香菇C91-3菌株是由我課題組多年篩選得到的一株藥用真菌。本實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過對(duì)香菇C91-3菌株轉(zhuǎn)錄組多年的測序和其功能的解析,從而初步的篩選出17條與細(xì)胞活性相關(guān)的基因。我們通過利用RACE（Rapid Amplificatioon of cDNA Ends,快速cDNA末端擴(kuò)增）技術(shù)獲得所篩選基因序列的全長。本實(shí)驗(yàn)研究關(guān)注的是經(jīng)帥選出的所有功能基因中的第5條基因,所以將其命名為latcripin-5基因（簡稱為LP-5）。我們通過對(duì)latcripin-5基因的生物信息學(xué)比對(duì),從而得出該基因具有降解核酸的作用。目的:本實(shí)驗(yàn)主要是通過構(gòu)建香菇C91-3菌株pET32a（+）-latcripin-5的原核重組表達(dá)載體,并使原核重組表達(dá)載體在大腸桿菌Ecoli.R中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。通過對(duì)誘導(dǎo)表達(dá)產(chǎn)物的生物學(xué)活性的檢測,來確定香菇中具有對(duì)細(xì)胞核酸發(fā)生降解作用和生物活性作用的功能性蛋白。①通過生物信息學(xué)軟件尋找并確定Latcripin-5基因序列及其功能蛋白。②將構(gòu)建的重組原核表達(dá)載體中的Latcripin-5基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌Ecoli.R中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),并對(duì)誘導(dǎo)表達(dá)的產(chǎn)物進(jìn)行生物學(xué)活性及功能的鑒定,... 

【文章來源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
第一部分 Latcripin-5 的克隆、表達(dá)及純化的研究
    前言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 Latcripin-5 的蛋白的生物學(xué)活性的研究
    前言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶FEN1及其與腫瘤的關(guān)系[J]. 周婷,高婷婷,孫洪芳,潘飛燕,何凌峰,郭志剛.  南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(02)
[2]香菇C91-3轉(zhuǎn)錄本Unigene14872基因Pkinase結(jié)構(gòu)域的克隆表達(dá)及其生物信息學(xué)分析[J]. 杜忠娟,鐘民濤,倫永志,劉奔,張偉,王曉麗,李星云,曹靖,寧安紅,黃敏.  微生物學(xué)雜志. 2014(01)
[3]重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 范翠英,馮利興,樊金玲,果德安,劉璇.  生物技術(shù). 2012(02)
[4]香菇菌C91-3凋亡相關(guān)蛋白24414對(duì)人肺癌細(xì)胞A549凋亡作用及其機(jī)制的研究[J]. 劉奔,鐘民濤,王曉麗,孫文長,李星云,劉磊,張偉,黃敏.  中華腫瘤防治雜志. 2012(06)
[5]香菇菌C91-3凋亡相關(guān)蛋白24414在畢赤酵母GS115中的表達(dá)與鑒定[J]. 劉奔,鐘民濤,王曉麗,孫文長,李星云,劉磊,寧安紅,黃敏.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2012(02)
[6]香菇菌C91-3凋亡相關(guān)蛋白24414對(duì)小鼠肝癌細(xì)胞Hca生物學(xué)功能的影響[J]. 劉奔,鐘民濤,王曉麗,孫文長,寧安紅,李星云,劉磊,黃敏.  大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)
[7]藥用真菌抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 申靜,房娟,伍治平,王熙才.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2012(01)
[8]香菇C91-3菌絲發(fā)酵液蛋白口服液抗腫瘤免疫機(jī)制的探討[J]. 鐘民濤,王曉麗,劉穎麗,劉磊,李星云,張偉,黃敏.  大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(06)
[9]多環(huán)芳烴接觸工人外周血DNA損傷與片狀核酸內(nèi)切酶基因多態(tài)性的關(guān)系[J]. 賓萍,段化偉,冷曙光,程娟,潘祖飛,戴宇飛,牛勇,劉清君,陳泓,劉慶,鄭玉新.  工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病. 2011(01)
[10]香菇藥用成分及其抗腫瘤作用的研究進(jìn)展[J]. 張玉軍,孔浩,王清路.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(31)

博士論文
[1]PARP-1在甲醛誘導(dǎo)的早期健康損害效應(yīng)中的作用[D]. 賈效偉.中國疾病預(yù)防控制中心 2014
[2]香菇C91-3轉(zhuǎn)錄組Latcirpin-3基因的原核表達(dá)、純化及其生物學(xué)活性的研究[D]. 安曉華.大連醫(yī)科大學(xué) 2014

碩士論文
[1]基因重組香菇C91-3菌凋亡相關(guān)蛋白Latcripin-2的克隆表達(dá)、純化及其抗腫瘤活性研究[D]. 杜忠娟.大連醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]褐藻多糖硫酸酯對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞增殖、遷移與凋亡的影響[D]. 王佳.大連醫(yī)科大學(xué) 2012
[3]基于納米粒子及核酸內(nèi)切酶的DNA生物傳感器及邏輯門的研究[D]. 孫麗.青島科技大學(xué) 2011
[4]柔嫩艾美耳球蟲3個(gè)發(fā)育相關(guān)基因的研究[D]. 馬衛(wèi)嬌.上海師范大學(xué) 2011
[5]艾迪注射液對(duì)食管癌術(shù)前干預(yù)的分子機(jī)制研究[D]. 王劍蓉.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2007



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