其是否具有抗肝纖維化活性有待進(jìn)一步研究,藥效物質(zhì)基礎(chǔ)有待進(jìn)一步闡明。因此,本課題對(duì)印度獐牙菜體內(nèi)、體外抗肝纖維化活性進(jìn)行了初步研究;運(yùn)用代謝組學(xué)的研究方法對(duì)其抗肝纖維化可能的作用機(jī)制進(jìn)行了探討;運(yùn)用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行了分析,初步闡明了物質(zhì)基礎(chǔ),以希望為發(fā)掘抗肝纖維化的藥物提供新途徑。具體研究?jī)?nèi)容主要包括以下5個(gè)部分:1、文獻(xiàn)研究本課題對(duì)肝纖維化的發(fā)生機(jī)制和中藥治療肝纖維化的研究進(jìn)展進(jìn)行了剖析;對(duì)代謝組學(xué)的研究進(jìn)展進(jìn)行了綜合分析;對(duì)印度獐牙菜化學(xué)成分的理化性質(zhì)、藥效等方面的基礎(chǔ)研究?jī)?nèi)容進(jìn)行了歸納、總結(jié)。2、印度獐牙菜體內(nèi)抗肝纖維化作用研究為考察印度獐牙菜對(duì)肝纖維化的防治作用,本實(shí)驗(yàn)采用40%CCl4/橄欖油溶液以2 mL·kg-1的劑量腹腔注射,誘導(dǎo)SD大鼠肝纖維化模型。造模當(dāng)天開始,給藥組灌胃印度獐牙菜不同部位提取藥物,模型對(duì)照組與空白對(duì)照組分別灌胃等體積的生理鹽水,每天1次,共8周。采用MASSON染色法觀察肝組織病理學(xué)變化;采用ELISA法測(cè)定血清中肝纖維化指標(biāo)透明質(zhì)酸(HA)、層粘連蛋白(LN)、三型前膠原(PCⅢ)和Ⅳ型膠原蛋白(ColⅣ)水平;采用酶法等測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)等肝功能指標(biāo)。結(jié)果表明大鼠肝纖維化模型造模成功(P0.05),印度獐牙菜各提取物組均可顯著降低CCl4致肝纖維化大鼠血清ALT、AST、ALP活性,減少HA、CIV、LN及PCⅢ含量(P0.05),明顯改善肝臟組織病變的狀況,減輕肝纖維組織增生、肝細(xì)胞脂肪變性,顯示印度獐牙菜有較好的防治肝纖維化作用。3、印度獐牙菜體外抗肝纖維化作用研究四氮唑藍(lán)實(shí)驗(yàn)(MTT)法觀察印度獐牙菜對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明印度獐牙菜醇提物和各提取部位組均能抑制HSC細(xì)胞的增殖,隨著給藥濃度的增高,抑制HSC增殖作用增強(qiáng),呈現(xiàn)出一定的濃度依賴性。體外抗肝纖維化的實(shí)驗(yàn)表明印度獐牙菜具有抗肝纖維化的作用。4、印度獐牙菜抗肝纖維化血清代謝組學(xué)研究運(yùn)用代謝組學(xué)方法研究肝纖維化大鼠血清代謝產(chǎn)物的變化。研究中運(yùn)用超高效液相色譜-電噴霧四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(UPLC-Q-TOF-MS)技術(shù)對(duì)正常組、肝纖維化模型組、印度獐牙菜給藥組大鼠血清進(jìn)行代謝圖譜的鑒定分析,運(yùn)用主成分分析(PCA)及偏最小二乘法—判別分析(PLS-DA)等多變量數(shù)據(jù)分析方法,尋找出模型組和對(duì)照組之間內(nèi)源性標(biāo)志物17個(gè),涉及到色氨酸代謝、膽汁酸代謝等8個(gè)代謝途徑,初步表明印度獐牙菜抗肝纖維化的作用機(jī)制與參與上述代謝途徑有關(guān)。5、印度獐牙菜化學(xué)成分UPLC-Q-TOF-MS分析運(yùn)用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)對(duì)藏藥印度獐牙菜的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析,色譜條件為色譜柱:ACQUITY HSST3(2.1 mm × 100 mm,1.8 μm),流動(dòng)相:含 0.1%甲酸的乙腈-0.1%甲酸溶液按程序梯度洗脫,流速:0.4 mL/min。質(zhì)譜使用ESI離子源,正負(fù)離子模式掃描,通過精確質(zhì)譜信息及元素組成分析,結(jié)合Scifinder數(shù)據(jù)庫(kù)、對(duì)照品信息和相關(guān)文獻(xiàn),鑒定出印度獐牙菜化學(xué)成分24個(gè),包括6個(gè)環(huán)烯醚萜、11個(gè)(?)酮、2個(gè)黃酮、2個(gè)異香豆素、2個(gè)酚類及1個(gè)三萜。總之,通過以上5個(gè)方面的系統(tǒng)研究,本課題從體內(nèi)外證實(shí)了印度獐牙菜具有較好的抗肝纖維化作用,明確了其抗肝纖維化的代謝組學(xué)機(jī)制,初步揭示了其物質(zhì)基礎(chǔ),為印度獐牙的深度開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù),為抗肝纖維化藥物的發(fā)掘提供了新途徑。
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R29

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1 孫雁;許鐵峰;;印度獐牙菜根培養(yǎng)物中苦杏苷的產(chǎn)生[J];國(guó)外醫(yī)藥(植物藥分冊(cè));2001年04期

2 施峰;黃一平;孫忠文;;藏藥印度獐牙菜的研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥房;2010年19期

3 孫忠文;劉漢清;黃一平;鞠建明;;藏藥印度獐牙菜的研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐;2010年02期

4 靳有才;魏立新;林蓉香;杜玉枝;;印度獐牙菜化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J];中國(guó)生化藥物雜志;2010年06期

5 孫磊;徐紀(jì)民;田金改;金紅宇;林瑞超;;印度獐牙菜的生藥研究[J];中藥材;2011年01期

6 蔡樂;王曙;李濤;夏宇江;;印度獐牙菜的化學(xué)成分研究[J];華西藥學(xué)雜志;2006年02期

7 ;印度獐牙菜中的苦杏甙—杜氏利什曼原蟲的拓樸異構(gòu)酶Ⅰ抑制劑[J];國(guó)外醫(yī)藥(植物藥分冊(cè));1996年05期

8 ;印度獐牙菜對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝損害的抗肝毒活性研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(中醫(yī)中藥分冊(cè));2000年04期

9 孫亞捷;李向東;胡芳弟;封士蘭;史高峰;;HPLC法測(cè)定印度獐牙菜中兩種黃酮類成分的含量[J];蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2005年04期

10 孫磊;田金改;金紅宇;林瑞超;;HPLC法測(cè)定印度獐牙菜中5種有效成分含量[J];中國(guó)藥事;2010年07期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 鄺婷婷;蒲友明;張藝;;印度獐牙菜-綜述[A];2007年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第八屆中藥鑒定學(xué)術(shù)研討會(huì)、2007年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)中藥專業(yè)委員會(huì)全國(guó)中藥學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

2 蒲友明;張藝;古銳;劉輝;鄺婷婷;多吉;;藏藥“蒂達(dá)”研究概況[A];2007年中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第八屆中藥鑒定學(xué)術(shù)研討會(huì)、2007年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)中藥專業(yè)委員會(huì)全國(guó)中藥學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 顧玲;青海率先人工栽培印度獐牙菜獲成功[N];中國(guó)改革報(bào);2007年

2 段煦;藏藥印度獐牙菜溫室引種試驗(yàn)成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 何丹丹;印度獐牙菜抗肝纖維化作用及物質(zhì)基礎(chǔ)初步研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2017年

2 陽勇;常用藏藥“蒂達(dá)”（藏茵陳）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：1277375