本文選題：東亞飛蝗　切入點：嗅覺受體　出處：《中國農業(yè)大學》2017年博士論文

【摘要】：本研究論文選用1個黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)OR和1個東亞飛蝗(Locusta migratoria)OR作為研究對象初步探討它們的基本性質特點和生物學功能。主要結果如下:Ⅰ.黑腹果蠅Or82a的功能單感器記錄(Single Sensillum Recordings,SSR)實驗證明果蠅蟲體體表物質香葉基丙酮(Geranyl Acetone)能夠激起Or82a強烈的電生理反應,甚至在0.1%的低濃度下仍然能激起明顯的電生理反應,將Or82a基因敲除后,會失去這種反應,Or82a基因挽救后,又會恢復這種反應。Or82a基因敲除后的雄果蠅對野生型雌果蠅的求偶指數(shù)與野生型雄果蠅對野生型雌果蠅的求偶指數(shù)相比顯著升高,Or82a基因挽救后,求偶指數(shù)又降低至野生型水平,表明Or82a確實參與到了雄果蠅的性行為中。在1:5000稀釋度香葉基丙酮存在情況下突變體雄果蠅對野生型雌果蠅的求偶指數(shù)與對照不添加香葉基丙酮的情況下野生型雄果蠅對野生型雌果蠅的求偶指數(shù)之間沒有顯著性差異。綜合以上研究結果可得出結論:Or82a可檢測蟲體體表物質香葉基丙酮,低濃度的香葉基丙酮可抑制雄果蠅的求偶行為。Ⅱ.利用果蠅轉基因技術探討LmigOR3的功能從東亞飛蝗四齡蝗蝻觸角均一化cDNA文庫中篩選到4個候選的OR基因,分別命名為LmigOR3、LmigOR4、LmigOR5 和 LmigOR6;LmigOR3 和 LmigOR4 是全長序列,分別為 1242bp和1212 bp,分別編碼413個和403個氨基酸,經過跨膜區(qū)預測,這2個蛋白均包含7個跨膜區(qū),具有昆蟲嗅覺受體的典型特征;LmigOR5和LmigOR6是非全長序列,均缺少上游部分序列,利用5' RACE方法可獲得缺少的序列得到全長,結果表明LmigOR5全長1227 bp,編碼408個氨基酸,LmigOR6全長1236bp,編碼411個氨基酸,經過跨膜區(qū)預測,這2個蛋白也均包含7個跨膜區(qū),具有昆蟲嗅覺受體的典型特征。RT-PCR分析表明,LmigOR3、LmigOR4、LmigORR5和LmigOR6均特異地表達于飛蝗觸角中,在口器、翅、跗節(jié)、中腸中無表達。RNA原位雜交結果表明LmigOR3和LmigOR4表達在屬于毛形感器的神經元中,LmigOR5和LmigOR6表達在屬于錐形感器的神經元中。將LmigOR3連接到pUAST中構建轉化載體UAS-LmigOR3,將UAS-LmigOR3注射到白眼果蠅突變體Or67dGAL4的卵中,篩選紅眼果蠅,獲得轉基因果蠅品系UAS-LmigOR3,LmigOR3將特異地表達于果蠅的毛形感器T1神經元中,利用單感器記錄技術記錄LmigOR3對185種氣味分子的反應,結果表明在10%(vol/vol或者wt/vol)濃度下有55種氣味分子可引起LmigOR3反應,其中有18種氣味分子可引起強烈反應(△spikes/s≥20),這18種氣味分子主要分為3類,即酮類、酯類和雜環(huán)類,3-辛酮是最強的配體。綜合以上研究結果可得出結論:表達于毛形感器神經元的LmiggOR3是一個寬調節(jié)的嗅覺受體,與果蠅、蚊子、蠶蛾(Bombyx mori)中表達于毛形感器的OR是窄調節(jié)受體的結論不同,暗示飛蝗的嗅覺受體對氣味分子的編碼可能有自己獨特的特征。
[Abstract]:In this paper, a Drosophila melanogaster)OR and a Locusta migratoria)OR of Drosophila melanogaster and a Locusta migratoria)OR were selected to study their basic properties and biological functions. The main results are as follows: 鈪，

本文編號：1675087