雌核發(fā)育因其獲得后代遺傳物質(zhì)單一(由母本控制),是一種重要的魚類育種方式。普通二倍體魚產(chǎn)生單倍體卵子,直接進行雌核發(fā)育,不可存活,需通過物理、化學方法使染色體加倍。本實驗室通過遠緣雜交獲得的異源四倍體鯽鯉產(chǎn)生的二倍體卵子,可直接進行雌核發(fā)育,獲得二倍體子代,該子代可產(chǎn)生不減數(shù)的二倍體配子,再進行雌核發(fā)育時,孵化率更高。以上發(fā)育現(xiàn)象表明,二倍體卵子(尤其是雌核發(fā)育來源)在單性生殖時具有明顯的發(fā)育優(yōu)勢。但是關于該發(fā)育優(yōu)勢的分子機制,尚無相關研究。魚類受精卵經(jīng)10次分裂后,即1K細胞期,發(fā)生囊胚中期轉換,由母源性調(diào)控轉為合子型調(diào)控�，F(xiàn)有研究表明,卵子所儲備的母源性物質(zhì),不僅滿足胚胎發(fā)育早期分裂的需要,同時也可以改變?nèi)旧w的修飾狀態(tài),調(diào)控合子基因的激活表達。因此,我們對單倍體卵子和兩種來源的二倍體卵子進行了轉錄組分析來比較其物質(zhì)儲備的差異。同時,我們選取1K細胞期為時間節(jié)點,對自交產(chǎn)生的二倍體胚胎、雌核發(fā)育的單倍體胚胎和二倍體胚胎進行組蛋白后修飾的分析和轉錄組分析來初步揭示二倍體卵子發(fā)育優(yōu)勢的分子機制。通過研究獲得如下主要結果:(1)二倍體/單倍體卵子的轉錄組對比分析顯示,在二倍體卵子中1,2...

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【學位級別】：碩士

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摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 實驗魚的來源
        1.1.2 早期胚胎發(fā)育及合子基因激活
        1.1.3 魚類雌核發(fā)育
        1.1.4 單倍體綜合癥及其機制的研究現(xiàn)狀
        1.1.5 轉錄組技術在魚類研究中的運用
    1.2 研究的目的與意義
第二章 二倍體卵子與單倍體卵子的發(fā)育潛能機制比較
    2.1 引言
    2.2 材料
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 卵子及胚胎RNA的提取
        2.3.2 轉錄組測序文庫構建
        2.3.3 生物信息學分析流程
        2.3.4 q RT-PCR
        2.3.5 卵子及胚胎組蛋白的提取
        2.3.6 免疫印跡雜交
    2.4 實驗結果
        2.4.1 二倍體卵子、單倍體卵子和1K細胞期胚胎的轉錄組分析
        2.4.2 二倍體和單倍體胚胎差異表達基因的q RT-PCR驗證
        2.4.3 二倍體和單倍體胚胎1K細胞期組蛋白后修飾水平比較
    2.5 討論
第三章 兩種生殖方式影響二倍體卵子發(fā)育的比較
    3.1 引言
    3.2 材料
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器
    3.3 實驗方法
    3.4 實驗結果
        3.4.1 兩種來源二倍體卵子和雌核發(fā)育胚胎1K細胞期轉錄組分析
        3.4.2 兩種來源二倍體卵子差異表達基因的q RT-PCR驗證
        3.4.3 兩種雌核發(fā)育二倍體胚胎1K細胞期組蛋白后修飾水平比較
    3.5 討論
第四章 結論與展望
    4.1 結論
    4.2 展望
參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3762040