目的:(1)探索不同濃度的FGF-2溶液對(duì)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)向韌帶和骨誘導(dǎo)的效果。(2)探究FGF-2慢病毒載體轉(zhuǎn)染后的hAMSCs復(fù)合兔自體富血小板血漿(Platelet rich plasma,PRP)促進(jìn)腱-骨愈合的可行性。方法:(1)通過酶消化法(2次胰酶消化,1次II型膠原酶消化)提取hAMSCs,連續(xù)傳代培養(yǎng),顯微鏡下觀察hAMSCs的細(xì)胞形態(tài),hAMSCs傳至第三代(P3代hAMSCs)可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);通過免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)P3代hAMSCs進(jìn)行鑒定。(2)用不同濃度(0,10,20,40 ng/ml)的FGF-2溶液對(duì)P3代hAMSCs進(jìn)行誘導(dǎo),CCK8法檢測(cè)不同濃度的FGF-2溶液對(duì)hAMSCs增殖的影響;誘導(dǎo)14天后,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)不同濃度的FGF-2溶液誘導(dǎo)后的hAMSCs韌帶和成骨相關(guān)基因的表達(dá)情況;Western Blot/免疫熒光檢測(cè)不同濃度的FGF-2溶液誘導(dǎo)后的hAMSCs韌帶和成骨相關(guān)蛋白的表達(dá);天狼猩紅染色檢測(cè)不同濃度的FGF-2...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及鑒定
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分 不同濃度的FGF-2溶液誘導(dǎo)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞及FGF-2慢病毒載體轉(zhuǎn)染人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分 富血小板血漿的制備及激活
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第四部分 FGF-2慢病毒載體介導(dǎo)的人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合兔自體富血小板血漿促進(jìn)腱-骨愈合
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3885232