本文關(guān)鍵詞：碳點(diǎn)標(biāo)記IgG的熒光免疫分析法檢測(cè)蛋白A和蛋白G　出處：《遼寧師范大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 碳點(diǎn) 免疫球蛋白G 金黃色葡萄球菌蛋白A 鏈球菌蛋白G 熒光免疫分析法

【摘要】：碳點(diǎn)(CDs)是最近發(fā)現(xiàn)的一類強(qiáng)熒光且發(fā)射顏色可調(diào)的納米粒子,具有毒性低,生物相容性好,光穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)在分析和生物分析領(lǐng)域表現(xiàn)出巨大潛力,有希望成為理想的熒光標(biāo)記物。金黃色葡萄球菌蛋白A(SPA)和鏈球菌蛋白G(SPG)分別作為致病菌金黃色葡萄球菌和G群鏈球菌的表面蛋白,均能夠與免疫球蛋白G(IgG)的Fc片段結(jié)合。本論文以SPA和SPG作為檢測(cè)對(duì)象,并對(duì)CDs的合成、表征、羧基化及進(jìn)一步標(biāo)記IgG展開(kāi)了一系列研究,主要包括以下幾個(gè)方面:1、CDs的合成與表征本文以檸檬酸和乙二胺為原料,水熱法合成了量子產(chǎn)率高達(dá)75.3%的CDs,通過(guò)掃描傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜和紫外-可見(jiàn)吸收光譜對(duì)CDs進(jìn)行表征。結(jié)果表明所合成的CDs表面含氧基團(tuán)豐富,表現(xiàn)出良好的水溶性,易于功能化及卓越的發(fā)光性能。此外,CDs的發(fā)射波長(zhǎng)不隨激發(fā)波長(zhǎng)的改變而改變。因此,CDs作標(biāo)記物為熒光免疫分析、生物成像及生物傳感等方面的研究提供了新機(jī)遇。2、CDs標(biāo)記人IgG檢測(cè)金黃色葡萄球菌蛋白ACDs表面的羥基轉(zhuǎn)化成羧基有助于抗體共軛,本文利用NaOH和ClCH2COONa超聲法對(duì)CDs進(jìn)行羧基化處理。加入EDC和NHS使羧基化的CDs與人IgG(hIgG)共價(jià)結(jié)合,得到CDs-hIgG共軛物。傅里葉轉(zhuǎn)換紅外光譜、紫外-可見(jiàn)吸收光譜和熒光偏振度均表明CDs成功標(biāo)記在hIgG上,且體系的熒光強(qiáng)度隨著SPA濃度的增大而增強(qiáng)。最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)定SPA,在0.1-5.0μg/mL線性范圍內(nèi)得到了線性回歸方程,檢出限為0.04μg/mL,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.41%�？蛇\(yùn)用該方法對(duì)實(shí)際樣品中的SPA進(jìn)行檢測(cè)。3、CDs標(biāo)記羊抗人IgG檢測(cè)鏈球菌蛋白G本文對(duì)CDs進(jìn)行羧基化處理,并與羊抗人IgG(gIgG)共價(jià)結(jié)合,形成CDs-gIgG共軛物。多種表征結(jié)果證明CDs-gIgG共軛物的存在。向CDs-gIgG中加入不同濃度的SPG,體系的熒光增強(qiáng),且程度較SPA更為顯著。在最優(yōu)實(shí)驗(yàn)條件下,體系的熒光強(qiáng)度變化率(F-F0)/F0與SPG濃度之間存在良好的線性關(guān)系,線性范圍0.02-0.20μg/mL,檢出限低至0.01μg/mL,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.16%。綜上所述,CDs在熒光免疫分析范疇可以成為熒光標(biāo)記物的絕佳選擇。
[Abstract]:This paper presents a series of studies on the synthesis , characterization , carboxymethylation and fluorescence polarization of CDs by means of scanning Fourier transform infrared spectroscopy , UV - Vis absorption spectrum and fluorescence polarization .

【學(xué)位授予單位】：遼寧師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：O657.3;TQ937

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