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SMYD3在牛著床前胚胎發(fā)育及胎兒成纖維細(xì)胞生長中作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2022-02-09 02:15
  哺乳動(dòng)物體細(xì)胞核移植(Somatic Cell Nuclear Transfer, SCNT)和誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(Induced Pluripotent Stem Cells, iPSCs)都證明終末分化的成體細(xì)胞可以被重編程為胚胎樣多能細(xì)胞。但目前SCNT和iPSCs都存在效率低的問題,尤其對于分化狀態(tài)較高的起始細(xì)胞很難重編程為多能性細(xì)胞。近來研究表明,在細(xì)胞重編程過程中增加轉(zhuǎn)錄因子或者表觀修飾相關(guān)基因的表達(dá)可以提高重編程效率。組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶(Histone Methyltransferase, HMT)包含一大類表觀遺傳修飾酶,在早期胚胎發(fā)育、干細(xì)胞多能性維持和分化、細(xì)胞重編程等過程具有廣泛調(diào)控作用。其中SMYD3 (SET and MYND domain-containing protein 3)是組蛋白H3賴氨酸4二甲基化(H3K4me2)和三甲基化(H3K4me3)轉(zhuǎn)移酶;最早在癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn),SMYD3能與RNA聚合酶Ⅱ形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物,激活下游一些癌基因和細(xì)胞周期相關(guān)基因的表達(dá),在癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲中起作用。但目前關(guān)于SMYD3在哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育及細(xì)胞重編程中作用... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)211工程院校

【文章頁數(shù)】:95 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

SMYD3在牛著床前胚胎發(fā)育及胎兒成纖維細(xì)胞生長中作用的研究


圖1.2?SMYD3蛋白在卵母細(xì)胞成熟和植入前胚胎中的表達(dá)和定位

序列,效率,序列,植入前胚胎


AT.I?im?n?mi"""""?n?n?1^1??M"圓圓國。I-國國園??圖1.2?SMYD3蛋白在卵母細(xì)胞成熟和植入前胚胎中的表達(dá)和定位。(A)?SMYD3在卵母細(xì)胞成熟中的表??達(dá)和定位:(B)?SMYD3在植入前胚胎中的表達(dá)和定位;GV:生發(fā)泡;PMI:減數(shù)第一次分裂前中期:??MI:減少第一次分裂中期;AI-TI:減數(shù)第一次分裂后期和末期:MII:減數(shù)第二次分裂中期:圖中標(biāo)尺為??50|im??Figure?1.2?民eprese打tative?images?of?immunos化ined?oocytes?(A)?and?embryos?(B)?showing?SMYD3?expression??and?localization?(green).?DNA?was?shined?wi化?PI?(red)?and?DAPI?(b山e).?Scale?bar,?50?jam.?GV:?germinal?vesicle;??PMI:?pro阻etaphase?I;?MI:?mctaphase?I;?Al-了I:?anaphase?l-tclophase?I;?Mil:?mctaphase?U.??2.?GV期敲減SMYD3對卵母細(xì)胞成熟和胚胎發(fā)育的劇向??為了研究&1優(yōu)03在卵母細(xì)胞成熟和庇胎發(fā)育中的作用,在GV期裸卵(denuded?oocytes,??DOS)胞質(zhì)中盈微注射了?5MyD3-siRNA和Nos-siRNA。注射后的卵母細(xì)胞在含有0.2mM??曲MX的培養(yǎng)液中抑制成熟24?h,收集所有的卵母細(xì)胞通過RT-qPCR方法檢測mRNA??敲減效率。與沒有注射組相比

卵母細(xì)胞,胚胎,內(nèi)蒙古大學(xué),卵母細(xì)胞成熟


內(nèi)蒙古大學(xué)博±學(xué)位論文??0CT4和CDX2的表達(dá)相對于對照組在兩個(gè)時(shí)期都沒有顯著變化(圖1.4C和1.4D)。??在注射胤化ZM-siRNA姐的Mn卵母細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄水平顯著下降;與卵母細(xì)胞成熟相反,??siRNA注射導(dǎo)致在受精48?h后的庇胎中的表達(dá)水平上升5倍(圖1.4B)。這??些結(jié)果表明在GV期下調(diào)表達(dá)能夠改變多能基因的表達(dá)。??A?SMYD3?目?W,?NANOG?*??C?3-|?*?C?1?I?1??S?'—干I責(zé)-?n??ij?n*?iH圓i苗円.」IL??Mil?Embryos?48h?pIVF?Embryos?48h?pIVF??C?CDX2?D?OCT4??J?I?']?下??11?ii?ii?lln*?m??Mil?Embryos?48h?pIVF?Mil?Embryos?48h?plVF??□?Non巧nse?siRNA?Injection??M?SMYD3siRNAInjectton??圖1.4?GV期注射湖仍后對MU期卵母細(xì)胞和受精48h后IVF胚胎中轉(zhuǎn)錄因子和cm2??表達(dá)的影響。誤差棒表示標(biāo)準(zhǔn)偏差,(*)表示與其他組有顯著性差異(p<〇.〇l)。??巧gure?1.4?E祇ct?of?SMTO3?knockdown?on?(9C7V,and?C餅口?expression.Graphs?showing?the?巧lative??mRNA?transc卻t?level?of?OCT4,?a打d?CDX2

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Histone modifications dictate specific biological readouts[J]. Anjana Munshi,Gowhar Shafi,Nishat Aliya,Akka Jyothy.  遺傳學(xué)報(bào). 2009(02)
[2]Silencing SMYD3 in hepatoma demethylates RIZI promoter induces apoptosis and inhibits cell proliferation and migration[J]. Li-Bo Chen, Jun-Yao Xu, Zhen Yang, Guo-Bin Wang Li-Bo Chen, Guo-Bin Wang, Hepatobiliary center, Union Hospital of Huazhong University of Science & Technology, Wuhan 430022, Hubei province, China Jun-Yao Xu, Department of General Surgery, The Second Affiliated Hospital of Sun Yat-seu University, Guangzhou 510120, Guangdong province, China Zhen Yang, Department of integrated surgery, Tongji Hospital of Huazhong University of Science & Technology, Wuhan 430030, Hubei province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2007(43)



本文編號(hào):3616191

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