本文關(guān)鍵詞：重復(fù)睡眠剝奪后小鼠行為學(xué)評估及海馬炎癥研究

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【摘要】：目的:本研究通過構(gòu)建動物模型來模擬人類睡眠不足的持續(xù)性、周期性的特征,同時評估相應(yīng)的行為學(xué)測試重復(fù)開展的可行性和有效性,探索慢性睡眠障礙的發(fā)病機制和治療方法。方法:小鼠隨機分為對照組和睡眠剝奪(Sleep deprivation,SD)組。SD組采用改進的多個小平臺水環(huán)境法,3個月內(nèi)反復(fù)、間斷地對SD組小鼠進行3天或者7天的快動眼時相(rapid eye movement,REM)睡眠剝奪造模。并且在第3、7、33、67天對所有小鼠進行開場實驗和Y迷宮測試分別檢測情緒和短期工作記憶能力。第82天開始Morris水迷宮試驗以測試空間學(xué)習(xí)記憶能力。水迷宮測試結(jié)束后經(jīng)過3周的睡眠恢復(fù),再觀察小鼠腦內(nèi)海馬炎癥及相關(guān)的病理改變。結(jié)果:開場試驗中,與對照組相比,首次3天的造模后,SD組的排便次數(shù)增加;7天SD后在中央?yún)^(qū)域的運動時間和運動距離降低;1個月后再次3天的SD,小鼠在中央?yún)^(qū)域的時間和距離減少;2個月后再次7天造模的SD組小鼠在中央?yún)^(qū)域的時間百分比、運動距離降低及排便次數(shù)增加。Y迷宮中,3天的SD未有明顯影響,但首次及第二次7天的SD后,SD組小鼠相比于對照組來說,在新奇臂(Novel Arm,NA)的時間百分比、運動距離及進入NA臂的次數(shù)均減少,說明短期工作記憶明顯受損。Morris水迷宮隱藏平臺訓(xùn)練期時,與對照組小鼠相比,SD組小鼠的逃避潛伏期和游泳距離明顯減少,同時游泳速度較慢,但是SD組小鼠在測試期出現(xiàn)了明顯的空間記憶障礙,在目標象限的時間和游泳距離百分比均明顯降低及平臺穿越交叉數(shù)減少。此外相對于對照組,再3天的睡眠剝奪后的SD組小鼠空間記憶障礙更嚴重,在目標象限的時間百分比、游泳距離及平臺穿越次數(shù)均降低。盡管經(jīng)過3周的睡眠恢復(fù)后,我們?nèi)钥梢杂^察到造模組海馬區(qū)比對照組的TNF-α水平顯著增加及NF-κB信號通路激活,同時SD組小鼠Iba-1陽性小膠質(zhì)細胞細胞表面面積增加,但是細胞密度未見改變,提示小膠質(zhì)細胞輕度活化。與此同時,SD組小鼠海馬區(qū)caspase-3陽性神經(jīng)元的比例增高。結(jié)論:重復(fù)進行開場實驗和Y迷宮測試能夠分別成功地檢測SD造模后小鼠的焦慮樣行為和工作記憶障礙。但是Morris水迷宮試驗不適合用于評價SD造模后小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力,因為長期"花盆式"水環(huán)境的SD造模方法增加了小鼠對水環(huán)境的熟悉度,進而干擾了最后的結(jié)果。此外,盡管經(jīng)過3周的睡眠恢復(fù)后,重復(fù)SD仍留有海馬炎癥。
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R740

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本文編號：1270938