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海參中呋喃唑酮藥殘的膠體金免疫層析現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)技術(shù)

發(fā)布時(shí)間:2017-03-29 23:03

  本文關(guān)鍵詞:海參中呋喃唑酮藥殘的膠體金免疫層析現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)技術(shù),,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:近年來(lái),食品安全問(wèn)題頻繁發(fā)生,獸藥殘留尤其是海產(chǎn)品獸藥殘留問(wèn)題更是引起了國(guó)內(nèi)外的廣泛關(guān)注。硝基呋喃類(lèi)藥物是一類(lèi)人工合成的廣譜類(lèi)抗菌藥物,因其具有殺菌效果好、價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)中,但是硝基呋喃類(lèi)抗生素的代謝物會(huì)在動(dòng)物體內(nèi)蓄積,進(jìn)而對(duì)人體造成傷害,所以我國(guó)及世界大多數(shù)國(guó)家都已經(jīng)將硝基呋喃類(lèi)藥物列為禁用藥物。目前,膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)在獸藥殘留的檢測(cè)中已經(jīng)形成了自己獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),這就使得與大型儀器分析方法相比,不同海產(chǎn)品的藥殘分析過(guò)程變得簡(jiǎn)單快速,這一檢測(cè)方法已經(jīng)被大范圍推廣使用。經(jīng)過(guò)多年研究,目前市場(chǎng)上已經(jīng)推出了對(duì)應(yīng)藥殘的膠體金免疫檢測(cè)試劑卡,然而關(guān)于這些試劑卡的效能以及如何優(yōu)化膠體金免疫檢測(cè)的前處理,做到在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中避免有機(jī)試劑萃取、多次離心等復(fù)雜操作尚無(wú)明確的研究和報(bào)道。本研究以仿刺參為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,采用高溫加熱和鹽酸酸處理相結(jié)合的方法消除海參中蛋白和海參多糖的基質(zhì)效應(yīng),從而省略藥物衍生后用有機(jī)試劑萃取來(lái)消除基質(zhì)效應(yīng)這一繁瑣的步驟,實(shí)現(xiàn)了衍生后直接檢測(cè),建立新的前處理方法,使整個(gè)檢測(cè)過(guò)程減少對(duì)大型儀器的利用率,檢測(cè)時(shí)間縮短到60min以?xún)?nèi),并且使膠體金免疫檢測(cè)的靈敏度達(dá)到國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求,從而進(jìn)一步改善了現(xiàn)有商品化試劑卡普遍存在的前處理不合理的缺陷。主要的研究?jī)?nèi)容如下:1.探索實(shí)驗(yàn)前期的各種因素,包括檢測(cè)卡的檢測(cè)性能及在藥物衍生后不經(jīng)提取直接檢測(cè)的情況下,海參基質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生的影響。實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論,當(dāng)呋喃唑酮代謝物(AOZ)標(biāo)準(zhǔn)液的濃度≥0.25μg/L時(shí),即可出現(xiàn)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果,且穩(wěn)定性和特異性都良好;海參多糖及其與蛋白質(zhì)的共同作用為干擾檢測(cè)的最大基質(zhì)。2.摸索消除海參基質(zhì)干擾的最佳條件和方法,確定最佳的前處理方法是將海參樣品在衍生前用80℃水浴加熱5 min并結(jié)合終濃度為0.1 mol/L鹽酸處理,可有效消除基質(zhì)干擾;衍生化條件優(yōu)化結(jié)果為60℃水浴衍生45min時(shí),可以達(dá)到理想的檢測(cè)效果,并使檢測(cè)時(shí)間進(jìn)一步縮短。最終建立的檢測(cè)方法對(duì)海參中AOZ的檢出限為0.5μg/kg,檢測(cè)方法的重復(fù)性及特異性良好。3.把最終建立的前處理過(guò)程在實(shí)際海參樣本中進(jìn)行驗(yàn)證。同時(shí)采用本實(shí)驗(yàn)建立的方法和LC-MS/MS檢測(cè)方法對(duì)同一實(shí)際海參樣本進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,建立的方法與LC-MS/MS的符合性良好,都呈現(xiàn)強(qiáng)陽(yáng)性的結(jié)果;優(yōu)化后的的樣品前處理方法可以實(shí)現(xiàn)實(shí)際樣本中AOZ的快速檢測(cè)。
【關(guān)鍵詞】:呋喃唑酮 高溫加熱 酸處理 膠體金免疫層析 前處理 快速檢測(cè)
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類(lèi)號(hào)】:TS254.7
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-12
  • 0 前言12-25
  • 0.1 硝基呋喃類(lèi)抗生素的簡(jiǎn)介及其分析檢測(cè)的研究現(xiàn)狀12-17
  • 0.1.1 硝基呋喃類(lèi)藥物的簡(jiǎn)介12
  • 0.1.2 硝基呋喃類(lèi)藥物的藥用性質(zhì)及其使用情況12
  • 0.1.3 硝基呋喃類(lèi)藥物的代謝作用及分布情況12-13
  • 0.1.4 硝基呋喃類(lèi)藥物的殘留狀況及其危害13-14
  • 0.1.5 硝基呋喃類(lèi)藥物的檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展14-17
  • 0.2 膠體金免疫分析技術(shù)的概況及開(kāi)發(fā)研究進(jìn)展17-21
  • 0.2.1 膠體金免疫檢測(cè)的機(jī)理及其開(kāi)發(fā)歷程18
  • 0.2.2 膠體金免疫分析方法在快檢方而的應(yīng)用進(jìn)展18-21
  • 0.3 膠體金免疫層析分析技術(shù)檢測(cè)AOZ殘留的研究進(jìn)展21-23
  • 0.4 研究的目的及意義23
  • 0.5 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線(xiàn)23-25
  • 0.5.1 研究?jī)?nèi)容23-24
  • 0.5.2 研究的技術(shù)路線(xiàn)24-25
  • 1 檢測(cè)卡性能探究及海參基質(zhì)對(duì)膠體金免疫檢測(cè)的影響25-38
  • 1.1 引言25
  • 1.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器25-28
  • 1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器25-26
  • 1.2.2 材料與試劑26-27
  • 1.2.3 溶液的配置27-28
  • 1.3 實(shí)驗(yàn)方法28-31
  • 1.3.1 AOZ檢測(cè)卡性能的測(cè)定28-29
  • 1.3.2 現(xiàn)有前處理方法對(duì)海參樣本的適用性29
  • 1.3.3 海參基質(zhì)對(duì)膠體金免疫檢測(cè)的影響29-31
  • 1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論31-37
  • 1.4.1 AOZ檢測(cè)卡性能的測(cè)定31-33
  • 1.4.2 現(xiàn)有前處理方法對(duì)海參樣本的適用性測(cè)定結(jié)果33-34
  • 1.4.3 海參基質(zhì)對(duì)膠體金免疫檢測(cè)的影響34-37
  • 1.5 本章小結(jié)37-38
  • 2. 膠體金免疫層析檢測(cè)前處理過(guò)程的優(yōu)化38-51
  • 2.1 引言38-39
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器39-41
  • 2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器39-40
  • 2.2.2 材料與試劑40
  • 2.2.3 溶液的配置40-41
  • 2.3 實(shí)驗(yàn)方法41-43
  • 2.3.1 海參基質(zhì)干擾的消除過(guò)程41-42
  • 2.3.2 衍生化條件的優(yōu)化42-43
  • 2.3.3 pH的調(diào)節(jié)方法與樣品終體積的確定43
  • 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論43-50
  • 2.4.1 海參基質(zhì)干擾的消除過(guò)程43-48
  • 2.4.2 衍生化條件的優(yōu)化結(jié)果48-49
  • 2.4.3 pH的調(diào)節(jié)方法49-50
  • 2.5 本章小結(jié)50-51
  • 3 該方法在實(shí)際海參樣品中的驗(yàn)證51-59
  • 3.1 前言51
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器51-53
  • 3.2.1 主要的實(shí)驗(yàn)儀器51-52
  • 3.2.2 材料與試劑52
  • 3.2.3 溶液的配置52-53
  • 3.3 實(shí)驗(yàn)方法53-54
  • 3.3.1 最終建立的檢測(cè)方法的靈敏度與穩(wěn)定性53
  • 3.3.2 檢測(cè)方法的特異性53
  • 3.3.3 最終建立的檢測(cè)方法在實(shí)際海參樣品中的驗(yàn)證53-54
  • 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論54-58
  • 3.4.1 最終建立的檢測(cè)方法的靈敏度與穩(wěn)定性54-55
  • 3.4.2 檢測(cè)方法的特異性55-56
  • 3.4.3 最終建立的方法在實(shí)際樣本中的驗(yàn)證56
  • 3.4.4 便攜式可視化檢測(cè)裝置的形成56-58
  • 3.5 本章小結(jié)58-59
  • 4 結(jié)論及本研究的創(chuàng)新點(diǎn)59-61
  • 4.1 結(jié)論59-60
  • 4.2 創(chuàng)新點(diǎn)60
  • 4.3 論文不足之處及工作展望60-61
  • 參考文獻(xiàn)61-66
  • 致謝66-67
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷67
  • 在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文67

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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  本文關(guān)鍵詞:海參中呋喃唑酮藥殘的膠體金免疫層析現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)技術(shù),由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):275611

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