益氣活血法治療動(dòng)脈粥樣硬化形成機(jī)制的實(shí)驗(yàn)探究
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【摘要】:目的益氣活血法是治療動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)的重要治法之一。為探究益氣活血法治療AS的作用和分子機(jī)制,本研究基于高脂飲食誘導(dǎo)載脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)構(gòu)建的小鼠AS模型,選取補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味(Buyang Huanwu Added Decoction)進(jìn)行干預(yù),為應(yīng)用益氣活血法治療AS提供科學(xué)的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法選用雄性C57BL/6J小鼠10只和雄性ApoE-/-小鼠30只,7~8周齡。將正常雄性C57BL/6J小鼠設(shè)為正常對(duì)照組,雄性ApoE-/-小鼠隨機(jī)設(shè)為空白對(duì)照組、模型組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組和辛伐他汀組。模型組、補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組和辛伐他汀組ApoE-/-小鼠均喂以高脂飼料。第4周后,補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組和辛伐他汀組分別灌以補(bǔ)陽(yáng)還五湯加水蛭粉與辛伐他汀片。第9周后,經(jīng)全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血清總膽固醇(Totalcholesterol,TC),甘油三酯(Triglyceride,TG),高密度脂蛋白(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)值;取動(dòng)物主動(dòng)脈根部經(jīng)蘇木素-伊紅(Hematoxylin and eosin,HE)常規(guī)染色后觀察組織形態(tài)變化并測(cè)量纖維帽厚度、內(nèi)-中膜厚度;通過(guò)檢測(cè)p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 5(extracellular-regulated kinase 5,ERK5)在小鼠主動(dòng)脈中蛋白水平變化,探究補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味治療AS在絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號(hào)通路中的機(jī)制。結(jié)果血脂水平,與C57BL/6J小鼠空白對(duì)照組相比,ApoE-/-小鼠空白對(duì)照組和模型組TC、TG、LDL-C均升高且HDL-C均降低(P0.05);與模型組相比,補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組與辛伐他汀組均能減少ApoE-/-小鼠TC、TG、LDL-C水平,同時(shí)升高HDL-C(P0.05,P0.05)。與補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組相比,辛伐他汀組TC、LDL-C水平降低(P0.05),但TG、HDL-C水平的變化不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HE染色,C57BL/6J小鼠空白對(duì)照組主動(dòng)脈管壁無(wú)斑塊形成,ApoE-/-小鼠空白對(duì)照組管壁有極少斑塊形成,模型組斑塊形成明顯,補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組與辛伐他汀組較模型組斑塊減少。纖維帽厚度和血管內(nèi)-中膜厚度,與C57BL/6J小鼠空白對(duì)照組相比,ApoE-/-空白對(duì)照組小鼠的主動(dòng)脈纖維帽厚度與血管內(nèi)-中膜厚度有所增厚,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);模型組小鼠主動(dòng)脈纖維帽厚度和血管內(nèi)-中膜厚度均有增厚(P0.05);與模型組相比,補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組與辛伐他汀組小鼠的主動(dòng)脈纖維帽厚度和血管內(nèi)-中膜厚度均有減少(P0.05,P0.05);與補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組相比,辛伐他汀組主動(dòng)脈纖維帽厚度和血管內(nèi)-中膜厚度均有減少,但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。蛋白表達(dá),與C57BL/6J小鼠空白對(duì)照組相比,模型組主動(dòng)脈組織中p38MAPK蛋白表達(dá)升高(P0.05),ERK5蛋白表達(dá)降低(P0.05);與模型組相比,補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組和辛伐他汀組均能降低p38 MAPK蛋白表達(dá)(P0.05),升高ERK5蛋白的表達(dá)(P0.05);與補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味組相比,辛伐他汀組能降低p38MAPK蛋白的表達(dá)(P0.05),升高ERK5蛋白表達(dá)但不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味與辛伐他汀均有治療AS的作用。2.補(bǔ)陽(yáng)還五湯加味治療AS發(fā)生的機(jī)制可能與干預(yù)MAPK信號(hào)通路中的p38 MAPK、ERK5途徑有關(guān)。3.益氣活血法是治療AS的重要治法之一。
【學(xué)位授予單位】:南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類(lèi)號(hào)】:R259
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,本文編號(hào):1256109
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