目的:研究羊肚菌富硒液體發(fā)酵培養(yǎng)條件,為集硒培養(yǎng)提供條件支撐;研究羊肚菌絲的集硒特性,為硒資源的有效利用提供新思路。探究集硒培養(yǎng)菌絲的生理生化指標(biāo)和硒與大分子的結(jié)合方式,了解硒在羊肚菌絲生長發(fā)育中的生理作用和代謝機(jī)理,為含硒活性物質(zhì)的生產(chǎn)提供參考,同時也為今后羊肚菌更深層次的分子研究提供參考。對不同溶解性和飽和度下蛋白的研究為含硒蛋白的提取和純化工藝奠定基礎(chǔ),進(jìn)而促進(jìn)羊肚菌的精深加工、藥用及保健品的進(jìn)一步開發(fā)。方法:以亞硒酸鈉為無機(jī)硒源,轉(zhuǎn)化無機(jī)硒為有機(jī)硒的硒源利用率為考察指標(biāo),通過正交實驗優(yōu)化羊肚菌菌絲液體培養(yǎng)條件。利用水提醇沉法、Sevage法對菌絲中的多糖分別進(jìn)行提取和初步純化,硫酸蒽酮法測多糖含量。對可溶性蛋白質(zhì)則采用磷酸緩沖液提取,硫酸銨沉淀、透析的方法初步純化;采用考馬斯亮藍(lán)G250法測定可溶性蛋白含量。另對水溶性、醇溶性、堿溶性、鹽溶性四種不同溶解性蛋白進(jìn)行提取、硫酸銨沉淀和透析�？偽�、多糖和蛋白質(zhì)的硒含量均用原子熒光光譜法測定。利用試劑盒法測定菌絲T-SOD、POD、PPO活性和Pro含量。采用HPLC和外標(biāo)法測定未加硒、正交最優(yōu)組菌絲中的水解氨基酸種類和含量;通過LC...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第1章 前言
    1.1 研究背景和意義
    1.2 研究內(nèi)容及創(chuàng)新點
第2章 羊肚菌絲集硒培養(yǎng)條件優(yōu)化
    2.1 引言
    2.2 材料、試劑及實驗儀器
        2.2.1 材料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 試驗方法
        2.3.1 菌種活化
        2.3.2 單因素試驗
        2.3.3 正交優(yōu)化條件
        2.3.4 硒源利用率的測定
    2.4 結(jié)果分析
        2.4.1 硒濃度對菌絲干重的影響
        2.4.2 硒濃度對硒源利用率的影響
        2.4.3 培養(yǎng)溫度對硒源利用率的影響
        2.4.4 裝液量對硒源利用率的影響
        2.4.5 培養(yǎng)天數(shù)硒源利用率的影響
        2.4.6 正交試驗結(jié)果分析
    2.5 小結(jié)與討論
第3章 硒對羊肚菌絲生理生化特性的研究
    3.1 引言
    3.2 材料、試劑及實驗儀器
        3.2.1 材料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
    3.3 試驗方法
        3.3.1 T-SOD活力測定
        3.3.2 POD活力測定
        3.3.3 PPO活力測定
        3.3.4 Pro含量測定
        3.3.5 葡萄糖和蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        3.3.6 菌絲中多糖的提取和含量測定
        3.3.7 菌絲中可溶性蛋白的提取和含量測定
    3.4 結(jié)果分析
        3.4.1 不同硒濃度添加對菌絲T-SOD活力的影響
        3.4.2 不同硒濃度添加對菌絲POD活力的影響
        3.4.3 不同硒濃度添加對菌絲PPO活力的影響
        3.4.4 不同硒濃度添加對菌絲脯氨酸含量的影響
        3.4.5 葡萄糖和可溶性蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.6 不同硒濃度對菌絲多糖含量的影響
        3.4.7 不同硒濃度對菌絲可溶性蛋白含量的影響
    3.5 小結(jié)與討論
第4章 羊肚菌絲含硒活性物質(zhì)組成研究
    4.1 前言
    4.2 材料、試劑及儀器
        4.2.1 材料
        4.2.2 主要試劑
        4.2.3 主要儀器
    4.3 試驗方法
        4.3.1 菌絲多糖中硒含量的測定
        4.3.2 蛋白質(zhì)的硒含量測定
        4.3.3 不同溶解性蛋白的提取和硒含量測定
        4.3.4 不同硫酸銨飽和度沉淀所得蛋白的硒含量測定
        4.3.5 未加硒組和正交最優(yōu)組水解氨基酸比較
        4.3.6 未加硒組和正交最優(yōu)組硒代氨基酸的比較
    4.4 結(jié)果分析
        4.4.1 不同硒濃度對多糖中硒含量的影響
        4.4.2 不同硒濃度對可溶性蛋白質(zhì)中硒含量的影響
        4.4.3 不同溶解性蛋白的硒含量的比較
        4.4.4 不同硫酸銨飽和度下菌絲蛋白的硒含量比較
        4.4.5 菌絲水解氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        4.4.6 菌絲硒代氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        4.4.7 未加硒組與正交最優(yōu)組水解氨基酸比較
        4.4.8 未加硒組與正交最優(yōu)組硒代氨基酸比較
    4.5 小結(jié)與討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    1 硒概述
        1.1 硒元素
        1.2 微生物硒代謝
        1.3 硒與人體健康
        1.4 硒分布與硒產(chǎn)業(yè)
        1.5 含硒活性物質(zhì)功能
    2 羊肚菌
        2.1 羊肚菌概況
        2.2 羊肚菌生物活性物質(zhì)
            2.2.1 羊肚菌多糖
            2.2.2 羊肚菌蛋白
            2.2.3 羊肚菌氨基酸
    3 食用菌集硒進(jìn)展
        3.1 平菇
        3.2 香菇
        3.3 靈芝
        3.4 黑木耳
        3.5 金針菇
        3.6 羊肚菌
攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果
致謝



本文編號：3821548