水稻長護(hù)穎突變體和條紋葉突變體的基因鑒定與qRT-PCR表達(dá)分析
發(fā)布時(shí)間:2023-03-21 19:47
第一部分水稻長護(hù)穎突變體的基因克隆與表達(dá)分析利用EMS對(duì)水稻(Oryza sativaL.)保持系品種宜香1B進(jìn)行誘變,篩選出三份長護(hù)穎突變體Oslg-1, Oslg-2和Oslg-3,通過表型分析、等位性鑒定、基因定位和生物信息學(xué)分析,以及qRT-PCR表達(dá)分析,獲得如下結(jié)果:1. Oslg-1突變體小穗在幼穗發(fā)育早期與野生型無明顯差異,但在成熟期其護(hù)穎的遠(yuǎn)軸表皮細(xì)胞凸起且粗糙,形成的結(jié)節(jié)軸向?qū)R排列,且毛狀物較多,形成垂直相間的橫縱溝,表皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)與外稃的極其相似。2.利用F2分離群體對(duì)突變體Oslg-1進(jìn)行基因定位,遺傳分析表明,Oslg-1受一對(duì)隱性單基因控制,將OsLG基因定位于第7染色體短臂SSR標(biāo)記RM5344和RM20934之間,遺傳距離分別為1.11 cM和0.82 cM,物理距離為246.3 kb。3.對(duì)該區(qū)域候選基因測序分析,發(fā)現(xiàn)LOCOs07g04670在編碼區(qū)第182位堿基發(fā)生突變(T→A),導(dǎo)致其編碼蛋白第61位氨基酸改變(Leu→His)。等位性分析表明,Oslg-2, Oslg-3與Oslg-1屬等位變異,進(jìn)而對(duì)突變體Oslg-2和...
【文章頁數(shù)】:80 頁
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一部分 水稻長護(hù)穎突變體的基因克隆與表達(dá)分析
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 引言
2 水稻花器官發(fā)育
2.1 水稻花序分化及發(fā)育
2.2 水稻小穗的發(fā)育過程
3 水稻花器官發(fā)育相關(guān)基因的研究進(jìn)展
4 水稻長護(hù)穎相關(guān)基因的研究進(jìn)展
5 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 材料
1.2 試劑
1.3 儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 突變體Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3等位性鑒定
2.2 農(nóng)藝性狀考查及穗部表型觀察
2.3 組織細(xì)胞學(xué)觀察
2.4 遺傳分析及群體構(gòu)建
2.5 基因定位
2.6 候選基因的序列擴(kuò)增及測序
2.7 基因OsLG的序列同源比對(duì)及進(jìn)化分析
2.8 基因OsLG和PAP2的實(shí)時(shí)熒光定量組織表達(dá)分析
第三章 結(jié)果與分析
1 突變體花器官分析
1.1 突變體Oslg表型分析
1.2 突變體Oslg的組織細(xì)胞學(xué)分析
2 突變體Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3的等位性分析
3 突變體Oslg-1的遺傳分析
4 突變體Oslg-1的基因定位
5 突變體Oslg-1的候選基因的序列分析
6 基因OsLG的序列同源比對(duì)及進(jìn)化分析
7 OsLG和PAP2實(shí)時(shí)熒光定量(qRT-PCR)組織表達(dá)分析
第四章 討論
1 水稻長護(hù)穎基因的研究概況
2 長護(hù)穎突變體之間的等位差異
3 基因OsLG和PAP2的表達(dá)差異分析預(yù)測
4 小結(jié)與展望
第二部分 水稻溫敏型突變體stripe1-2和stripe1-3中的核糖核苷酸還原酶小亞基負(fù)責(zé)葉綠素的生物合成
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 引言
2 葉綠體的研究概況
2.1 葉綠體結(jié)構(gòu)及發(fā)育
2.2 影響水稻葉綠體發(fā)育的相關(guān)基因
3 葉綠素生物合成、調(diào)控與降解途徑的研究進(jìn)展
3.1 葉綠素的生物合成途徑
3.2 葉綠素生物合成途徑的調(diào)控
3.3 葉綠素的降解途徑
4 質(zhì)核信號(hào)的調(diào)控途徑
5 葉色突變體的類型
6 葉色突變體的應(yīng)用價(jià)值
7 水稻葉色突變相關(guān)基因的研究進(jìn)展
8 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 突變體stl-2和stl-3等位性鑒定
2.2 農(nóng)藝性狀調(diào)查、遺傳群體構(gòu)建及遺傳分析
2.3 葉綠素和類胡蘿卜素含量測定
2.4 光合作用的測定
2.5 透射電子顯微鏡觀察
2.6 基因定位
2.7 候選基因的預(yù)測及測序
2.8 蛋白結(jié)構(gòu)分析
2.9 溫度梯度實(shí)驗(yàn)
2.10 實(shí)時(shí)熒光定量定量PCR(qRT-PCR)特異性分析
第三章 結(jié)果與分析
1 突變體stl-2和stl-3的等位性分析
2 突變體stl-2和stl-3的表型特征
3 野生型和突變體的農(nóng)藝性狀和光合作用分析
4 野生型和突變體中光合色素的含量分析
5 透射電子顯微鏡觀察
6 stl-2和stl-3的基因定位
7 蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測和同源進(jìn)化分析
8 葉綠素生物合成途徑相關(guān)基因的表達(dá)分析
9 影響葉綠素發(fā)育的其他相關(guān)基因的表達(dá)分析
10 溫控實(shí)驗(yàn)中葉綠體發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)分析
第四章 討論
1 葉色突變體的溫敏特性
2 葉色突變體葉綠體發(fā)育特征
3 核糖核苷酸還原酶大小亞基調(diào)控
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
本文編號(hào):3767184
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ABSTRACT
第一部分 水稻長護(hù)穎突變體的基因克隆與表達(dá)分析
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 引言
2 水稻花器官發(fā)育
2.1 水稻花序分化及發(fā)育
2.2 水稻小穗的發(fā)育過程
3 水稻花器官發(fā)育相關(guān)基因的研究進(jìn)展
4 水稻長護(hù)穎相關(guān)基因的研究進(jìn)展
5 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 材料
1.2 試劑
1.3 儀器
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 突變體Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3等位性鑒定
2.2 農(nóng)藝性狀考查及穗部表型觀察
2.3 組織細(xì)胞學(xué)觀察
2.4 遺傳分析及群體構(gòu)建
2.5 基因定位
2.6 候選基因的序列擴(kuò)增及測序
2.7 基因OsLG的序列同源比對(duì)及進(jìn)化分析
2.8 基因OsLG和PAP2的實(shí)時(shí)熒光定量組織表達(dá)分析
第三章 結(jié)果與分析
1 突變體花器官分析
1.1 突變體Oslg表型分析
1.2 突變體Oslg的組織細(xì)胞學(xué)分析
2 突變體Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3的等位性分析
3 突變體Oslg-1的遺傳分析
4 突變體Oslg-1的基因定位
5 突變體Oslg-1的候選基因的序列分析
6 基因OsLG的序列同源比對(duì)及進(jìn)化分析
7 OsLG和PAP2實(shí)時(shí)熒光定量(qRT-PCR)組織表達(dá)分析
第四章 討論
1 水稻長護(hù)穎基因的研究概況
2 長護(hù)穎突變體之間的等位差異
3 基因OsLG和PAP2的表達(dá)差異分析預(yù)測
4 小結(jié)與展望
第二部分 水稻溫敏型突變體stripe1-2和stripe1-3中的核糖核苷酸還原酶小亞基負(fù)責(zé)葉綠素的生物合成
第一章 文獻(xiàn)綜述
1 引言
2 葉綠體的研究概況
2.1 葉綠體結(jié)構(gòu)及發(fā)育
2.2 影響水稻葉綠體發(fā)育的相關(guān)基因
3 葉綠素生物合成、調(diào)控與降解途徑的研究進(jìn)展
3.1 葉綠素的生物合成途徑
3.2 葉綠素生物合成途徑的調(diào)控
3.3 葉綠素的降解途徑
4 質(zhì)核信號(hào)的調(diào)控途徑
5 葉色突變體的類型
6 葉色突變體的應(yīng)用價(jià)值
7 水稻葉色突變相關(guān)基因的研究進(jìn)展
8 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
1 實(shí)驗(yàn)材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 突變體stl-2和stl-3等位性鑒定
2.2 農(nóng)藝性狀調(diào)查、遺傳群體構(gòu)建及遺傳分析
2.3 葉綠素和類胡蘿卜素含量測定
2.4 光合作用的測定
2.5 透射電子顯微鏡觀察
2.6 基因定位
2.7 候選基因的預(yù)測及測序
2.8 蛋白結(jié)構(gòu)分析
2.9 溫度梯度實(shí)驗(yàn)
2.10 實(shí)時(shí)熒光定量定量PCR(qRT-PCR)特異性分析
第三章 結(jié)果與分析
1 突變體stl-2和stl-3的等位性分析
2 突變體stl-2和stl-3的表型特征
3 野生型和突變體的農(nóng)藝性狀和光合作用分析
4 野生型和突變體中光合色素的含量分析
5 透射電子顯微鏡觀察
6 stl-2和stl-3的基因定位
7 蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測和同源進(jìn)化分析
8 葉綠素生物合成途徑相關(guān)基因的表達(dá)分析
9 影響葉綠素發(fā)育的其他相關(guān)基因的表達(dá)分析
10 溫控實(shí)驗(yàn)中葉綠體發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)分析
第四章 討論
1 葉色突變體的溫敏特性
2 葉色突變體葉綠體發(fā)育特征
3 核糖核苷酸還原酶大小亞基調(diào)控
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):3767184
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