目前許多研究發(fā)現(xiàn)多種微生物在模擬微重力環(huán)境下的生理代謝和基因表達都發(fā)生了很大的變化。畢赤酵母因其對外源蛋白質經濟高效的表達,是目前最引起關注的真核表達系統(tǒng)之一。本論文研究組成型重組畢赤酵母在模擬微重力(SMG)環(huán)境下單批次培養(yǎng)及長期繼代培養(yǎng)過程中外源蛋白質表達特點;通過差異蛋白質組學研究誘導型重組畢赤酵母在SMG環(huán)境下促進外源蛋白質表達的關鍵代謝通路;對蛋白質組學和前期獲得的轉錄組學數(shù)據(jù)挖掘,通過共表達方法篩選可促進外源蛋白質表達的功能基因;研究不同類型功能基因共表達方式與底盤酵母細胞適配性。主要結果有:(1)組成型畢赤酵母在SMG環(huán)境單批次培養(yǎng)及長期繼代培養(yǎng)過程中:反應器較高轉速所創(chuàng)造的SMG環(huán)境有利于酵母細胞增殖,促進外源蛋白質表達;SMG環(huán)境發(fā)酵液維持低pH,有利于外源蛋白質積累;SMG環(huán)境對細胞產生氧化脅迫,參與氧化脅迫應答的基因過表達,輔助蛋白質正確折疊。(2)差異蛋白質組學分析SMG環(huán)境下誘導型畢赤酵母外源蛋白質表達過程中代謝機制,發(fā)現(xiàn)甲醇代謝和糖類代謝、氧化脅迫應答、翻譯和折疊及其他代謝途徑的蛋白質過表達可以復制蛋白質正確折疊。其中參與氧化脅迫應答的相關蛋白起重要作用。(... 

【文章來源】：北京理工大學北京市 211工程院校 985工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

AOX1啟動子部分順式作用元件

北京理工大學博士學位論文P1p 調控生物素代謝[26]。設計轉錄因子及其作用元件個基因，提高外源蛋白質產量。過表達轉錄因子 HAC1p畢赤酵母中的表達[36]。過表達調控基因翻譯的轉錄因子達[37]。轉錄因子 AFT1p 激活鐵轉運途徑基因，過表達產量[38]。

圖 1-3 旋轉細胞培養(yǎng)系統(tǒng)（RCCS）示意圖[102]ll culture system. A, HARV system used to generate SMG cond HARV vessel. C, Orientation of HARV system to generate SM

【參考文獻】：
博士論文
[1]糖基化對β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化特性及構象的影響[D]. 鄒樹平.天津大學 2010

碩士論文
[1]β-D-葡萄糖醛酸苷酶催化多樣性及定向合成GAMG的酶基因克隆與表達[D]. 王小艷.石河子大學 2007



本文編號：2944901