α-平滑肌肌動蛋白對神經干細胞激活的影響
發(fā)布時間：2021-06-27 08:20
目的:探究α-平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）表達與神經干細胞（neural stem cells,NSCs）激活之間的關系及其潛在機制。方法:培養(yǎng)原代NSCs,鑒定ACTA2 siRNA對NSCs的轉染效率。將細胞分為空白對照組（Control）、陰性對照組（Scramble）、溶劑對照組（Vehicle）、ACTA2敲低組（ACTA2 siRNA）,觀察各組間NSCs增殖、分化、遷移的差異。進一步檢測Rho家族（RhoA,Rac1,Cdc42）蛋白表達差異;用Rho相關蛋白激酶（ROCK）抑制劑Y27632干預ACTA2敲低的NSCs,觀察NSCs的遷移變化。結果:1.培養(yǎng)的原代NSCs具有良好的干性及多潛能分化能力,α-SMA可在NSCs中明顯表達,且ACTA2 siRNA明顯下調了NSCs中α-SMA的表達。2.ACTA2 siRNA組Ki67陽性細胞百分比降低,NeuN蛋白表達降低,GFAP、Olig2蛋白表達升高,與Control、Scramble和Vehicle組相比均具有統(tǒng)計學差異（p<0.01）。3.ACTA2 siRNA...
【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省
【文章頁數】：50 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
α-SMA在NSCs中表達Figure2-1.α-SMAexpressedinNSCs
ACTA2siRNA下調NSCs中α-SMA表達Figure2-2.ACTA2siRNAdecreasedexpressionofα-SMAinNSCs
遵義醫(yī)科大學碩士學位論文張吉22（A）Ki67（綠色）免疫染色,細胞核用藍色的DAPI復染。比例尺：100μm。（B）條形圖總結了每組中Ki67+細胞百分比定量（每組n=6）。*p<0.01。2.3.2α-SMA表達下調可抑制NSCs向神經元的分化，促進其向膠質細胞分化使用ACTA2siRNA轉染NSCs下調中α-SMA表達后，Westernblot結果顯示與Control、Scramble和Vehicle組相比，ACTA2siRNA組NSCs的NeuN蛋白表達降低（圖3-2A、B，p<0.01），GFAP、Olig2表達升高（圖3-2A、C、D，p<0.01）。圖3-2：α-SMA下調抑制NSCs向神經元分化，促進NSCs向膠質細胞分化Figure3-2.α-SMAdown-regulationinhibitedthedifferentiationofNSCsintoneuronsandpromotedNSCsdifferentiationintoglialcells（A）條帶代表NeuN、GFAP、Olig2的表達。GAPDH用作內參對照。（B）定量來自（A）的NeuN表達（每組n＝3）。（C）從（A）定量Olig2表達（每組n=3）。（D）從（A）中量化GFAP表達（每組n=3）。*p<0.01。2.3.3α-SMA表達下調可抑制NSCs遷移
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Stem cells:a promising candidate to treat neurological disorders[J]. Chang-Geng Song,Yi-Zhe Zhang,Hai-Ning Wu,Xiu-Li Cao,Chen-Jun Guo,Yong-Qiang Li,Min-Hua Zheng,Hua Han. Neural Regeneration Research. 2018(07)
[2]�；撬嵋种芌ho/ROCK信號通路活性促進生長受限胎鼠神經干細胞增殖的研究[J]. 劉方,王燕,劉敬,馬麗亞,吳志軍,盧光進. 中華實用兒科臨床雜志. 2017 (02)
[3]間充質干細胞遷移中的信號通路[J]. 黃生炫,劉窗溪. 醫(yī)學信息(上旬刊). 2011(04)
[4]神經干細胞定向遷移機制研究新進展[J]. 陳二濤,劉勇,馮東福,汪洋,李文生. 中華神經醫(yī)學雜志. 2008 (01)
[5]肌動蛋白與紐蛋白在神經干細胞定向分化為神經元過程中的表達[J]. 徐延豪,杜喆,石玉秀. 中國組織化學與細胞化學雜志. 2005(05)
博士論文
[1]Rho-GDIγ介導的神經干細胞分化調控網絡及CDC50A-P4-ATPase相互作用與功能研究[D]. 王嬌.上海大學 2012
本文編號：3252488
【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省
【文章頁數】：50 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
α-SMA在NSCs中表達Figure2-1.α-SMAexpressedinNSCs
ACTA2siRNA下調NSCs中α-SMA表達Figure2-2.ACTA2siRNAdecreasedexpressionofα-SMAinNSCs
遵義醫(yī)科大學碩士學位論文張吉22（A）Ki67（綠色）免疫染色,細胞核用藍色的DAPI復染。比例尺：100μm。（B）條形圖總結了每組中Ki67+細胞百分比定量（每組n=6）。*p<0.01。2.3.2α-SMA表達下調可抑制NSCs向神經元的分化，促進其向膠質細胞分化使用ACTA2siRNA轉染NSCs下調中α-SMA表達后，Westernblot結果顯示與Control、Scramble和Vehicle組相比，ACTA2siRNA組NSCs的NeuN蛋白表達降低（圖3-2A、B，p<0.01），GFAP、Olig2表達升高（圖3-2A、C、D，p<0.01）。圖3-2：α-SMA下調抑制NSCs向神經元分化，促進NSCs向膠質細胞分化Figure3-2.α-SMAdown-regulationinhibitedthedifferentiationofNSCsintoneuronsandpromotedNSCsdifferentiationintoglialcells（A）條帶代表NeuN、GFAP、Olig2的表達。GAPDH用作內參對照。（B）定量來自（A）的NeuN表達（每組n＝3）。（C）從（A）定量Olig2表達（每組n=3）。（D）從（A）中量化GFAP表達（每組n=3）。*p<0.01。2.3.3α-SMA表達下調可抑制NSCs遷移
【參考文獻】：
期刊論文
[1]Stem cells:a promising candidate to treat neurological disorders[J]. Chang-Geng Song,Yi-Zhe Zhang,Hai-Ning Wu,Xiu-Li Cao,Chen-Jun Guo,Yong-Qiang Li,Min-Hua Zheng,Hua Han. Neural Regeneration Research. 2018(07)
[2]�；撬嵋种芌ho/ROCK信號通路活性促進生長受限胎鼠神經干細胞增殖的研究[J]. 劉方,王燕,劉敬,馬麗亞,吳志軍,盧光進. 中華實用兒科臨床雜志. 2017 (02)
[3]間充質干細胞遷移中的信號通路[J]. 黃生炫,劉窗溪. 醫(yī)學信息(上旬刊). 2011(04)
[4]神經干細胞定向遷移機制研究新進展[J]. 陳二濤,劉勇,馮東福,汪洋,李文生. 中華神經醫(yī)學雜志. 2008 (01)
[5]肌動蛋白與紐蛋白在神經干細胞定向分化為神經元過程中的表達[J]. 徐延豪,杜喆,石玉秀. 中國組織化學與細胞化學雜志. 2005(05)
博士論文
[1]Rho-GDIγ介導的神經干細胞分化調控網絡及CDC50A-P4-ATPase相互作用與功能研究[D]. 王嬌.上海大學 2012
本文編號：3252488
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