染色質(zhì)重塑通過形成一系列重塑復(fù)合體對染色質(zhì)修飾進(jìn)行精確調(diào)控,影響各類轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子與染色質(zhì)結(jié)合的難易程度,進(jìn)而使細(xì)胞感受各種信號和環(huán)境剌激,并在調(diào)控基因時空特異性表達(dá)和沉默方面發(fā)揮重要作用,形成了一系列分子開關(guān)。SNF2類染色質(zhì)重塑復(fù)合體ATP酶在調(diào)控植物生長發(fā)育和對逆境的響應(yīng)中扮演極其重要的角色。CHR16是SNF2家族中的成員,目前關(guān)于CHR16的生物學(xué)功能鮮有報道。本課題組在前期工作中發(fā)現(xiàn)擬南芥CHR16基因通過調(diào)控CLV3,WUS,STM,PLT2,SCR,CYCB,QC46和QC184等基因的表達(dá),在SAM和RAM的形成及干細(xì)胞身份維持方面發(fā)揮重要的作用。為了探究CHR16的其它生物學(xué)功能,我們以擬南芥野生型Col-0、CHR16 T-DNA插入突變體chr16-1、chr16-2、chr16-3和chr16-4突變體為實(shí)驗(yàn)材料,通過表型分析、組織化學(xué)染色、酵母雙雜交、qPCR、生理以及轉(zhuǎn)錄組等方法,對CHR16的生物學(xué)功能做了進(jìn)一步研究,主要研究結(jié)果如下:1、通過表型分析、三引物法純雜合鑒定以及RT-PCR,我們發(fā)現(xiàn)chr16-1、chr16-2、chr16-3和chr16-...

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【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 前言
    1.1 染色質(zhì)重塑復(fù)合體
        1.1.1 染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能
        1.1.2 染色質(zhì)重塑復(fù)合體的結(jié)構(gòu)
        1.1.3 ATP依賴的染色質(zhì)重塑方式
        1.1.4 染色質(zhì)重塑復(fù)合物的分類
        1.1.5 SNF2染色質(zhì)重塑復(fù)合體
        1.1.6 Mot1染色質(zhì)重塑復(fù)合體
    1.2 染色質(zhì)重塑參與非生物脅迫的類型
        1.2.1 ABA和干旱脅迫
        1.2.2 鹽脅迫
        1.2.3 高溫脅迫
        1.2.4 DNA損傷脅迫
    1.3 植物對干旱脅迫的響應(yīng)機(jī)制
    1.4 本研究的背景及意義
第二章 實(shí)驗(yàn)材料方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)所用的儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)所用的藥品和試劑
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 種子春化與消毒
        2.4.2 植物DNA的提取
        2.4.3 GUS染色的方法
        2.4.4 大腸桿菌感受態(tài)的制備(SSCS法)
        2.4.5 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌的方法
        2.4.6 大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取
        2.4.7 膠回收的方法
        2.4.8 轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的方法
        2.4.9 酵母感受態(tài)的制備
        2.4.10 質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化酵母感受態(tài)的方法
        2.4.11 酵母質(zhì)粒的提取
        2.4.12 酵母蛋白的提取(Takara)
        2.4.13 Western Blot
        2.4.14 酵母雙雜交文庫篩選
        2.4.15 植物總RNA的提取
        2.4.16 反轉(zhuǎn)錄(東洋紡)
        2.4.17 轉(zhuǎn)化煙草的方法
        2.4.18 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析軟件
    2.5 實(shí)驗(yàn)所用到的引物
        2.5.1 純雜合鑒定、克隆及測序引物
        2.5.2 RT-PCR及 qPCR引物
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 擬南芥chr16突變體表型分析
    3.2 CHR16的組織定位
    3.3 酵母雙雜交篩選CHR16互作蛋白
    3.4 CHR16N蛋白相互作用的驗(yàn)證
    3.5 chr16-2 突變體對ABA更敏感
    3.6 chr16-2突變體耐旱性增強(qiáng)
    3.7 轉(zhuǎn)錄組分析
        3.7.1 取材方案
        3.7.2 RNA抽提、建庫及分析流程
        3.7.3 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中差異表達(dá)基因的分組比較
        3.7.4 干旱脅迫條件下差異表達(dá)基因的表達(dá)模式
        3.7.5 干旱脅迫差異表達(dá)基因?qū)﹃P(guān)鍵通路的影響
第四章 討論
    4.1 CHR16在擬南芥生長發(fā)育中的生物學(xué)作用
    4.2 CHR16蛋白的功能
    4.3 CHR16參與擬南芥干旱脅迫的響應(yīng)
    4.4 CHR16參與擬南芥干旱脅迫響應(yīng)可能的分子機(jī)制
    4.5 本課題的展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號：3871871