本文關(guān)鍵詞：“天然植物抗菌液”（PAMs）抗炎功效及初步作用機(jī)理研究

  更多相關(guān)文章： 天然植物抗菌液(PAMs) HPLC 抗炎機(jī)制 ACD 民族醫(yī)藥

【摘要】：現(xiàn)如今各種急慢性炎癥所引發(fā)的疾病嚴(yán)重影響著人類健康,同時(shí)造成巨大社會(huì)經(jīng)濟(jì)浪費(fèi),因此開發(fā)更多安全改善藥物成為當(dāng)務(wù)之急。天然植物抗菌液(PAMs)1號(hào)和2號(hào)(K1和K2)是由云南普洱丹州制藥有限公司生產(chǎn)的民族醫(yī)藥產(chǎn)品,前期研究發(fā)現(xiàn),其具有抑菌消毒、鎮(zhèn)痛、抗糖尿病足潰瘍以及對(duì)白血病K562細(xì)胞的促凋亡作用等功效,但對(duì)其功效成分、抗炎機(jī)制、皮膚炎癥改善效果尚不清楚,故進(jìn)行本次研究。首先采用HPLC法,以藥典條件為參考,經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)K1和K2中含有尿囊素分別為552.61μg/mL和502.33μg/mL,羥基紅花黃色素A分別為204.04μg/mL和62.51μg/mL,但只有K2中檢測(cè)到微量的薯蕷皂苷元為49 μg/mL和草烏甲素為14μg/mL。其次選用K2為抗炎機(jī)制研究的樣品,一方面測(cè)定K2對(duì)各類型細(xì)胞活力影響進(jìn)行探究,發(fā)現(xiàn)其對(duì)肝癌HpG2、肺癌A549、RAW264.7細(xì)胞具有劑量依賴性的抑制作用(p0.05)。另一方面利用LPS誘導(dǎo)RAW264.7巨噬細(xì)胞建立細(xì)胞炎癥模型,經(jīng)K2預(yù)處理后,細(xì)胞上清中促炎癥介質(zhì)NO明顯被抑制(p0.0001),胞內(nèi)ROS被清除,均表現(xiàn)出具有明顯的劑量依賴性抑制作用(p0.001),與炎癥密切相關(guān)的蛋白COX-2、iNOS蛋白均出現(xiàn)下調(diào)(p0.05),并且利用熒光雙染法觀察到其抑制NF-kappaB炎癥通路中的p65蛋白細(xì)胞核轉(zhuǎn)移。綜上,K2通過清除ROS活性,下調(diào)NO產(chǎn)物,COX-2、iNOS蛋白來減輕炎癥,推測(cè)K2對(duì)MAPK和NF-kB通路具有抑制作用,可能具有多通路抗炎活性。此外利用2,4-二硝基氟苯(DNFB)誘導(dǎo)BALB/c小鼠建立變應(yīng)性接觸性皮炎(ACD)模型,給予不同處理后,陽(yáng)性組,K1及K2組耳部腫脹和血管充血得到改善,并且其外周血中的TNF-α,IL-1β水平不同程度下降(p0.05),HE染色提示其表皮增厚和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少。同時(shí)免疫組化分析發(fā)現(xiàn),與模型組相比,K1及K2組中TNF-α,Ki67蛋白表達(dá)均下調(diào)(p0.001),并利用Western blotting定量Ki67蛋白表達(dá)分析進(jìn)一步得到確認(rèn)。說明增殖與腫脹水平呈正相關(guān),K1及K2組能不同程度減輕炎癥,且K1效果好于K2。從肝脾指數(shù)可知,K1及K2組與空白組無顯著差異(p0.05),且低于模型組。推測(cè)K1和K2對(duì)ACD療效可能是通過阻斷細(xì)胞炎癥因子(TNF-α,IL-1β)以及抑制細(xì)胞增殖來達(dá)到減輕病灶部位腫脹和炎癥的功效,并且具有保肝護(hù)脾的優(yōu)點(diǎn)。綜上,天然植物抗菌液中含有豐富的尿囊素和羥基紅花黃色素A,且K2中含有少量的草烏甲素和薯蕷皂苷元,為建立規(guī)范的產(chǎn)品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供參考;在以K2為代表的抗炎作用機(jī)制初探中,發(fā)現(xiàn)其可通過調(diào)控炎癥介質(zhì)(ROS,NO)和相關(guān)蛋白(iNOS,COX-2,p65)來抑制MAPK和NF-kB等通路發(fā)揮抗炎活性;PAMs通過下調(diào)ACD病灶部位相關(guān)蛋白以及抑制炎癥因子而具有改善耳部紅腫和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)等抗炎功效。因此,以上研究成果為天然植物抗菌液深入的臨床研究奠定基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 周毅潔;豆榮昆;畢振飛;楊亞藍(lán);劉宗瑛;鄔怡然;邱槿怡;向飛丹州;茆燦泉;;一種天然植物抗菌液PAMs對(duì)人白血病K562細(xì)胞的促凋亡作用[J];中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年06期

2 詹志來;胡峻;劉談;康利平;南鐵貴;郭蘭萍;;紫草化學(xué)成分與藥理活性研究進(jìn)展[J];中國(guó)中藥雜志;2015年21期

3 王領(lǐng);李富恒;程華;何聰芬;董銀卯;;馬齒莧提取物制備工藝、安全性及抗敏功效的研究[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2014年04期

4 耿成燕;宮德正;姜麗平;曹軍;Hiroyuki Yoshimura;仲來福;;橄欖葉提取物對(duì)大鼠急性炎癥和痛覺過敏的研究[J];天然產(chǎn)物研究與開發(fā);2011年05期

5 杜清;宋培浪;陳琳;姜?jiǎng)俪?于子文;;蕓香草的化學(xué)成分研究[J];海峽藥學(xué);2006年06期

6 涂紅琴;李新宇;;角質(zhì)形成細(xì)胞在變應(yīng)性接觸性皮炎和特應(yīng)性皮炎中的作用[J];國(guó)際皮膚性病學(xué)雜志;2006年06期

，

本文編號(hào)：1275268