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水稻長護穎突變體和條紋葉突變體的基因鑒定與qRT-PCR表達分析

發(fā)布時間:2023-03-21 19:47
  第一部分水稻長護穎突變體的基因克隆與表達分析利用EMS對水稻(Oryza sativaL.)保持系品種宜香1B進行誘變,篩選出三份長護穎突變體Oslg-1, Oslg-2和Oslg-3,通過表型分析、等位性鑒定、基因定位和生物信息學分析,以及qRT-PCR表達分析,獲得如下結(jié)果:1. Oslg-1突變體小穗在幼穗發(fā)育早期與野生型無明顯差異,但在成熟期其護穎的遠軸表皮細胞凸起且粗糙,形成的結(jié)節(jié)軸向?qū)R排列,且毛狀物較多,形成垂直相間的橫縱溝,表皮細胞結(jié)構(gòu)與外稃的極其相似。2.利用F2分離群體對突變體Oslg-1進行基因定位,遺傳分析表明,Oslg-1受一對隱性單基因控制,將OsLG基因定位于第7染色體短臂SSR標記RM5344和RM20934之間,遺傳距離分別為1.11 cM和0.82 cM,物理距離為246.3 kb。3.對該區(qū)域候選基因測序分析,發(fā)現(xiàn)LOCOs07g04670在編碼區(qū)第182位堿基發(fā)生突變(T→A),導(dǎo)致其編碼蛋白第61位氨基酸改變(Leu→His)。等位性分析表明,Oslg-2, Oslg-3與Oslg-1屬等位變異,進而對突變體Oslg-2和...

【文章頁數(shù)】:80 頁

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一部分 水稻長護穎突變體的基因克隆與表達分析
    第一章 文獻綜述
        1 引言
        2 水稻花器官發(fā)育
            2.1 水稻花序分化及發(fā)育
            2.2 水稻小穗的發(fā)育過程
        3 水稻花器官發(fā)育相關(guān)基因的研究進展
        4 水稻長護穎相關(guān)基因的研究進展
        5 本研究的目的和意義
    第二章 材料與方法
        1 實驗材料
            1.1 材料
            1.2 試劑
            1.3 儀器
        2 實驗方法
            2.1 突變體Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3等位性鑒定
            2.2 農(nóng)藝性狀考查及穗部表型觀察
            2.3 組織細胞學觀察
            2.4 遺傳分析及群體構(gòu)建
            2.5 基因定位
            2.6 候選基因的序列擴增及測序
            2.7 基因OsLG的序列同源比對及進化分析
            2.8 基因OsLG和PAP2的實時熒光定量組織表達分析
    第三章 結(jié)果與分析
        1 突變體花器官分析
            1.1 突變體Oslg表型分析
            1.2 突變體Oslg的組織細胞學分析
        2 突變體Oslg-1,Oslg-2和Oslg-3的等位性分析
        3 突變體Oslg-1的遺傳分析
        4 突變體Oslg-1的基因定位
        5 突變體Oslg-1的候選基因的序列分析
        6 基因OsLG的序列同源比對及進化分析
        7 OsLG和PAP2實時熒光定量(qRT-PCR)組織表達分析
    第四章 討論
        1 水稻長護穎基因的研究概況
        2 長護穎突變體之間的等位差異
        3 基因OsLG和PAP2的表達差異分析預(yù)測
        4 小結(jié)與展望
第二部分 水稻溫敏型突變體stripe1-2和stripe1-3中的核糖核苷酸還原酶小亞基負責葉綠素的生物合成
    第一章 文獻綜述
        1 引言
        2 葉綠體的研究概況
            2.1 葉綠體結(jié)構(gòu)及發(fā)育
            2.2 影響水稻葉綠體發(fā)育的相關(guān)基因
        3 葉綠素生物合成、調(diào)控與降解途徑的研究進展
            3.1 葉綠素的生物合成途徑
            3.2 葉綠素生物合成途徑的調(diào)控
            3.3 葉綠素的降解途徑
        4 質(zhì)核信號的調(diào)控途徑
        5 葉色突變體的類型
        6 葉色突變體的應(yīng)用價值
        7 水稻葉色突變相關(guān)基因的研究進展
        8 本研究的目的和意義
    第二章 材料與方法
        1 實驗材料
        2 實驗方法
            2.1 突變體stl-2和stl-3等位性鑒定
            2.2 農(nóng)藝性狀調(diào)查、遺傳群體構(gòu)建及遺傳分析
            2.3 葉綠素和類胡蘿卜素含量測定
            2.4 光合作用的測定
            2.5 透射電子顯微鏡觀察
            2.6 基因定位
            2.7 候選基因的預(yù)測及測序
            2.8 蛋白結(jié)構(gòu)分析
            2.9 溫度梯度實驗
            2.10 實時熒光定量定量PCR(qRT-PCR)特異性分析
    第三章 結(jié)果與分析
        1 突變體stl-2和stl-3的等位性分析
        2 突變體stl-2和stl-3的表型特征
        3 野生型和突變體的農(nóng)藝性狀和光合作用分析
        4 野生型和突變體中光合色素的含量分析
        5 透射電子顯微鏡觀察
        6 stl-2和stl-3的基因定位
        7 蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測和同源進化分析
        8 葉綠素生物合成途徑相關(guān)基因的表達分析
        9 影響葉綠素發(fā)育的其他相關(guān)基因的表達分析
        10 溫控實驗中葉綠體發(fā)育相關(guān)基因的表達分析
    第四章 討論
        1 葉色突變體的溫敏特性
        2 葉色突變體葉綠體發(fā)育特征
        3 核糖核苷酸還原酶大小亞基調(diào)控
參考文獻
致謝
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