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CREB在小鼠眼睛發(fā)育中的磷酸化與SUMO化分析

發(fā)布時(shí)間:2023-04-08 01:27
  眼睛是動(dòng)物和人類(lèi)重要的視覺(jué)器官。就其結(jié)構(gòu)而言,它包括角膜、晶體狀和視網(wǎng)膜三個(gè)主要組織。在感光生理過(guò)程中,角膜把光線折射到晶狀體上,由晶狀體聚焦到視網(wǎng)膜上,通過(guò)視網(wǎng)膜視錐和視桿細(xì)胞的接受,并轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào),由中間神經(jīng)元傳遞至神經(jīng)節(jié)細(xì)胞經(jīng)視交叉進(jìn)入大腦,形成外面的圖像。在眼睛發(fā)育過(guò)程中,外胚層細(xì)胞經(jīng)視泡誘導(dǎo)成為增厚形成晶體板,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)和延伸形成晶體泡。晶體泡后面的細(xì)胞向中央移動(dòng),分化成晶狀體初級(jí)纖維細(xì)胞,填滿中央的空心位置。隨后晶體泡前端的上皮細(xì)胞向亞赤道區(qū)遷移,分裂后其中一個(gè)細(xì)胞分化形成次級(jí)纖維細(xì)胞。成體晶狀體由前端的上皮細(xì)胞和充滿晶狀體的纖維細(xì)胞構(gòu)成。在晶狀體發(fā)育過(guò)程中一系列轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控著晶狀體的發(fā)育。環(huán)腺苷應(yīng)答元件給合蛋白CREB是調(diào)節(jié)大腦生理功能的重要轉(zhuǎn)錄因子。我們最近的研究表明,CREB在晶狀體的應(yīng)激反應(yīng)中,其133號(hào)位點(diǎn)的絲氨酸被磷酸化,由此激活其轉(zhuǎn)錄功能,負(fù)性調(diào)節(jié)alphaB晶體蛋白的表達(dá),促進(jìn)晶體上皮細(xì)胞凋亡。CREB是否介導(dǎo)晶狀體的分化則尚待進(jìn)一步確定。本論文運(yùn)用現(xiàn)代分子生物學(xué)的研究方法首次闡明在小鼠晶狀發(fā)育過(guò)程中,CREB在不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)水平和活性狀態(tài)。結(jié)果表明,...

【文章頁(yè)數(shù)】:47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1 晶狀體的發(fā)育過(guò)程
    2 CREB概述
        2.1 CREB的結(jié)構(gòu)
        2.2 CREB激活的通路
        2.3 CREB的生物學(xué)功能
    3 翻譯后修飾磷酸化與SUMO化概述
        3.1 蛋白磷酸化與SUMO化的過(guò)程
        3.2 磷酸化與SUMO的生物學(xué)作用
第二章 材料、試劑與實(shí)驗(yàn)方法
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)耗材與試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 小鼠眼球取材
        2.2 提取組織蛋白
        2.3 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot)
        2.4 石蠟切片
        2.5 免疫組化DAB染色
        2.6 組織免疫熒光
        2.7 小鼠胚胎眼球取材
        2.8 免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)(Co-IP)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
    1.免疫組化分析CREB在胚胎小鼠晶狀體發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)與激活(S133位點(diǎn)磷酸化狀態(tài))
    2.免疫印跡檢測(cè)CREB在出生后小鼠晶狀體中的表達(dá)與激活
    3.免疫熒光分析CREB與 SUMO1和SUMO2/3 的共定位
    4.免疫共沉淀分析CREB是否與SUMO1 或者SUMO2/3 共價(jià)結(jié)合
第四章 討論及研究展望
參考文獻(xiàn)
研究生期間論文發(fā)表情況
致謝



本文編號(hào):3785721

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