發(fā)布時間：2017-04-26 06:08

  本文關鍵詞：彩繪蛋白膠結材料MALDI-TOF-MS分析及表征研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：彩繪文物是人類文明進步的遺產,具有非常重要的歷史、考古、藝術和科學價值。保護和修復彩繪文物對中國、世界,乃至全人類有著十分重要的意義。彩繪顏料膠結材料的老化、降解等化學反應是彩繪文物受損的主要原因。本文采用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)法對古代文物彩繪顏料膠結材料進行了蛋白質組學研究。研究了彩繪文物膠結材料中蛋白質的提取工藝,對比了5種試劑(NaOH、TFA、HCOOH, HCl及NH3·H2O)提取蛋白質的優(yōu)劣,采用響應曲面法(RSM)優(yōu)化古代彩繪文物膠結材料中蛋白質的超聲輔助提取條件；進行了膠結材料雞卵白蛋白的蛋白質組學研究；采用MALDI-TOF-MS法分析和表征了雞卵白、雞卵黃和動物膠及其彩繪顏料模擬樣品,建立了雞卵白、雞卵黃和動物膠膠結材料的肽質量指紋圖譜。結果表明：TFA被證明具有很大的應用前景,可用于膠結材料中蛋白質提取及MALDI-TOF-MS分析表征研究；TFA超聲輔助提取雞卵蛋白中蛋白質的最佳條件為TFA的濃度為0.53%,超聲功率為50%,超聲時間為40 min；TFA超聲輔助提取動物膠中蛋白質的最佳條件為TFA的濃度為0.81%,超聲功率為70%,超聲時間為38.5 min；6種膠原蛋白在放養(yǎng)雞卵白蛋白中被首次發(fā)現,8種膠原蛋白在籠養(yǎng)雞卵白蛋白中被首次發(fā)現；EDTA可以有效絡合顏料中的金屬離子,釋放出蛋白質：與朱砂相比,石綠中的銅離子和蛋白質中的氨基酸產生強絡合作用,對蛋白質的表征影響較大。本論文包括五部分：第一章緒論概述了彩繪文物膠結材料研究方法,介紹了質譜法的原理及其在膠結材料分析中的應用、蛋白質組學研究方法和策略,在此基礎上提出了本課題的選題依據和研究內容。第二章雞卵白膠結材料中蛋白質的提取工藝研究研究了古代彩繪文物膠結材料中蛋白質的超聲輔助提取條件,從五種不同的蛋白質提取劑TFA、HCOOH、HCl及NH3·H2O)中篩選出一種良好的提取劑,采用響應曲面法(RSM)優(yōu)化了古代彩繪文物膠結材料中蛋白質的超聲輔助提取條件。第三章雞卵白蛋白的蛋白質組學研究采用MALDI-TOF-MS法表征了放養(yǎng)雞和籠養(yǎng)雞卵白中的蛋白質。研究了膠結材料雞卵白中蛋白質的酶解,主要考察了酶和底物的比例、酶解時間、酶解pH等三個因素對蛋白質酶解的影響。第四章雞卵及其模擬樣品的MALDI-TOF-MS分析與表征研究了雞卵白和雞卵黃模擬樣品中蛋白質的測定條件,干擾的消除方法,建立了雞卵白、雞卵黃及其模擬樣品的肽質量指紋圖譜。第五章動物膠模擬樣品中蛋白質的提取及MALDI-TOF-MS分析與表征采用響應曲面法(RSM)優(yōu)化了動物膠膠結材料中蛋白質的TFA超聲輔助提取條件,采用MALDI-TOF-MS法表征了動物膠及其模擬樣品中蛋白質,建立了動物膠及其模擬樣品的肽質量指紋圖譜。
【關鍵詞】：RSM MALDI-TOF-MS 彩繪文物 膠結材料
【學位授予單位】：西北大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：O657.63;TQ620.4
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-12
• 第一章 緒論12-44
• 1.1 彩繪文物膠結材料研究進展12-17
• 1.1.1 膠結材料研究方法概述12-13
• 1.1.2 質譜在膠結材料分析中的應用13-17
• 1.1.2.1 直接質譜法13
• 1.1.2.2 熱裂解質譜13-14
• 1.1.2.3 溫度分辨質譜14
• 1.1.2.4 快原子轟擊質譜14
• 1.1.2.5 激光解吸/電離質譜14-17
• 1.2 蛋白質組學研究概況17-23
• 1.2.1 蛋白質組學的提出及含義17
• 1.2.2 蛋白質組學研究的主要技術17-20
• 1.2.2.1 雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳17-18
• 1.2.2.2 色譜技術18
• 1.2.2.3 生物質譜技術18-19
• 1.2.2.4 酵母雙雜交技術19
• 1.2.2.5 蛋白質芯片技術19
• 1.2.2.6 串聯親和純化技術19-20
• 1.2.2.7 生物信息學20
• 1.2.3 蛋白質組學的研究策略20-23
• 1.2.3.1 蛋白質的提取和預分離20
• 1.2.3.2 蛋白質的質譜鑒定20-23
• 1.3 選題依據和研究內容23-25
• 參考文獻25-44
• 第二章 膠結材料中蛋白質的提取工藝研究44-62
• 2.1 引言44-45
• 2.2 實驗部分45-46
• 2.2.1 試劑與儀器45
• 2.2.2 樣品制備45
• 2.2.3 蛋白的超聲輔助提取45
• 2.2.4 蛋白濃度的測定45
• 2.2.5 響應曲面優(yōu)化試驗設計45-46
• 2.3 結果與討論46-57
• 2.3.1 標準曲線46
• 2.3.2 不同的提取劑提取蛋白的效率對比46-52
• 2.3.2.1 NaOH超聲輔助提取蛋白質的條件優(yōu)化47-48
• 2.3.2.2 TFA超聲輔助提取蛋白質的條件優(yōu)化48-50
• 2.3.2.3 NH_3濃度對超聲輔助提取蛋白質影響50-51
• 2.3.2.4 HCOOH濃度對超聲輔助提取蛋白質影響51-52
• 2.3.2.5 HCl濃度對超聲輔助提取蛋白質影響52
• 2.3.3 TFA超聲輔助提取蛋白質的響應曲面試驗結果與分析52-57
• 2.3.3.1 響應曲面試驗結果53-54
• 2.3.3.2 回歸方程模型的建立54
• 2.3.3.3 ANOVA方差分析54-55
• 2.3.3.4 響應曲面分析55-57
• 2.3.3.5 優(yōu)化的工藝條件57
• 2.4 小結57-58
• 參考文獻58-62
• 第三章 雞卵白蛋白的蛋白質組學研究62-80
• 3.1 引言62
• 3.2 實驗部分62-64
• 3.2.1 試劑與儀器62-63
• 3.2.2 樣品制備63
• 3.2.3 蛋白的酶解63
• 3.2.4 MALDI-TOF-MS測定63
• 3.2.5 數據分析63-64
• 3.3 結果與討論64-77
• 3.3.1 蛋白質酶解條件的優(yōu)化64-71
• 3.3.1.1 酶和底物加入比例的影響64-66
• 3.3.1.2 酶解pH的影響66-69
• 3.3.1.3 酶解時間的影響69-71
• 3.3.2 蛋白質的鑒定71-77
• 3.4 小結77-78
• 參考文獻78-80
• 第四章 雞卵白蛋白模擬樣品的肽質量指紋圖譜研究80-94
• 4.1 引言80
• 4.2 實驗部分80-81
• 4.2.1 試劑與儀器80-81
• 4.2.2 樣品制備81
• 4.2.3 試驗設計81
• 4.3 結果與討論81-91
• 4.3.1 模擬樣品分析81-82
• 4.3.2 干擾消除82-84
• 4.3.3 模擬樣品的MALDI-TOF-MS分析與表征84-91
• 4.4 小結91-92
• 參考文獻92-94
• 第五章 動物膠及其模擬樣品肽質量指紋圖譜研究94-108
• 5.1 引言94
• 5.2 實驗部分94-96
• 5.2.1 試劑、儀器與材料94-95
• 5.2.2 模擬樣品制備95
• 5.2.3 蛋白的提取及MALDI-TOF-MS表征95
• 5.2.4 響應曲面優(yōu)化試驗設計95-96
• 5.3 結果與討論96-105
• 5.3.1 模擬樣品分析96-97
• 5.3.2 響應曲面試驗97-101
• 5.3.2.1 響應曲面試驗設計結果97-98
• 5.3.2.2 回歸方程模型的建立及其顯著性檢驗98-99
• 5.3.2.3 響應曲面分析99-101
• 5.3.2.4 優(yōu)化的工藝條件101
• 5.3.3 MALDI-TOF-MS表征101-105
• 5.4 小結105-106
• 參考文獻106-108
• 總結108-110
• 攻讀博士學位期間取得的科研成果110-112
• 致謝112

【參考文獻】

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1 古今,劉萍,胡景華;三種動物膠的SDS不連續(xù)聚丙烯酰胺電泳法鑒別[J];北京中醫(yī);2003年01期

2 蘇伯民,張愛民,胡之德,李最雄;色譜法在古代繪畫膠結材料分析中的應用[J];敦煌研究;2000年01期

3 王遠亮;;動物膠源沿探辨[J];明膠科學與技術;1987年03期

4 Hongtao Yan;Jingjing An;Tie Zhou;Yin Xia;Bo Rong;;Identification of proteinaceous binding media for the polychrome terracotta army of Emperor Qin Shihuang by MALDI-TOF-MS[J];Chinese Science Bulletin;2014年21期

5 ;Screening of FOXP3-interacted proteins by yeast two-hybrid technique[J];Journal of Medical Colleges of PLA;2008年02期

6 徐英操;劉春紅;;蛋白質水解度測定方法綜述[J];食品研究與開發(fā);2007年07期

7 魏書亞;馬清林;Manfred Schreiner;;山東青州香山西漢墓彩繪陶俑膠接材料研究[J];文博;2009年06期

8 彭詠波;周萍;楚楚;劉鄂湖;聞曉東;劉群;陳君;高寧;齊煉文;李萍;;基于 LC Chip Q-TOF MS/MS 的非標記比較策略研究丙二酰黃芪皂苷 I 抗白血病 U937 細胞的差異蛋白質組(英文)[J];中國天然藥物;2011年04期

9 何詩敏;陳海棟;容波;周鐵;張暉;張秉堅;;秦俑陶質彩繪原始工藝和剝落過程的探索性研究[J];文物保護與考古科學;2014年04期

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本文編號：327876