主要嗅覺(jué)表皮（main olfactory epithelium,MOE）是哺乳動(dòng)物的主要嗅覺(jué)器官。腺苷酸環(huán)化酶3（adenylyl cyclase 3,AC3）是主要嗅覺(jué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的重要成員之一。AC3缺失會(huì)影響嗅覺(jué)通路的表達(dá)。MOE暴露在外界環(huán)境中容易受到病原體的侵?jǐn)_;在體內(nèi)一些溶質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)也會(huì)影響到MOE的功能。體內(nèi)大多數(shù)溶質(zhì)是由轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)的,溶質(zhì)載體（solute carriers,SLC）超家族是膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族,在MOE中的溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)方面發(fā)揮重要作用。小鼠MOE中AC3缺失后是否會(huì)影響部分SLC家族成員的表達(dá)以及部分SLC家族成員表達(dá)發(fā)生改變后又會(huì)對(duì)MOE的功能產(chǎn)生怎樣的影響呢?這些問(wèn)題目前尚未得到解決。為了解決以上問(wèn)題,本文以野生型(AC3^+/+)、敲除型(AC3^-/-)和敲入型（hAC3）三種基因型小鼠MOE組織以及NIH3T3細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料,利用qRT-PCR、Western blot、IF、Co-IP以及質(zhì)譜等實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行以下探究:1、通過(guò)qRT-PCR實(shí)驗(yàn)初步在mRNA水平上對(duì)部分SLC家族成員的表... 

【文章來(lái)源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠主要嗅覺(jué)表皮（MOE）組織模式圖

河北大學(xué)碩士學(xué)位論文6圖1-2腺苷酸環(huán)化酶結(jié)構(gòu)圖Fig.1-2Structureofadenylylcyclase（引自http://www.baike.com/wiki/cAMP信號(hào)傳導(dǎo)途徑）1.3小鼠主要嗅覺(jué)信號(hào)通路嗅覺(jué)的產(chǎn)生是一系列分子進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的結(jié)果。從1996至2000年，通過(guò)敲除Golf、CNGα以及AC3后發(fā)現(xiàn)，基因敲除小鼠均喪失了氣味探測(cè)能力并且氣味刺激的電生理反應(yīng)喪失或者降低[42,46,47]。這些基因都是環(huán)磷酸腺苷(cyclicadenosinemonophosphate,cAMP)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的成員，因此cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路被認(rèn)為是哺乳動(dòng)物嗅覺(jué)神經(jīng)元進(jìn)行嗅覺(jué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要通路。OR位于神經(jīng)元纖毛上，可以檢測(cè)氣味分子。嗅覺(jué)是由嗅覺(jué)感覺(jué)神經(jīng)元表面上的OR之間的相互作用引發(fā)的。每個(gè)嗅覺(jué)感覺(jué)神經(jīng)元都表達(dá)單個(gè)的受體基因[48,49]。氣味分子與OR結(jié)合后會(huì)激活Golf蛋白[50]，Gα亞基與GTP結(jié)合變成活躍狀態(tài)后激活A(yù)C3[38]。AC3能將ATP轉(zhuǎn)換成cAMP[51]，大量增多的cAMP充當(dāng)?shù)诙攀勾蜷_(kāi)了CNG陽(yáng)離子通道，Na+尤其是Ca2+流入纖毛。然后Ca2+充當(dāng)?shù)谌攀勾蜷_(kāi)了Cl-通道，導(dǎo)致Cl-流出，這是膜去極化的一個(gè)過(guò)程。這個(gè)過(guò)程貢獻(xiàn)了OSN受體電流的80％至90％，因此膜去極化的放大步驟產(chǎn)生了動(dòng)作電位，并以神經(jīng)沖動(dòng)動(dòng)作電位的形式傳遞到嗅球，嗅球再將信息上傳到大腦，最終產(chǎn)生了嗅覺(jué)。

第一章文獻(xiàn)綜述9員使用微陣列分析氣味誘導(dǎo)時(shí)野生型和CNGA2缺陷型小鼠基因表達(dá)的差異時(shí)發(fā)現(xiàn)，SLC8A1在氣味誘導(dǎo)的野生型中表達(dá)量明顯上調(diào)，這說(shuō)明了SLC8A1可能在嗅覺(jué)傳遞過(guò)程中具有一定的潛在作用[79]。AC是調(diào)節(jié)細(xì)胞的關(guān)鍵效應(yīng)因子，有研究表明多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC6A3的表達(dá)與AC5的活性相關(guān)[80-82]。在心臟中AC6的表達(dá)可通過(guò)增加cAMP來(lái)改善心臟功能，在這其中鈣離子的平衡非常重要。AC6改善心臟功能的機(jī)制就包含了SLC8A1表達(dá)的減少，以及肌質(zhì)網(wǎng)鈣離子增多[83]。但目前在MOE中尚沒(méi)有關(guān)于AC3對(duì)SLC8A1、SLC6A3以及其他SLC家族成員表達(dá)影響的報(bào)道。由于SLC家族成員眾多，因此功能也是多種多樣的，對(duì)于SLC家族成員的研究可以為一些疾病的治療，靶標(biāo)蛋白的藥物設(shè)計(jì)等做鋪墊。嗅覺(jué)傳遞過(guò)程中涉及到多種溶質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)，在小鼠MOE中研究SLC家族成員的功能可以更好的解釋一些溶質(zhì)在嗅覺(jué)傳遞過(guò)程中的作用。圖1-3轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白分布圖Fig.1-3Diagramoftransporterdistribution（引自HedigerMA，2004）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]質(zhì)譜技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用發(fā)展[J]. 吳曉歌,魯新宇.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2007(10)



本文編號(hào)：3618929