目的:成肌細(xì)胞是起源于肌肉衛(wèi)星細(xì)胞的肌源細(xì)胞,具有分化、增殖等能力,成肌細(xì)胞衰老與骨骼肌減少相關(guān)疾病的發(fā)病密切相關(guān)。自噬作為細(xì)胞生存的一種應(yīng)激反應(yīng),在細(xì)胞自穩(wěn)中發(fā)揮重要的作用,有研究表明隨著衰老發(fā)生,自噬活性逐漸被抑制。而自噬對成肌細(xì)胞衰老的調(diào)控作用及調(diào)控機(jī)制尚不十分明確。本研究使用D-半乳糖誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞模擬骨骼肌成肌細(xì)胞衰老,以研究自噬與衰老成肌細(xì)胞的作用關(guān)系及機(jī)制,為骨骼肌減少相關(guān)疾病的診療提供新的參考。方法:1.D-半乳糖干預(yù)C2C12成肌細(xì)胞后,通過β-半乳糖苷酶染色、Western-blot、JC-1線粒體膜電位、超氧化物歧化酶實(shí)驗(yàn)對β-半乳糖苷酶的活性、P53和P16蛋白表達(dá)水平、線粒體功能和細(xì)胞抗氧化應(yīng)激活性等衰老相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測。2.D-半乳糖干預(yù)C2C12成肌細(xì)胞后,通過western-blot分析P62、LC3蛋白表達(dá),免疫熒光檢測P62的變化,觀察自噬水平改變。3.實(shí)驗(yàn)分為四組:對照組(MOCK組)、D-半乳糖組(D-GAL組)、雷帕霉素預(yù)處理的D-半乳糖組(D-GAL+RAPA組)、3-甲基腺嘌呤預(yù)處理的D-半乳糖組(DGAL+3-MA組)。β-半乳糖苷酶...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 D-半乳糖誘導(dǎo)C2C12 成肌細(xì)胞衰老
    2.2 D-半乳糖對C2C12 成肌細(xì)胞自噬活性的影響
    2.3 自噬對D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老C2C12 細(xì)胞的影響
    2.4 自噬對D-半乳糖誘導(dǎo)的C2C12 細(xì)胞增殖能力的影響
    2.5 自噬對D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老C2C12 細(xì)胞中Hippo信號通路的影響
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3940821