本文關(guān)鍵詞：褪黑素在治療擠壓綜合征動(dòng)物模型缺血再灌注損傷的效果研究

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【摘要】：背景及目的褪黑素(melatonin,MEL)及其代謝產(chǎn)物具有很強(qiáng)的自由基清除能力,在哺乳動(dòng)物各組織器官的缺血再灌注損傷過程中具備潛在的治療作用。擠壓綜合征(crush syndrome,CS)是指各種重力創(chuàng)傷使肢體骨骼肌遭受持續(xù)性擠壓,當(dāng)這種持續(xù)性擠壓解除后相應(yīng)肢體骨骼肌出現(xiàn)的缺血及再灌注損傷,并引起橫紋肌溶解、高鉀血癥、代謝性酸中毒、急性腎損傷等臨床癥狀。擠壓綜合征多發(fā)生在戰(zhàn)爭(zhēng)災(zāi)害、恐怖襲擊、地震、山體滑坡等災(zāi)害性事件中。缺血再灌注損傷是擠壓綜合征病理生理改變的使動(dòng)環(huán)節(jié)。缺血再灌注過程中大量形成的氧自由基、炎癥因子釋放不僅影響局部組織活性及功能,還會(huì)引起全身炎癥反應(yīng)綜合征(Systemic inflammation reaction syndrome,SIRS),因而會(huì)繼發(fā)心臟、腎臟、肺等遠(yuǎn)隔器官的損傷。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)用止血帶擠壓大鼠雙下肢構(gòu)建擠壓綜合動(dòng)物模型,通過外源性褪黑素干預(yù)處理,一方面觀察其對(duì)擠壓綜合征模型大鼠酸堿平衡紊亂、氧化應(yīng)激損傷、橫紋肌溶解及存活率等方面的影響,另一方面觀察其對(duì)動(dòng)物模型心肌酶、心肌氧化應(yīng)激損傷、炎性細(xì)胞因子、心肌損傷病理改變等的影響。實(shí)驗(yàn)分為兩部分,一、褪黑素對(duì)擠壓綜合征動(dòng)物模型骨骼肌缺血再灌注損傷療效評(píng)估。二、褪黑素對(duì)擠壓綜合征動(dòng)物模型繼發(fā)心肌損傷的保護(hù)作用。方法第一部分:將Isamu Murata等擠壓綜合征造模方法加以利用改進(jìn),利用5%的戊巴比妥鈉溶液以50mg/kg劑量腹腔麻醉大鼠,利用卡式止血帶擠壓大鼠后肢根部,止血帶拉力等同于3kg重物的壓力,5小時(shí)后撤除止血帶恢復(fù)擠壓肢體血流灌注。將wistar雄性大鼠按照保證在再灌注6小時(shí)后各組存活10只造模大鼠的原則,隨機(jī)分為四組:空白組(SHAM組)、模型組(CS組)、擴(kuò)容組(NS組)及褪黑素組(MEL組),檢測(cè)大鼠后肢再灌注6小時(shí)血清中鉀離子(K+)、肌酸激酶同工酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(sod)、過氧化氫酶(cat)的活性及丙二醛(mda)含量,再灌注6小時(shí)檢查動(dòng)脈血?dú)?同時(shí)觀察各組大鼠腓腸肌光鏡下蘇木精伊紅(hematoxylineosin,he)染色病理改變;另外將81只大鼠分為sham組(n=10)、cs組(n=30)、ns組(n=25)、mel組(n=16),觀察再灌注48小時(shí)各組大鼠死亡的時(shí)間點(diǎn)以進(jìn)行生存曲線分析。第二部分:根據(jù)第一部分造模及分組方法,同樣以保證在再灌注12小時(shí)后存活10只造模大鼠的原則,將雄性wistar大鼠隨機(jī)分為四組:sham組、cs組、ns組及mel組,檢測(cè)各組大鼠后肢再灌注12小時(shí)血清肌鈣蛋白i(tni),肌酸激酶同工酶(ck-mb)、超氧化物歧化酶、丙二醛水平,炎性細(xì)胞因子tnf-α、il-1β水平,觀察各組大鼠心肌組織光鏡下he染色病理改變。結(jié)果再灌注6小時(shí),cs組動(dòng)脈血?dú)馓崾久黠@的代謝性酸中毒,而mel組酸堿平衡紊亂較cs組明顯改善。與sham組比較,cs組血清中k+、ck、ldh的含量顯著上升,gsh-px、sod、cat的活性顯著升高;與cs組比較,mel組血清中ck、ldh、k+的含量顯著降低,gsh-px、sod、cat的活性顯著下降。cs組中血清中mda的含量較sham組顯著升高;而mel組血清中mda含量較cs組顯著降低。sham組腓腸肌纖維間未見水腫及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),肌肉纖維正常分布;cs組、ns組腓腸肌纖維間質(zhì)水腫明顯,肌纖維結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,骨骼肌橫紋紊亂;mel組肌肉纖維間可見輕度水腫,纖維組織稍紊亂,其形態(tài)結(jié)構(gòu)明顯好于cs組與ns組。sham組大鼠的生存率為100%,cs組大鼠的生存率為20%,ns組大鼠的生存率29.2%,mel組大鼠的生存率為56.3%。再灌注12小時(shí),cs組血清中tni,ck-mb含量顯著升高,褪黑素干預(yù)后的mel組血清中tni,ck-mb較cs組明顯降低;cs組血清及心肌sod活性較sham組顯著降低,血清及心肌mda、tnf-α、il-1β水平顯著升高,mel組血清及心肌sod活性較cs組顯著升高,血清及心肌mda、tnf-α、il-1β水平顯著降低。通過he染色評(píng)估心肌損傷病理改變,sham組心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、心肌橫紋清晰可見;cs組心肌壞死和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯,心肌橫紋消失;mel組心肌組織損傷較cs有所減輕。結(jié)論利用卡式止血帶能成功建立擠壓綜合征動(dòng)物模型,在下肢恢復(fù)血流灌注前利用褪黑素早期干預(yù),對(duì)擠壓綜合征模型骨骼肌缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用;褪黑素能有效的抑制缺血再灌注過程中氧化應(yīng)激損傷,減輕橫紋肌溶解;并能提高擠壓綜合征模型大鼠生存率,改善缺血再灌注腓腸肌損傷。同時(shí)擠壓綜合征模型能引起心肌損傷,褪黑素通過其對(duì)心肌酶、內(nèi)源性抗氧化酶活性、炎性細(xì)胞因子、心肌組織的改變發(fā)揮對(duì)心肌組織的保護(hù)作用,減輕擠壓綜合征模型的心肌損傷。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R642;R-332

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 於四軍;嚴(yán)政;路靖;金德奎;張聰;劉惠亮;;早期大劑量地塞米松對(duì)擠壓綜合征大鼠模型心肌特異性損傷的療效[J];武警醫(yī)學(xué);2016年03期

2 Alberto Dominguez-Rodriguez;Pedro Abreu-Gonzalez;;Myocardial ischemia-reperfusion injury:Possible role of melatonin[J];World Journal of Cardiology;2010年08期

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本文編號(hào)：1259437