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AcMNPV侵染宿主細(xì)胞過程中Ac25的功能研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-21 19:52
  桿狀病毒是一類有包膜的、大型雙鏈DNA病毒,它的宿主主要是節(jié)肢動(dòng)物(特別是昆蟲),而且在環(huán)境中普遍存在。研究最多的桿狀病毒是苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒(AcMNPV)。桿狀病毒被稱為安全的生物殺蟲劑,但因其殺蟲譜窄,殺蟲效率過低使它的應(yīng)用極其受限。研究者通常利用基因工程的方法來增強(qiáng)桿狀病毒的活性,提高其殺蟲效率。AcMNPV orf 25編碼一個(gè)含316個(gè)氨基酸殘基的蛋白,該蛋白與BmNPV DNA結(jié)合蛋白DBP的同源性較高,推測Ac25是一種潛在的DNA結(jié)合蛋白,可能參與DNA復(fù)制的過程。有研究表明ac25是一個(gè)必需基因,缺乏ac25的病毒會(huì)產(chǎn)生有缺陷的核衣殼。Ac25不是病毒粒子結(jié)構(gòu)蛋白,它是一種病毒發(fā)生基質(zhì)的組分,敲除ac25基因的桿粒不會(huì)產(chǎn)生正常的病毒發(fā)生基質(zhì)。為了明確和揭示Ac25在AcMNPV侵染宿主Sf9細(xì)胞過程中的作用機(jī)制,本研究開展了Ac25的功能分析。本研究主要分為三部分:第一部分:重組病毒vAcac25KO-EGFP、vAcac25KO-Ac25-EGFP、vAc-Ac25-EGFP的構(gòu)建及Ac25-EGFP的表達(dá)分析我...

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1桿狀病毒的發(fā)育循環(huán)[8]

圖1.1桿狀病毒的發(fā)育循環(huán)[8]

AcMNPV侵染宿主細(xì)胞過程中Ac25的功能研究2圖1.1桿狀病毒的發(fā)育循環(huán)[8](a)昆蟲幼蟲的橫截面圖。OB污染的食物被昆蟲誤食①。OB在中腸的堿性環(huán)境中被溶解②,從而釋放出ODV③。圍食膜被OB中存在的病毒和宿主編碼酶降解④,使ODV進(jìn)入細(xì)胞。(b)桿狀病毒的復(fù)制循環(huán)圖。O....


圖1.2重組桿狀病毒的構(gòu)建過程[9]

圖1.2重組桿狀病毒的構(gòu)建過程[9]

第一章文獻(xiàn)綜述3插入到穿梭載體Bacmid的mini-attTn7位點(diǎn)中,形成重組bacmid。重組桿粒經(jīng)轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞包裝成重組病毒。圖1.2重組桿狀病毒的構(gòu)建過程[9]桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)已經(jīng)成為與酵母、哺乳動(dòng)物、大腸桿菌相并列的四大表達(dá)系統(tǒng)之一。外源基因在昆蟲細(xì)胞中的高效表....


圖1.3hrs和IE1激活桿狀病毒早期基因轉(zhuǎn)錄[23]

圖1.3hrs和IE1激活桿狀病毒早期基因轉(zhuǎn)錄[23]

第一章文獻(xiàn)綜述51.1.5桿狀病毒基因的表達(dá)在感染細(xì)胞內(nèi),桿狀病毒基因的表達(dá)具有時(shí)序性。在病毒基因組復(fù)制之前早期基因進(jìn)行表達(dá),在DNA合成開始或開始后晚期基因進(jìn)行表達(dá)。在病毒感染后0-6h,早期基因開始轉(zhuǎn)錄,IE-1作為轉(zhuǎn)錄激活因子結(jié)合到DNA的轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)域[22]。如圖1.3所....


圖1.4桿狀病毒晚期和極晚期基因轉(zhuǎn)錄的比較[23]

圖1.4桿狀病毒晚期和極晚期基因轉(zhuǎn)錄的比較[23]

AcMNPV侵染宿主細(xì)胞過程中Ac25的功能研究6圖1.4桿狀病毒晚期和極晚期基因轉(zhuǎn)錄的比較[23]1.1.6桿狀病毒基因的分類桿狀病毒基因分為非結(jié)構(gòu)蛋白基因和結(jié)構(gòu)蛋白基因。非結(jié)構(gòu)蛋白基因包括與病毒DNA復(fù)制、病毒基因表達(dá)調(diào)控以及宿主細(xì)胞和蟲體機(jī)能調(diào)控等有關(guān)的基因,主要參與的是基....



本文編號(hào):3934060

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