牛IVF、SCNT和孤雌胚胎附植前發(fā)育過程中DNA甲基化的研究
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更多相關(guān)文章: 牛附植前胚胎 DNA甲基化 重編程 體細(xì)胞核移植
【摘要】:研究認(rèn)為,表觀遺傳修飾重編程不充分是導(dǎo)致體細(xì)胞核移植(SCNT)胚胎發(fā)育異常的主要原因之一。因此,本實(shí)驗(yàn)通過比較牛體外受精(IVF)和SCNT附植前胚胎DNA甲基化及組蛋白H3K9me3的動(dòng)態(tài)變化,旨在闡明牛SCNT附植前胚胎的表觀遺傳修飾重編程情況。結(jié)果顯示:(1)牛IVF附植前胚胎全基因組甲基化修飾經(jīng)歷了一個(gè)典型的去甲基化與再甲基化的動(dòng)態(tài)變化過程。TET3是TET基因家族在牛早期胚胎中主要表達(dá)的成員。satellite I、α-satellite、POU5F1和NANOG基因經(jīng)歷了明顯的DNA去甲基化過程,而印記基因H19對(duì)DNA去甲基化過程表現(xiàn)出一定的抵抗能力,SOX2和CDX2基因啟動(dòng)子區(qū)域始終處于低甲基化修飾狀態(tài)。H3K9me3在牛IVF附植前胚胎中一直維持著較高的信號(hào)強(qiáng)度;(2)與IVF附植前胚胎相比,牛SCNT附植前胚胎中始終維持著較高的5m C含量,并且無明顯的變化趨勢。同時(shí),未發(fā)現(xiàn)5hm C信號(hào)的存在。特定基因位點(diǎn)同樣表現(xiàn)出異常的DNA甲基化修飾:satellite I、α-satellite、POU5F1和NANOG基因均表現(xiàn)出不完全的DNA去甲基化,印記基因H19則表現(xiàn)出過度的去甲基化。Vitamin C的添加可改善satellite I、α-satellite和H19基因的甲基化修飾,但對(duì)POU5F1和NANOG并沒有體現(xiàn)出有利的影響,對(duì)SOX2和CDX2則無顯著影響;(3)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(RG108)的添加顯著降低了牛孤雌胚胎發(fā)育的囊胚率和特定基因位點(diǎn)(NANOG、satellite I和α-satellite)的DNA甲基化修飾水平,但同時(shí)顯著增加了囊胚期的凋亡細(xì)胞數(shù)和促凋亡基因BAX的表達(dá)。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:Q344
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,本文編號(hào):1267631
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