人Gata3基因單倍劑量不足可以引起甲狀旁腺功能減低-感音神經(jīng)性耳聾-腎發(fā)育不良(HDR)綜合征,也稱為Barakat綜合征。其中感音神經(jīng)性耳聾是最常見的表型。這提示Gata3可能對耳蝸的發(fā)育至關(guān)重要。實驗室前期研究表明,胚胎發(fā)育早期階段條件性敲除內(nèi)耳中的Gata3會導(dǎo)致耳蝸無法正常形成前感覺區(qū)域,耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元(SGNs)無法正常投射并大量凋亡,這提示Gata3對耳蝸前感覺區(qū)域的形成及螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的存活起著重要的作用。但是,前感覺區(qū)域無法正常形成和SGNs大量凋亡限制了我們對Gata3在耳蝸發(fā)育后期感覺上皮中的作用的研究。因此Gata3在分化后的毛細(xì)胞(HCs)和支持細(xì)胞(SCs)中的作用尚不清楚。本文我們使用了他莫昔芬誘導(dǎo)的Sox2-CreERT2工具小鼠,特異性敲除出生后小鼠耳蝸SCs中的Gata3,來探究Gata3在出生后小鼠耳蝸SCs中的作用。結(jié)果表明Gata3在出生后小鼠耳蝸SCs中持續(xù)表達(dá)。在新生小鼠耳蝸SCs中敲除Gata3后,SCs數(shù)目增多,大上皮嵴(GER)區(qū)域擴(kuò)增。但是,在成熟小鼠耳蝸中,Gata3敲除后無明顯表型。EdU細(xì)胞增殖檢測結(jié)果表明,新生小鼠耳...

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
英文縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 內(nèi)耳結(jié)構(gòu)及發(fā)育
    1.2 Notch信號通路在耳蝸發(fā)育中的作用
    1.3 FGF信號通路在耳蝸發(fā)育中的作用
    1.4 Wnt信號通路在耳蝸發(fā)育中的作用
    1.5 耳蝸出生后發(fā)育及支持細(xì)胞的增殖潛能
    1.6 總結(jié)
第二章 GATA3 在出生后小鼠耳蝸支持細(xì)胞中的表達(dá)
    2.1 實驗材料與方法
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑及儀器
        2.1.3 實驗方法
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 GATA3 在新生小鼠耳蝸SCs中的表達(dá)
        2.2.2 GATA3 在成熟耳蝸SCs中的表達(dá)
    2.3 討論
第三章 出生后小鼠耳蝸支持細(xì)胞條件性敲除Gata3 對小鼠耳蝸管發(fā)育的影響
    3.1 實驗材料與方法
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 主要試劑及儀器
        3.1.3 實驗方法
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 新生小鼠耳蝸SCs條件性敲除Gata3 對耳蝸管的影響
        3.2.2 成年小鼠耳蝸SCs條件性敲除Gata3 對耳蝸管的影響
        3.2.3 Gata3 在新生小鼠耳蝸SCs失活后引起IPC、IBC和 GER增殖
    3.3 討論
第四章 GATA3 通過調(diào)控p27^kip1的表達(dá)維持耳蝸支持細(xì)胞的靜息狀態(tài)
    4.1 實驗材料與方法
        4.1.1 實驗動物
        4.1.2 主要試劑及儀器
        4.1.3 實驗方法
    4.2 實驗結(jié)果
        4.2.1 條件性敲除Gata3 引起IPC、IBC和 GER中 p27^kip1表達(dá)下調(diào)
        4.2.2 GATA3 可能通過直接結(jié)合p27^kip1的啟動子區(qū)域調(diào)控p27^kip1的表達(dá)
    4.3 討論
第五章 Gata3 條件性敲除小鼠耳蝸支持細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄組的變化
    5.1 實驗材料與方法
        5.1.1 實驗動物
        5.1.2 主要試劑及儀器
        5.1.3 實驗方法
    5.2 實驗結(jié)果
    5.3 討論
第六章 全文總結(jié)
    6.1 主要研究內(nèi)容與結(jié)果
    6.2 課題特色與創(chuàng)新
    6.3 研究的不足之處及展望
參考文獻(xiàn)
附錄一 :常用溶液配制
附錄二 :pcDNA3-Gata3和p GL3-p27kip1 promoter重組質(zhì)粒酶切鑒定和測序分析
附錄三 :RNA-seq差異表達(dá)的基因
作者簡介



本文編號：3861592